石蜡包埋脱钙骨组织中结核杆菌DNA不同提取方法比较

目的 探讨石蜡包埋的10%硝酸脱钙骨组织中简易有效的结核杆菌DNA提取方法并进行验证.方法 以20例石蜡包埋、10%硝酸脱钙的坏死性肉芽肿炎疑为骨结核的组织标本为研究对象,常规法直接采用德国QIAGEN公司的QIAamp DNA FFPE Tissue Kit方法提取DNA,而改良法中加入QIAamp DNA Micro Kit试剂盒中的carrier RNA,以两种方法分别提取20例标本中结核杆菌DNA,通过荧光定量PCR,比较常规试剂盒提取法和改良提取法对结核杆菌检测结果的影响.结果 改良法提取的DNA[（35.32±3.48）ng/μl]比常规法[（6.68±3.72）ng/μl]提取的DNA显著增多（P＜0.05）,改良法提取的DNA经荧光定量PCR检测结核杆菌的阳性率（55%）明显高于常规法（15%,P＜0.01）.结论 改良法提取石蜡包埋脱钙骨组织中结核杆菌DNA具有高效简便的特点,是较为理想的方法,值得在puncture和极微小石蜡样本中推广.     

良性淋巴组织中Ig/TCR基因重排分析

目的 探讨良性淋巴组织Ig/TCR基因重排特点,为临床病理诊断提供更为可靠的依据.方法 选取淋巴结反应性增生、扁桃腺炎、阑尾炎淋巴组织标本各20例和正常人外周血淋巴细胞标本15例,提取DNA,利用BIOMED-2引物系统进行Ig/TCR PCR扩增和核酸分子异源双链凝胶电泳分析.结果 75例均扩增出与BIOMED-2克隆分析系统规定的单克隆性重排大小和范围一致的产物,分别是IGH-A的320 bp片段和IGH-C的130 bp片段,其中IGH-A 占77.3%,IGH-C占 76.0%.所有样品均扩增出BIOMED-2克隆分析系统规定的非特异性重排产物,全部为IGH-E的100 bp片段和211 bp片段.结论 BIOMED-2系统存在一定的非特异性产物,主要集中在IGH-A、IGH-C、IGH-E;正确认识非特异性产物可为病理诊断和临床应用提供更为准确的依据.     

PD-L1+巨噬细胞在肿瘤发生发展中的研究进展

巨噬细胞为肿瘤微环境中最重要的免疫细胞,不同起源和表型的巨噬细胞在肿瘤的发生发展过程中发挥不同的作用。程序性死亡受体-1（programmed death receptor-1,PD-1）/程序性死亡受体-1配体（programmed death receptor-1 ligand,PD-L1）轴可通过多种途径进行免疫调节,介导肿瘤细胞免疫逃逸,肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages,TAMs）可通过趋化因子、自噬和缺氧诱导因子等途径调控自身PD-L1的高表达,但PD-L1+巨噬细胞在肿瘤进展过程中的作用尚未明确,临床意义尚存争议,免疫组织化学染色判读标准尚未统一。本文就近年来PD-L1+巨噬细胞的研究现状和进展进行概述。      

膜式和沉降式宫颈液基细胞学制片方法的比较研究

目的 分析评价膜式和沉降式宫颈液基细胞学制片方法和质量,以寻求提高宫颈液基细胞学制片质量的方法.方法 对我院妇产科送检的液基细胞学标本310份行相关处理后加入原细胞保存液1倍体积的保存液,充分振荡后取一半标本保存液置入另一个干净的保存瓶中.2瓶标本保存液分别按照膜式和沉降式两种制片方法制作涂片,所有涂片均经95%乙醇固定后行改良巴氏染色,并于肉眼及光学显微镜下观察染色情况.结果 肉眼观察膜式法所制涂片细胞分布不均,涂片周围细胞较多或较厚,部分区域细胞缺如或过厚;沉降式法所制涂片细胞分布均匀,有时细胞较厚,偶见较大细胞团块沉积.光学显微镜下见膜式法制作的涂片背景干净,细胞分布不均匀,涂片周围细胞较多或重叠严重,部分区域细胞缺如或重叠较多,有些细胞固缩明显,红细胞或炎细胞污染较少,染色不鲜艳;沉降式法制作的涂片背景尚干净,细胞分布均匀,有时细胞层次较多,细胞固缩或重叠较少,偶有红细胞或炎细胞污染,染色鲜艳.结论 本研究中沉降式法制作宫颈液基细胞学涂片可控性较膜式法好,制片质量较高.     

