慢性甲基汞中毒对大鼠垂体和睾丸内分泌功能的影响

本文采用Wistar雄性大鼠,饲喂含甲基汞饲料102天后,观察其垂体和睾丸内分泌功能变化。结果发现,饲喂甲基汞饲料大鼠血清PRL和TSH水平明显增高,而血清LH、FSH和睾丸酮(TS)水平变化不明显;但上述各指标,1ppm组较2ppm和4ppm组增高明显。提示,慢性甲基汞中毒可刺激垂体PRL和TSH合成和分泌,而对垂体-性腺轴影响不明显;另外,低剂量(1ppm组)较高剂量(2ppm和4ppm组)刺激作用明显。     

抑制素(Inhbin)的研究Ⅲ.人与猪精液抑制素免疫交叉反应

在人与猪精液抑制素免疫交叉反应的研究中,应用本室建立的猪精液抑制素放射免疫分析测试二种人精液抑制素制剂(hP2和hPx,前者为粗提物经凝胶过滤的产物,后者为hP2通过CM-c层析的纯化物)的反应性。结果表明, hP2及hPx都能部分地抑制标记pUⅡ与抗pUⅡ血清结合,证实人与猪精液抑制素之间的不完全交叉反应。这就有可能考虑应用猪精液抑制素的放射免疫分析试剂盒测定人生物样品抑制素的含量。     

胞二磷胆碱对原代培养的中脑多巴胺能神经元的保护作用及其机制

为了研究胞二磷胆碱(citicoline,CC)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的Parkinson病体外细胞模型中的多巴胺能神经元的保护作用及其机制,本研究采用MTT法检测细胞活力;应用Fluo3/AM荧光染料,并通过流式细胞仪检测细胞内钙离子[Ca2+]i浓度;罗丹明123检测线粒体膜电位(ΔΨm);罗丹明123和PI荧光双染,在荧光显微镜下观察细胞膜通透性和细胞凋亡;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测培养上清中LDH的漏出;TH免疫组化染色鉴定多巴胺能神经元。实验分成三组:(1)对照组:即原代培养细胞;(2)6-OHDA损伤组:即原代培养细胞加6-OHDA;(3)CC保护组:原代培养细胞中分别加2、1、0.1、0.01和0.001mmol/LCC后,再加6-OHDA。结果显示:与6-OHDA组相比,1、0.1、0.01和0.001mmol/LCC组细胞活力增加(P<0.01);[Ca2+]i浓度下降和ΔΨm升高(P<0.01);除了0.001mmol/LCC组外,各CC组LDH漏出率明显低于6-OHDA组(P<0.01)。以上结果提示:在体外Parkinson病细胞模型中,CC可能通过保护神经元细胞膜,提高线粒体膜电位,增加细胞活力,降低[Ca2+]i浓度,减少LDH漏出等途径削弱6-OHDA的神经毒性作用,发挥其对神经元的保护作用。     

胸腺肽对恶性肿瘤放疗病人细胞免疫功能的影响

目的 :观察大剂量胸腺肽 ( thymopeptide,TP)对恶性肿瘤放疗病人 T细胞亚群的影响。方法 :51例恶性肿瘤放疗病人分为 10 0 mg和 2 0 0 mg胸腺肽用药组。病人分别每日静点胸腺肽 10 0 mg和 2 0 0 mg,连续 10日用药。用流式细胞仪测其用药前后外周血 T细胞 CD4、CD8、CD2 5和 CD56阳性百分率。结果 :10 0 mg用药组病人用药后外周血 T细胞 CD4和 CD2 5阳性百分率明显高于用药前水平( P<0 .0 5) ,而 2 0 0 mg用药组病人用药后外周血 T细胞 CD4、CD8、CD2 5和 CD56阳性百分率均明显增高 ( P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。结论 :大剂量胸腺肽可在短时间内提高恶性肿瘤放疗病人细胞免疫功能 ,而且每日 2 0 0 mg用药量效果更佳。     

肿瘤放射治疗的免疫效应

近些年,免疫学者已注意到电离辐射对肿瘤免疫的效应,并试图探讨其诱导和改善抗肿瘤免疫效应。越来越多的证据表明,采用确切的放疗方案和有效的照射剂量,特别是与免疫治疗联合应用,能够诱导或调节全身免疫反应,有助于肿瘤的控制或炎性反应的发生。本文综述放疗对肿瘤免疫效应及其机制,以及与免疫治疗联合应用效果,以期指导肿瘤放疗与免疫治疗的有效联合应用。     

核转位序列敲除的人类aFGF对NIH3T3细胞的促分裂活性及其机制

目的：研究核转位序列敲除的人类酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）对NIH3T3细胞促分裂活 性的影响。方法：实验分4组，即野生型aFGF（waFGF)、重组型aFGF (raFGF)、waFGF加肝素（HS，waFGF+HS）和raFGF+HS。采用MTT法检测NIH3T3细胞增殖，通过流式细胞术检测NIH3T3细胞凋亡，采用RT PCR法检测bcl-2、p53和c-fos基因的表达。结果：当raFGF或waFGF浓度10~40 μg•L^-1时，raFGF组细胞的增殖作用明低于waFGF组（P<0.001）；waFGF+HS组和raFGF+HS组均明显高于单纯waFGF或raFGF组（P<0.001）。waFGF和raFGF均可导致NIH3T3细胞凋亡百分数下降，即存活的细胞增多，但raFGF作用弱于waFGF。c-fos基因在waFGF和waFGF+HS组的表达量均高于raFGF和raFGF+HS组；p53基因表达在waFGF和raFGF两组表达增高；bcl-2基因在waFGF+HS组表达最高，其次是waFGF和raFGF两组。结论：与waFGF比较，raFGF具有较弱的促分裂活性，但仍具有刺激DNA合成和细胞增殖的能力及抑制NIH3T3细胞凋亡的作用。HS具有增强aFGF活性的作用，可作为aFGF体外实验中模仿机体内环境的辅助因子。     

