HPLC法测定元胡止痛栓中延胡索乙素含量

目的：采用HPLC法测定元胡止痛栓中延胡索乙素的含量。方法：采用Zorbax 80A Extend-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-水-三乙胺（55∶45∶0.1）,流速1.0 mL.min-1,检测波长280 nm,柱温30℃。结果：延胡索乙素进样浓度在19.5~97.5μg.mL-1范围内,与峰面积呈现良好的线性关系,平均回收率（n=6）为100.6%,RSD为1.07%。结论：该方法简便、准确、重复性好,可作为元胡止痛栓的质量控制方法。     

Toll样受体4、核因子-κb通路在溃疡性结肠炎发病机制中的应用

目的:通过研究Toll样受体4(Toll-like receptor,TLR4)、髓样分化分子88(myeloid differentiation factor,Myd88)、核因子-κb(nuclear factor-κb,NF-κb)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型结肠组织中的表达以及外周血中白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)的表达水平,探讨TLR4/NF-κb信号通路在UC发病中的作用。方法:将健康SD大鼠40只随机分为模型组(A组)和正常对照组(B组),每组各20只,运用复合法(三硝基苯磺酸+乙醇)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型,造模成功后,进行大体形态损伤评分,HE染色观察大鼠结肠黏膜组织学改变,采用RT-PCR法检测UC各组大鼠结肠黏膜组织中TLR4、Myd88和NF-κb表达,采用ELISA法检测外周血中IL-1的表达。结果:与B组比较,A组大鼠结肠黏膜大体形态评分、组织学损伤评分、结肠黏膜组织中TLR4、Myd88和NF-κb的表达及外周血中IL-1的表达均显著增高(P0.01)。结论:UC大鼠模型中TLR4、Myd88、NF-κb和IL-1的表达明显升高,TLR4可能通过介导NF-κb引发信号通路下游的基因表达,从而导致炎症因子的释放。     

牡蛎中诺如病毒核酸两种提取方法比较

目的寻找简便有效的更适合长期监测的牡蛎中诺如病毒核酸提取的方法。方法通过甘氨酸聚乙二醇富集后硅胶膜离心
柱法（方法A）和蛋白酶K生物消化后顺磁性硅胶基法（方法B）两种核酸提取方法,采用实时RT-PCR检测自然状态的牡蛎和人
工染毒状态的牡蛎来进行比较。结果两种方法的阳性检出率没有差异,总体比较方法B的病毒回收率高。结论方法B优于
方法A,且方法B更快捷,故方法B更适合长期监测。
     

小鼠骨髓DCs的高效扩增及其表型特征

目的:建立体外大量扩增骨髓树突状细胞(bone marrow derived dendritic cells,Bm-DCs)的方法,并分析其免疫表型特征。方法:以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)从C57BL/6小鼠骨髓细胞中诱导产生骨髓未成熟树突状细胞(immol/Lature DCs,imDCs),6 d后以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)进一步刺激产生成熟树突状细胞(mature DCs,mDCs)。以流式细胞技术检测imDCs、mDCs的CD11c、MHCⅡ、CD86、B220的表达。同时检测imDCs、mDCs刺激近交系BALB/c小鼠CD4+T淋巴细胞增殖的功能。结果:(1)每只小鼠的双侧股骨可以得到(4.0～6.0)×106个DCs;(2)CD11c、MHCⅡ、CD86、B220的表达率在imDCs和mDCs分别为(71.67±1.53)%、(25.67±2.08)%、(7.67±1.53)%、(9.00±1.00)%;(81.67±1.53)%、(55.67±3.06)%、(45.33±2.08)%、(8.00±1.00)%,其中imDCs、mDCs的CD11c、MHCⅡ、CD86的表达差异具有统计学意义(P<0.01);两组DCs的B220均为低表达;(3)成熟DCs具有很强的刺激近交系小鼠T淋巴细胞增殖的能力。结论:联合应用GM-CSF、IL-4可从小鼠骨髓中诱导扩增大量DCs;诱导产生的DCs的免疫表型特征为CD11chiMHC-Ⅱ+B220-,总体与常规DCs(conventional DCs,cDCs)相似。     

