人参皂苷Rg1对大脑皮质神经细胞生物膜的影响

目的:研究人参皂苷Rg1对原代培养正常大鼠大脑皮质神经细胞生物膜的影响。方法:采用细胞培养技术,运用比色法、硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)和微量酶标法测定人参皂苷Rg1对细胞内ACP活力、MDA含量、SOD活力及LDH释放量的影响。结果:1mg/ml、2 mg/ml及4 mg/ml人参皂苷Rg1作用30min可不同程度增加正常培养神经细胞的LDH释放量和细胞内SOD活力,降低细胞内ACP活力及MDA含量。结论:1mg/ml、2 mg/ml及4 mg/ml人参皂苷Rg1作用30min对正常培养大脑皮质神经细胞生物膜具有显著影响,其中对溶酶体膜有保护作用,对生物膜的脂质过氧化反应有抑制作用,能减轻自由基对生物膜的攻击及损伤,但对细胞膜可能有一定的损伤作用。     

补阳还五汤对前脑缺血再灌注损伤沙鼠p38MAPK/神经细胞凋亡通路的影响

目的:探讨补阳还五汤注射对脑缺血再灌注损伤的治疗作用及机制。方法:88只雄性蒙古沙鼠随机分成对照组、模型组和补阳还五汤高剂量组(51.48mg/kg)、低剂量组(25.74mg/kg)。Kirino的方法制作沙鼠前脑缺血模型。术后1、6h,1d、3d、7d尼氏染色观察海马区神经细胞组织形态变化,免疫组化法和Western-Blot法检测海马区磷酸化p38MAPK和Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测凋亡细胞,术后7～13d八臂迷宫法测试动物学习记忆功能。结果:与对照组比较,脑缺血后海马神经元结构损伤明显、磷酸化p38MAPK表达水平、Caspase-3蛋白表达、凋亡神经细胞数量增加;大鼠的习记忆功能下降;与模型组比较,补阳还五汤组中大鼠的习记忆功能得到改善、神经元形态结构损伤减轻、磷酸化p38MAPK蛋白、Caspase-3蛋白以及神经细胞凋亡数量回降,上述变化在高剂量补阳还五汤组更为明显。结论:补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤有治疗作用,其机制与调控p38MAPK信号通路,抑制神经细胞凋亡有关。     

HPLC法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量

目的 :采用 HPL C法测定银杏叶提取物中总黄酮甙含量。方法 :选用 ODS3柱 ,甲醇 - 0 .4%磷酸溶液 (5 0 :5 0 )为流动相 ,检测波长 370 nm。结果 :线性范围在 0 .6 45～ 2 .5 80μg(r=0 .9999) ,平均加样回收率为99.34 % ,RSD为 1.0 6 (n=5 ) ,所测定 3个厂家生产的 9批银杏叶提取物的含量在 2 4.1%～ 2 8.8%之间。结论 :方法简便快速 ,适合于银杏叶提取物的质量控制。     

异补骨脂素对体外培养大鼠成骨细胞增殖分化成熟的影响

目的:研究异补骨脂素(Isopsoralen,IP)对体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖与分化成熟的影响。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法获得成骨细胞,培养于含10%FBS的MEM培养液中,3 d后首次换液,铺满90%皿底后传代培养;增殖分析采用96孔板,加入在培养液中终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol/L的异补骨脂素,MTT法分析;分化分析采用24孔板,于成骨性诱导培养第3、6、9、12、15天分别测碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性、钙含量、骨钙素,第12天进行ALP组织化学染色,第14天进行茜素红染色和钙化结节计数。结果:终浓度为1×10-4mol/L的异补骨脂素对细胞增殖有抑制作用,而1×10-5mol/L浓度虽对ROB增殖无明显影响,但能显著提高细胞ALP活性、增加钙含量、促进骨钙素分泌,并增加钙化结节数量。结论1×10-5mol/L异补骨脂素能促进ROB分化成熟,应为中药补骨脂抗骨质疏松的有效成分。     

厚朴三物汤拆方及其药量变化的实验研究

目的：厚朴三物汤拆方分析基础上,对厚朴三物汤、厚朴大黄汤、小承气汤进行比较研究。方法：取混有碳末的药物煎液给小鼠灌胃,计算碳末推进率;将家兔小肠标本浸入台氏液中,滴加药物煎液,描记平滑肌收缩曲线。结果：厚朴三物汤显示出明显的推进作用（推进率83.45%);滴加各药物后,平滑肌收缩强度及频率都明显降低,以厚朴三物汤最为突出,结论：配伍后的厚朴三物汤提高了大黄、枳实,厚朴各药的推进作用;三方中以厚朴三物汤对小肠平滑肌影响最大。     