深入加强莪术的基础与应用研究

目的：通过深入加强莪术的基础和应用研究,探讨莪术对机体的有效作用。方法：通过文献回顾总结归纳了莪术的药理作用及其机理,并提出深入加强莪术的基础与应用研究,应从两方面入手：（1）加强莪术治疗作用的机制研究;（2）在研究莪术药物疗效和机制的基础上进行有关方面的研究。结论：通过加强基础和应用的研究,莪术将对机体的代谢、生长发育、疾病的发生与发展起到越来越重要的作用。     

三重靶向介导的Smac过表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和周期进程的影响

目的：利用基因重组技术获得三重靶向性Smac过表达的条件复制型腺病毒,探讨其对乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和周期的影响。方法：利用重组技术构建Smac过表达载体pShuttle-Egr1-Smac-HRE-hTERT-E1A-E1Bp-E1B55K,与骨架载体pAdEasy在BJ5183（AdEasy-1+）菌中进行重组,获得Smac过表达的条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac,感染MDA-MB-231细胞后,利用化学试剂氯化钴模拟肿瘤细胞乏氧状态,设立对照组、CARd.pE-Smac组、乏氧组和CARd.pE-Smac+乏氧组,并根据是否进行4 Gy照射,每组分为未照射组和照射组,共8个实验组。利用Western blotting法检测各组细胞Smac蛋白的表达,利用流式细胞术检测细胞凋亡率和不同周期进程细胞百分率。结果：Western blotting法检测,经条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac感染、乏氧和照射后,Smac蛋白表达水平增加,CARd.pE-Smac+乏氧+4Gy组Smac蛋白表达水平最高。流式细胞术检测,与对照组比较,CARd.pE-Smac组、乏氧组和CARd.pE-Smac+乏氧组细胞凋亡率均明显升高（P<0.05或P<0.01）;与相应未照射组比较,4 Gy照射后CARd.pE-Smac+4Gy组、乏氧+4Gy组和CARd.pE-Smac+乏氧+4Gy组细胞凋亡率均明显升高（P<0.05或P<0.01）,CARd.pE-Smac+乏氧+4Gy组升高最为明显,且S期和G₂/M期细胞百分率明显增加（P<0.05或P<0.01）,与诱导凋亡的结果有相似的趋势。结论：在条件复制型腺病毒CRAd.pE-Smac感染MDA-MB-231细胞、并经乏氧和辐射处理后,实现了三重靶向介导的Smac过表达,其具有促进肿瘤细胞凋亡和诱导G₂/M期细胞阻滞的作用。     

含金属硫蛋白蛋奶粉对辐射损伤的防护作用

目的研究含金属硫蛋白（metallothionein，MT）蛋奶粉对小鼠电离辐射损伤的防护作用。方法受试小鼠连续灌胃含MT蛋奶粉14d后给予2．5GyX射线照射，24h后处死小鼠，检测其外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量、胸腺细胞周期进程以及血液、肝脏和肾脏丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、CAT和GSH—Px）活性。结果受照射小鼠给予含MT蛋奶粉后，外周血白细胞数、淋巴细胞增殖率、股骨骨髓细胞DNA含量和肝脏、肾脏、血浆SOD、CAT和GSH—Px活性明显高于辐照对照组，而血液、肝脏和肾脏MDA含量明显降低。含MT蛋奶粉加照射组明显减轻了胸腺细胞G1期阻滞，促进其DNA合成。结论含MT蛋奶粉对小鼠辐射损伤具有防护作用。     

单重靶向条件复制型腺病毒穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K的构建及鉴定

目的：构建并鉴定一种新型E1A基因CR2区选择性缺失的腺病毒穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K,为包装单重靶向条件复制型腺病毒进行肿瘤基因治疗奠定基础。方法：采用RT-PCR法从人胚肾细胞（293T）中扩增条件复制型腺病毒必需的E1区基因,包括E1A、E1Bp及E1B55K基因片段;重叠PCR法扩增CR2区缺失的E1A基因;采用基因重组技术构建pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K重组质粒,并进行PCR及酶切鉴定。结果：经测序证实获得的E1B55K及CR2区缺失的E1A基因与GenBank公布的完全一致,E1A基因CR2区缺失的pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K质粒经分别经XbaⅠ与KpnⅠ单酶切,得到大小约为817和1 244 bp的酶切片段,PCR鉴定得到约250及1 148 bp的基因片段,鉴定结果与预期结果完全一致。结论：E1A基因CR2区选择性缺失的单重靶向条件复制型腺穿梭载体pshuttle-E1A-E1Bp-E1B55K构建成功。