比色法在花粉总黄酮含量测定中的应用研究

目的 探讨比色法在测定花粉总黄酮含量的可行性和应用价值.方法 以芦丁为对照品,采用比色法,对油菜、荞麦、玉米、黑松和赤松6种花粉中的黄酮含量进行了测定.结果 在选定的实验条件下,光密度与溶液中芦丁的含量呈线性关系,总黄酮含量的平均回收率为99.7%,黄酮在不同花粉中的含量差异很大,其中油菜花粉黄酮含量较高,松花粉中黄酮含量甚少.结论 比色法在测定花粉总黄酮含量上是可行的,该方法操作简单,结果可靠.     

COX-2/PGE2在肿瘤发生发展和重塑肿瘤微环境中的研究进展

癌症相关炎症(cancer-related inflammation,CRI)在癌症的发生发展中发挥重要作用,前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)是炎症环境中最为丰富的类花生酸脂质,也是肿瘤微环境中具有免疫调节功能的脂类代谢产物。目前,PGE2合成途径阻断药物联合抗肿瘤药物在肿瘤治疗方面取得一定成效。因此,了解肿瘤微环境中PGE2合成途径的调控环节及其对肿瘤发生发展的作用机制,可为肿瘤防治找寻新方向、提供新靶点。本文就近年来PGE2在肿瘤发生发展和重塑微环境的研究进展进行概述。     

良性淋巴组织中Ig/TCR基因重排分析

目的 探讨良性淋巴组织Ig/TCR基因重排特点,为临床病理诊断提供更为可靠的依据.方法 选取淋巴结反应性增生、扁桃腺炎、阑尾炎淋巴组织标本各20例和正常人外周血淋巴细胞标本15例,提取DNA,利用BIOMED-2引物系统进行Ig/TCR PCR扩增和核酸分子异源双链凝胶电泳分析.结果 75例均扩增出与BIOMED-2克...     

结肠腺瘤性息肉病基因启动子区甲基化状态在乳腺癌演变过程中的作用

目的：检测结肠腺瘤性息肉病( APC)基因在乳腺癌中的甲基化状态及其mRNA表达水平,探讨APC基因启动子区异常甲基化与乳腺癌发生的关系。方法采用甲基化特异性PCR( MSP)检测17例癌旁正常乳腺组织( NBT),27例乳腺普通型导管增生( UDH),13例乳腺非典型导管增生( ADH),20例乳腺原位导管癌( DCIS)及46例乳腺浸润性导管癌( IDC)标本中APC基因的甲基化率,并分析其与临床病理参数的关系;采用定量聚合酶链反应( QPCR)检测26例IDC中APC基因的mRNA相对表达水平,分析APC基因甲基化对其mRNA表达的影响。结果ADH、DCIS及IDC标本APC甲基化率高于NBT及UDH标本(P<0．05);IDC标本APC甲基化水平高于ADH与DCIS标本(P<0．05),APC基因mRNA的相对表达水平低于NBT标本(P<0．05);APC基因的甲基化水平与APC基因mRNA表达量呈负相关(r=-0.0469, P<0．05)。 IDC中APC基因甲基化状态与临床病理参数无关(P>0．05)。结论 APC基因启动子区异常高甲基化及其导致的mRNA表达下调在乳腺癌发生过程中起着重要作用。     

乳腺癌 NOEY2基因启动子区甲基化的研究

目的：检测 NOEY2基因在乳腺癌发生不同阶段的甲基化状态及其在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的mRNA 表达水平,探讨 NOEY2基因启动子区异常甲基化与乳腺癌发生发展的关系。方法收集2010年1月—2012年1月手术切除乳腺的女性患者标本,其中 IDC 组46例,乳腺普通型导管增生(UDH)组30例,癌旁正常乳腺组织(NBT)组20例,乳腺原位导管癌( DCIS) 组20例,乳腺非典型导管增生( ADH)组13例,采用甲基化特异性 PCR (MSP)检测 NOEY2基因的甲基化率及水平,分析其与临床病理参数的关系;采用实时定量 PCR 检测30例 IDC 中NOEY2基因的 mRNA 相对表达量,分析 NOEY2基因甲基化对其 mRNA 表达的影响。结果 IDC 组的完全甲基化率高于 NBT 及 UDH 组(P <0．01);NOEY2基因完全甲基化与乳腺癌患者的临床分期、组织学分级有关(P <0．05),而与年龄、肿瘤大小、ER、PR、HER2无相关性(P >0．05);完全甲基化的 IDC 标本 NOEY2 mRNA 表达量低于部分甲基化的IDC 标本(P <0．05);IDC 中 NOEY2基因的甲基化水平与 NOEY2基因 mRNA 表达量呈负相关( r =-0.659,P <0．05)。结论 NOEY2基因启动子区异常高甲基化及其导致的 mRNA 表达下调在乳腺癌发生发展过程中起重要作用。