中医药临床系统生物学研究体系与实践

中医药临床系统生物学是为适应中医药临床研究和转化医学的需要,以推动"系统-系统"模式的中医药现代化和国际化为目标,在中医药整体观和系统论指导下,整合运用多种系统生物学技术,通过对病、证诊疗方法和药物临床合理应用方法的创新研究来为临床服务,提高临床诊治水平的学科。针对现行研究中存在的"方、证、病割裂,基因、蛋白质、代谢物分离"等问题,我们提出构建以多层面生物标志物群为特征的临床系统生物学研究体系。整合的生物标志物群包括中医证候指标、临床生化及影像学指标、系统生物学标志物群多个层面,系统生物学指标包含基因、蛋白质、代谢物多个层次的标志物群。建立的整合生物标志物体系可应用于疾病早期预警、临床诊治、指导个性化用药、疾病预后以及药物评价。以近年来我们开展的糖尿病肾病中医药临床系统生物学研究为例,开展了包含中医证候指标和临床病理生化指标研究,还包括整体代谢指纹特征谱以及七大类百余种磷脂、15种脂肪酸、21种嘌呤嘧啶、8种硫醇氨基酸的定量指标和14种糖尿病肾病相关基因在内的系统生物学研究,初步得出整合生物标志物群(IBS),应用于糖尿病肾病气阴两虚证的辅助诊断和糖肾方临床疗效评价,可为系统生物学应用于中医药临床研究和实践应用提供参考。以临床疗效为导向的中医药现代化研究是中医药发展的最佳途径。     

附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性研究

目的：探讨附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性。方法：取健康、合格Beagle犬16只,按体质量随机分为空白组、刨附片组、炮天雄组和黑顺片组。以4 g生药/kg灌胃给药,实验前及给药后1 h、24 h和第3、7、14天测定体质量、耗食量、肛温、心电图及血常规、血生化。结果：3个实验组Beagle犬在给药后均精神萎靡,血液电解质有显著性差异,其中黑顺片组最明显;刨附片组犬的红细胞、血糖和甘油三酯有显著性差异;炮天雄组犬的淋巴细胞和血糖有显著性差异,而黑顺片给药后犬的淋巴细胞显著降低。结论：3个炮制品毒性大小依次为黑顺片>刨附片>炮天雄。     

疏肝健脾法治疗2型糖尿病30例

目的观察疏肝健脾法治疗肝郁脾虚型2型糖尿病的临床疗效。方法选择符合标准的肝郁脾虚型2型糖尿病患者60例,随机分为治疗组30例（中西药结合组）和对照组30例（西药组）,记录治疗前后的血糖、血脂、胰岛素水平、体重指数、胰岛素抵抗指数及中医证候积分,进行统计学分析。结果治疗组和对照组在治疗前后的血糖、血脂、体重指数、胰岛素抵抗指数和中医证候积分方面均有明显改善,在改善餐后2小时血糖、甘油三酯、胰岛素抵抗指数、中医证候积分方面,治疗组明显优于对照组（P〈0．05）。结论疏肝健脾法可明显改善临床症状、体征,改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗,降低胰岛素、血糖、血脂水平。疏肝健脾法对于治疗2型糖尿病具有良好的效果。     

采用高架十字迷宫实验优选抗焦虑复方中药制剂中当归和川芎的制备工艺

目的:通过小鼠高架十字迷宫药效学实验对抗焦虑复方中药制剂中当归和川芎的两种制备工艺(煎煮法和双提法)进行优选。方法:健康雄性昆明种小鼠,随机分为空白对照组、阳性药地西泮组、抗焦虑中药(归芎煎煮法)高、中、低剂量组、抗焦虑中药(归芎双提法)高、中、低剂量组。空白对照组给予生理盐水及其余各组给药10d,第10d进行高架十字迷宫药效学测试,对开臂时间百分率和开臂次数百分率进行统计。结果:与空白对照组比较,地西泮组和归芎双提法高、中剂量组的开臂时间百分率和开臂次数百分率均有显著性差异(P<0.05),而归芎煎煮法各剂量组未见统计学意义。结论:采用双提法提取当归和川芎制备的抗焦虑中药的抗焦虑药效优于采用煎煮法的制剂。     

脊髓纵裂的手术疗效观察

收治脊髓纵裂４６例，其中２９例作神经功能状态的临床评价及胫后神经皮层体感诱发电位检查。结果：非手术组随访后神经功能缺陷无改善（Ｐ＞０．０５）；２０例手术组神经功能的临床评分明显增加及胫后神经皮层体感诱发电位明显改善（Ｐ＜０．０５）。表明手术不仅可阻止神经功能缺陷的发展，而且可使其得到改善，是一有效的治疗手段。