肺炎链球菌ciaH/R基因重组表达及CiaH/R与β-内酰胺类耐药相关性

目的：构建肺炎链球菌ciaH和ciaR基因的原核表达系统，探讨ciaH和CiaR封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长ciaH和ciaR基因，以常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rCiaH和rCiaR表达量。制备rCiaH和rCiaR兔抗血清及其IgG。检测IgG胞外或胞内封闭肺炎链球菌菌株CiaH和CiaR后，细菌对青霉素和头孢噻肟耐药性的变化。结果：与报道序列比较，所克隆的ciaH和ciaR基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99．9％～100％和100%。所构建的工程菌E．coli BL21DE3^pET42A-ciaH和E．coli BL21DE3^pET42a-ciaR能高效表达目的重组蛋白rCiaH和rCiaR，其产量分别高达细菌总蛋白的33％和45％。rCiaH、rCiaR抗血清及其IgG免疫双扩散效价分别为1：4、1：4和1：1、1：1。CiaH—IgG胞外或胞内封闭CiaH、CiaR—IgG胞内封闭CiaR后，青霉素及头孢噻肟敏感菌株可出现对两种抗生素的耐药性，但对耐药菌株耐药性无明显影响。结论：成功地构建了肺炎链球菌ciaH／ciaR基因原核表达系统，为深入研究该TCS与耐药性关系奠定了基础。CiaH和CiaR均与肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟耐药性有关。     

转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响

目的 研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制.方法 构建 maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Western blot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化.结果 经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1.成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低.结论 成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达.     

HCMV感染对人胚肺成纤维细胞MCM2和MCM8表达的影响

目的研究HCMV感染对人胚肺成纤维（HEL）细胞微小染色体维持蛋白2（MCM2）和微小染色体维持蛋白8（MCM8）表达的影响，探讨HCMV感染可能的发病机制。方法用HCMV感染血清饥饿法同步化的HEL细胞。HCMV感染的HEL细胞作为HCMV感染组，同时设非感染组为对照组。于HCMV感染后12、24、48、72和96h收获细胞，提取总RNA，采用半定量逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）检测HEL细胞MCM2和MCM8 mRNA的表达水平。结果12、24、48、72、96h时2组细胞MCM2和MCM8 mRNA表达水平差异均有显著性（P均〈0.05），12h和24h时HCMV感染组表达水平低于非感染组，48、72、96h时HCMV感染组表达水平明显高于非感染组。非感染组MCM2、MCM8 mRNA表达水平的高峰出现在感染后24h，而HCMV感染组表达水平的高峰则出现在感染后48h，较之有明显滞后。结论HCMV能诱导HEL细胞MCM2及MCM8 mRNA表达异常．使MCM2及MCM8 mRNA表达水平迟滞，这可能是HCMV感染阻滞宿主细胞周期的发病机制之一。     

放射医疗设备的检修方法

根据放射医疗设备的发展,结合笔者多年来从事放射医疗设备检修的实践,对设备的检修方法做了总结.     

微小病变型肾病综合征激素耐药和敏感的比较尿蛋白质组学研究

目的 研究儿童微小病变型激素耐药与激素敏感型肾病综合征的尿中差异蛋白质表达,鉴定出肾病综合征激素耐药相关蛋白.方法 应用双向电泳相关技术结合基质辅助激光/电离飞行时间质谱仪技术,比较激素敏感和激素耐药微小病变型肾病综合征尿蛋白表达图谱寻找差异蛋白,对差异蛋白质斑点酶切,质谱分析,获得肽质量指纹图,通过蛋白质数据库进行蛋白检索分析.结果 成功地得到儿童微小病变型肾病综合征激素耐药尿蛋白双向电泳图谱.肾病综合征耐药型与激素敏感型蛋白表达比较,发现有30个蛋白质斑点显著差异改变.对14个差异蛋白质斑点酶切,质谱分析结合蛋白数据库检索获得12个蛋白,分别为驱动蛋白家族成员27、磷脂酰丝氨酸转移蛋白、大疱性类天疱疮抗原1异构体、α1蛋白酶抑制剂、Zn-α2糖蛋白、α1B糖蛋白、血清白蛋白前体、结合珠蛋白前体、类驱动蛋白样动力蛋白、白介素1受体相关激酶4、胞质动力蛋白、细胞角蛋白9.与激素敏感蛋白图谱比较,在激素耐药蛋白图谱上蛋白酶抑制剂、α1B糖蛋白、IRAK4表达下调,其余9种蛋白表达上调.结论 上述蛋白的鉴定将对激素耐药治疗靶位和耐药型肾病综合征诊断的分子标志物发现可能有所裨益.     

右冠状动脉发育细小的临床评价

目的 评价右冠状动脉发育细小(或发育不良)的临床意义.方法 本组共收集到选择性冠状动脉造影表现为右冠状动脉发育细小者77例,对其中43例单纯右冠状动脉发育细小者的临床症状和心电图表现进行了分析.结果 43例单纯右冠状动脉发育细小者胸闷症状发生率较高,达69.8%(30/43);而其中心电图活动平板试验阳性者仅有6例;目前出院诊断均未单独列出"右冠状动脉发育细小"这一诊断,而多采用了"心脏神经官能症".结论 右冠脉发育细小者较常出现胸闷症状,建议临床采用"右冠脉发育细小(或发育不良)综合征",利于采用针对性药物治疗;鉴于文献有右冠脉发育细小导致心源性猝死的报道,因此对这部分患者做好随访也很有必要.     