新疆贫困县医务人员专业技术熟悉度及培训需求现状调查

目的了解新疆贫困县医务人员对专业技术的熟悉度和培训需求,为提高农村医务人员的服务能力提出相应对策与建议。方法采用随机分层抽样方法,在新疆36个贫困县中随机抽取6个贫困县中6个县医院、18个乡卫生院和54个村卫生室的医务人员作为研究对象,采用现场问卷调查,用构成比对医务人员基本情况、医务人员专业熟悉度及培训需求进行统计描述。结果被调查的医务人员学历、职称偏低,从事专业科目较集中;医生对专业技术熟悉排在前3位的是内科、外科和妇科;护士对专业技术熟悉排在前3位的是临床护理、急救护理和慢性病的临床护理;医务人员对公共卫生相关专业的熟悉程度均低;同时对各最熟悉的基本学科的培训需求度高。结论根据贫困县实际发展情况,加强对基本医疗和公共卫生专业知识的培训,增加检验及影像等医技人员,并且加强乡镇卫生院全科医生的在职培训,从而全面提高医疗机构服务能力,以满足新疆农村贫困地区的基本医疗和公共卫生服务需求。     

辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病肺功能的影响及作用机制研究

目的观察辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者肺功能及血清中炎症因子IL-6、TNF-α、NO的影响。方法将40例确诊为COPD稳定期的患者随机分为两组,对照组予常规治疗,试验组在常规治疗的基础上加用辛伐他汀20mg,每晚1次,疗程均为6个月,于治疗前后分别检测两组患者的肺功能、血清中IL-6、TNF-α、NO的水平。结果治疗前两组肺功能、血清中IL-6、TNF-α、NO的水平比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组在治疗6个月后肺功能高于对照组(P<0.05),血清中IL-6、TNF-α水平较对照组低(P<0.05),NO水平较对照组高(P<0.05)。结论辛伐他汀能够降低COPD患者IL-6、TNF-α水平,升高NO的水平,延缓肺功能的下降。     

X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的一个新方法

目的:探讨X-连锁肾上腺脑白质营养不良分子诊断中排除假基因干扰的新方法。方法:应用长链RT-PCR技术扩增3个X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因编码区全长,再分4个片段进行二次PCR,并对PCR产物直接测序;应用巢式PCR对ABCD1基因相应区域进行扩增,其中第一轮PCR产物覆盖ABCD1基因从外显子6至3′非编码区的一个大片段,并对PCR产物进行测序,分析患者的基因组DNA,进一步确证其ABCD1基因突变。结果:在3个XALD患者的ABCD1基因上,存在3个不同的碱基改变(2235C>T,2065C>T和2190A>T),分别造成2个错义突变(R617C和P560L)和1个无义突变(K602X)。结论:应用巢式PCR能快速、有效地排除X-ALD分子诊断中ABCD1假基因的干扰。     

CD24在人胚肾上皮细胞Hek293中的表达及检测

目的构建含有CD24基因的重组质粒,在人胚肾上皮细胞Hek293中表达出具有免疫原性的抗原。方法用PCR方法扩增CD24基因,克隆到载体pYD5-hFC中,获得重组质粒pYD5-CD24,转化DH10α感受态细胞中,挑选克隆抽取质粒,以脂质体介导将质粒转染Hek293细胞,72 h后收集细胞培养上清,Western-Blot分析鉴定。结果构建了含有CD24基因的重组质粒,并在人胚肾上皮细胞Hek293中获得带有hFC标签的CD24蛋白。结论本研究成功表达出了具有免疫原性的CD24蛋白。     

正交试验优选贯叶金丝桃中金丝桃苷的乙醇提取工艺

目的探索贯叶金丝桃药材中金丝桃苷的乙醇提取工艺。方法以金丝桃苷的含量为考察指标,采用正交设计法对影响乙醇提取效果的因素进行优选。结果最佳提取条件为10倍90%乙醇提取2次,每次1.5 h。结论最佳优选结果用于验证实验具有较好的重现性。     

血清IL-18、IL-10测定在肾移植急性排斥反应中的意义

目的 探讨IL-18、IL-10在肾移植急性排斥反应中的作用及临床意义。方法采用ELISA法和RIA法分别检测肾移植患者手术前、手术后1周及2周血清IL-18、IL-10含量，并进行比较分析。结果肾移植患者手术前IL-18和IL-10水平明显高于正常对照组（P〈0．01，P〈0．05）。手术后1周急性排斥组与稳定组比较IL-18和IL-10差异均无显著性（P〉0．05）；手术后2周急性排斥组IL-18水平明显高于稳定组（P〈0．01）．IL-10水平明显低于稳定组（P〈0．05）。结论 肾移植手术前后监测血清IL-18和IL-10水平变化，对于判断急性排斥反应有一定临床意义。