胞二磷胆碱对原代培养的中脑多巴胺能神经元的保护作用及其机制

为了研究胞二磷胆碱(citicoline,CC)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的Parkinson病体外细胞模型中的多巴胺能神经元的保护作用及其机制,本研究采用MTT法检测细胞活力;应用Fluo3/AM荧光染料,并通过流式细胞仪检测细胞内钙离子[Ca2+]i浓度;罗丹明123检测线粒体膜电位(ΔΨm);罗丹明123和PI荧光双染,在荧光显微镜下观察细胞膜通透性和细胞凋亡;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测培养上清中LDH的漏出;TH免疫组化染色鉴定多巴胺能神经元。实验分成三组:(1)对照组:即原代培养细胞;(2)6-OHDA损伤组:即原代培养细胞加6-OHDA;(3)CC保护组:原代培养细胞中分别加2、1、0.1、0.01和0.001mmol/LCC后,再加6-OHDA。结果显示:与6-OHDA组相比,1、0.1、0.01和0.001mmol/LCC组细胞活力增加(P<0.01);[Ca2+]i浓度下降和ΔΨm升高(P<0.01);除了0.001mmol/LCC组外,各CC组LDH漏出率明显低于6-OHDA组(P<0.01)。以上结果提示:在体外Parkinson病细胞模型中,CC可能通过保护神经元细胞膜,提高线粒体膜电位,增加细胞活力,降低[Ca2+]i浓度,减少LDH漏出等途径削弱6-OHDA的神经毒性作用,发挥其对神经元的保护作用。     

肿瘤相关抗原肽与低剂量全身照射的协同抑瘤作用

目的观察低剂量X射线照射对小鼠肝癌H-22细胞膜相关抗原肽(TAP)提取物的抑瘤作用及免疫学功能的影响,为低剂量辐射(LDR)与肿瘤疫苗联合治疗肿瘤提供实验依据。方法采用微酸洗脱法制备相对分子质量≤3×106的细胞膜TAP提取物,先给予小鼠75mGyX射线全身照射,12h后以TAP提取物皮下免疫小鼠,检测脾细胞CD3、CD69和TCRαβ表面标记、脾T细胞亚组百分数的变化、脾细胞ConA反应性、IL-2和IFN-γ活性、CTL杀伤活性的变化及抑瘤效应。结果小鼠经TAP提取物免疫后,移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,生长速度减慢;脾细胞CD3分子和CD69分子的表达显著升高,脾细胞ConA反应性、IFNγ分泌活性和CTL杀伤活性显著增强,IL-2分泌增多。而同时给予LDR的小鼠不仅上述功能不同程度增强,脾CD8+细胞百分数显著增高。结论LDR与细胞膜TAP具有协同抑瘤作用,细胞免疫力的明显增强可能为其机制之一。     

p53基因突变子175 H、248 W和273 H的定点突变及表达载体的构建

目的：定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。 方法：以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设 计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩 增片段克隆入pcDNA3.1载体中。 结果：在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸（cgc）突变为组氨酸（cac）,第248位密码子由精氨酸（cgg）突变为色氨酸（tgg）,第273位密码子由精氨酸（cgt）突变为组氨酸（cat）。p53基因突变子表达载体成功构建。 结论：PCR技术诱导定点突变准确、高效。基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位 点奠定了基础。     

Association analysis of the cholecystokinin type A receptor gene in schizophrenia

Schizophrenia is characterized by clinical heterogeneity and genetic heterogeneity.^1 Because dopamine (DA)overactivity has been thought, over the past 40 years, to play a role in the pathophysiology of schizophrenia, its receptors and metabolic enzymes have been regarded as potentially involved in schizophrenia.^2 However,     

帕金森病多巴胺能神经元模型的建立

帕金森病是一种常见的中枢神经系统进行性退行性病变，其病因机制尚未明确，且缺乏令人满意的治疗方法。因此，建立有效的帕金森病模型对其病凶机制的进一步探讨有着重要的意义。Berger等人于1982年建立腹侧中脑原代细胞培养方法，通常应用小鼠或大鼠胚胎(13～15d胎龄)中脑组织进行培养。多巴胺能神经元可存体外存活长达数月，因此，可为多巴胺能神经元急性或慢性损伤的病因机制的研究提供实验手段。多巴胺能神经元在体外可通过免疫化学、放射自显影及荧光组织化学等方法确认。故其形态学及数量上的改变在体外较容易被检测，凶而这种实验模型的建立对于帕金森病病凶机制及新的治疗方法的探讨将起着重要的作用。     

星状病毒所致秋季婴幼儿腹泻一例报告

<正> 秋季婴幼儿腹泻(以下简称秋泻)是一种常见流行性疾病。我们于1981年秋,在对秋泻的病原学研究中,曾发现星状病毒所致秋泻一例,现报告如下: 男婴,8个月,住院号55133,于1981年11月2日住院。患儿入院前三天无明显诱因开始腹泻,水样便,6～7次/日,呕吐10余次/日,为胃内容物,伴有发烧。既往健康,人工喂养,以奶粉为主。     

流式细胞仪在预防医学中的应用

流式细胞技术 (flowcytcmetry)的问世 ,为微观认识细胞提供了更理想的检测手段 ,进一步发展了细胞生物学 ,拓宽了免疫学、病理学、遗传学、血液学、肿瘤学及预防医学等医学多学科领域。这种技术是应用流式细胞仪在单细胞或其他生物颗粒流动状态下对其进行快速、有效、多参数、定量分析物理和化学特性的一种高、精、新技术。1　流式细胞仪部件主要由光源 (一般以氩离子激光器为光源 )、液流系统 (主要包括流动室和喷嘴等 )、光学检测系统(包括各种透镜、滤光片、分光镜及光检测器等 )、电子控制系统 (包括电放大器、模数转换器、脉冲高度分析…     

刺激缰核对促性腺激素分泌及免疫功能的影响

进一步揭示缰核（Ｈｂ）与垂体内分泌及免疫器官功能的关系。采用电刺激Ｈｂ技术，观察电刺激雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠缰核１２ｈ后，垂体激素分泌及胸腺脾脏免疫功能的变化。结果表明，血清ＦＳＨ、ＬＨ和ＰＲＬ水平有不同程度的增高，而血清ＴＳＨ水平变化不明显；胸腺细胞自发掺入能力、胸腺和脾细胞对ＣｏｎＡ反应性及脾细胞对ＰＷＮ反应性也均不同程度地增强。上述结果提示，电刺激缰核后垂体促性腺激素分泌增高及免疫器官功能增强可能与缰核内含有多种神经递质和神经肽参与多功能的调节有关。     

大剂量X线头部照射对雄性大鼠生殖内分泌功能的影响

本文报道雄性大鼠受10GyX线头部照射后不同时间下丘脑多巴胺(DA)、血清促性腺激素(LH、FSH)、尿睾丸酮(Ts)、睾丸cAMP及垂体和睾丸指数的变化。其结果证实l10GyX线头部照射后DA和促性腺激素变化基本一致,其中特别有意义的是,睾丸cAMP含量变化与血清促性腺激素水平变化非常吻合,尿Ts变化与LH变化一致;垂体和睾丸指数无明显改变。上述资料说明,头部急性照射能够引起下丘脑神经递质及腺垂体促性腺激素释放的明显变化’睾丸cAMP含量变化可能继发于促性腺激素的变化,而Ts生成和分泌与促性腺激素所致睾丸cAMP变化有关。