益肾养阴活血汤联合西医治疗早期糖尿病肾病对照研究

[目的]观察益肾养阴活血汤联合西医治疗早期糖尿病肾病疗效。[方法]将60例患者分为治疗组和对照组,每组30例。对照组进行糖尿病教育并行糖尿病饮食、运动疗法、继续原有降糖治疗;治疗组在对照组的治疗基础上加用益肾养阴活血汤(药用黄芪、太子参、生地黄、麦冬、石斛,等),水浓煎,1剂/d,分2次,口服。两组均治疗2个疗程(60d),2个疗程结束后判定疗效。[结果]治疗组总有效率93.30%,对照组总有效率83.30%,治疗组临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗组尿蛋白、血糖改善情况明显优于对照组(P<0.05)。[结论]益肾养阴活血汤联合西医治疗早期糖尿病肾病疗效满意,可有效降糖、降脂,改善肾小球的高滤过,减少尿蛋白的排泄,保护肾功能。     

决明子中总蒽醌苷元的大孔吸附树脂纯化工艺的研究

目的探索决明子蒽醌苷元的大孔吸附树脂纯化工艺。方法以决明子总蒽醌苷元质量分数和收率为主要考察指标,比较了乙醚和氯仿对蒽醌苷元提取的专属性,考察了大孔吸附树脂S-8、AB-8、X-5、NKA-12、D4020、D-101对决明子蒽醌苷元的吸附和解吸附特性以及纯化能力。结果决明子药粉采用氯仿浸提,上S-8型大孔树脂柱,水洗至中性,乙醇-5%NaOH(4∶1)洗脱,醇碱洗脱液浓缩、酸化处理得到质量分数为42.62%的蒽醌苷元。结论建立了一种蒽醌苷元的纯化工艺,为决明子中蒽醌苷元类成分的工业化生产提供依据。     

复方甘草含片与复方甘草片的药效学比较研究

目的 比较复方甘草含片与复方甘草片的止咳、化痰、平喘以及抗炎作用。方法 采用小鼠氨水引咳模型,通过检测小鼠咳嗽潜伏期以及3 min内咳嗽次数,比较空白组和给药组的止咳效果;采用气管段酚红排泌量测定法,通过检测OD值,比较复方甘草含片与复方甘草片的化痰作用;采用磷酸组胺致豚鼠哮喘方法,通过检测豚鼠引喘潜伏期以及抽搐跌倒的豚鼠数量,比较空白组和给药组的平喘作用;采用二甲苯致炎模型,通过检测小鼠耳廓肿胀度及肿胀抑制率,比较复方甘草含片与复方甘草片的抗炎效果。结果 与空白对照组相比,给药组均可延长小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数（P＜0.01,P＜0.05）,可明显延长豚鼠引喘潜伏期（P<0.01）,减少抽搐跌倒的豚鼠数量;给药组OD值明显增大（P＜0.01）,表示复方甘草含片及复方甘草片均可明显增加酚红排泌量,具有化痰作用,且对小鼠耳廓肿胀的抑制率明显增高（P<0.01）,具有抗炎作用。与复方甘草片组相比,复方甘草含片对小鼠咳嗽潜伏期的延长效果以及减少咳嗽次数的趋势更显著（P＜0.05）,对豚鼠引喘潜伏期的延长效果以及减少抽搐跌倒的豚鼠数量更明显（P<0.01）,复方甘草含片的化痰作用及抗炎效果也更明显。结论 复方甘草含片止咳、化痰、平喘以及抗炎的作用效果比复方甘草片更显著。     

免疫组织化学方法和荧光原位杂交技术检测胃癌组织中Her-2表达的比较

 目的　探讨不同方法检测胃癌中Her-2蛋白表达和基因表达的相关性,寻求胃癌中Her-2检测的有效手段。方法　应用免疫组织化学方法（IHC）对68例胃癌进行Her-2蛋白标记,同时采用荧光原位杂交技术（FISH）检测Her-2基因扩增的情况。 结果　68例胃癌患者中,IHC检测Her-2蛋白阳性12例（17.65 ％）,分别+++ 3例,++ 9例、+ 7例和- 49例;FISH检测Her-2基因扩增11例（16.17 %）,与IHC阳性强度相对应的FISH检测结果分别为3例（100 %）、8例（88.89 %）、0例、0例。Her-2基因扩增与Her-2蛋白表达存在相关性（P＜0.05）。结论　胃癌中存在Her-2蛋白的表达和基因扩增,Her-2蛋白在胃癌中的表达呈现明显的异质性。IHC与FISH检测胃癌Her-2的表达差异主要在IHC++组,IHC++有意愿进行Her-2基因靶向治疗的患者建议进行Her-2基因检测。