HBV微环DNA重组质粒的构建及初步药效学实验

目的 构建HBV的治疗性微环质粒并进行体内外实验研究. 方法 采用聚合酶链式反应扩增HBV包膜蛋白preS2.S抗原基因和hIL-2-IFNγ融合基因,将2个基因分别克隆于ZY781载体,得到亲本质粒preS2.S/ZY781和hIL-2-IFNγ/ZY781,测序正确后,用阿拉伯糖诱导生成微环质粒pMCS2.S和pMCIIF. 转染微环质粒于COS-7细胞株,用酶联免疫吸附法定量法检测24、48、72 h时目的蛋白的表达情况.双质粒联合在体电脉冲注射BALB/c小鼠,4周后处死小鼠,检测特异性的体液和细胞免疫应答. 结果 微环质粒pMCS2.S和pMCIIF转染COS-7细胞后,目的蛋白HBsAg、白细胞介素-2、干扰素 γ在不同时间均有表达,在48 h达峰值,分别为(60.3±7.8)、(17.7±1.9)、(10.3±0.9) ng/ml. 微环质粒pMCS2.S能诱导小鼠产生HBsAb的抗体保护,佐剂pMCIIF可显著增强其免疫效果,在低剂量5μg/只就能诱导较强特异性细胞和体液免疫. 结论 成功构建了HBV微环质粒pMCS2.S及其佐剂微环质粒pMCIIF,其有较好的体内外活性.     

JAK2V617F 基因突变的定量测定及在慢性骨髓增殖性疾病中的应用

目的：探讨荧光定量 PCR 的方法检测 JAK2V617F 基因突变并分析其在慢性骨髓增殖性疾病（CMPD）中的诊断价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测68例确诊 CMPD 患者骨髓标本中 JAK2V617F 基因突变的阳性率和相对定量,分析其在 CMPD 中的诊断价值以及和临床资料之间的联系。结果68例确诊患者的骨髓标本均成功扩增 JAK2V617F 野生型和突变型。JAK2V617F 基因突变的总阳性率为66．2％（45/68）,其中真性红细胞增多症（PV）患者阳性率75．0％（21/28）,原发性血小板增多症（ET）阳性率60．6％（20/33）,特发性骨髓纤维化（IMF）阳性率57．1％（4/7）。PV 患者 JAK2V617F 突变阳性率明显高于 ET 和 IMF 患者。PV 患者 JAK2V617F 的相对定量和血红蛋白数和白细胞数呈正相关。ET 患者中 JAK2V617F 的相对定量和患者的血小板计数呈正相关。结论荧光定量 PCR 的方法能够快速准确的检测 JAK2V617F 基因突变及其突变比例,为临床诊断 CMPD 提供有效的实验室指标,JAK2V617F 的相对定量和患者的临床血液学指标存在一定关系。     

定格在镜头里的幸福影像

幸福在哪里？有很多人抱怨自己天天太忙碌幸福感很低。其实,幸福就在我们的身边,就看你能不能发现它,谁发现它谁就拥有它。     

上调基因-11与胃癌发生转移的关系及中医药研究进展

胃癌的发病率居恶性肿瘤第4位,病死率位列恶性肿瘤第3位。全球每年新发胃癌病例数100余万,胃癌相关死亡病例约80万[1]。中国的胃癌发病例数和死亡例数分别占全球的42.6%和45.0%,在全球183个国家中发病率居第5位、病死率居第6位[2]。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定芪胶膏中的黄芪甲苷含量

目的 建立测定芪胶膏中黄芪甲苷含量的高效液相色谱法.方法 采用Waters Symmetry Shield TM RP色谱柱C18(5 μm 4.6 mm×250 mm,柱子编号:186000112),以乙腈-水(34∶66)为流动相,流速1.0 ml/min,柱温40℃,漂移管温度60℃,载气压力30 psi.结果 黄芪甲苷进样量在1.9046～ 13.9674 μg范围内时,与峰面积积分值有良好的线性关系(r=0.9991,n=6),平均加样回收率为98.52％,RSD =3.7％ (n =6).结论 高效液相色谱-蒸发光散射检测法灵敏、简便、重复性好,可用于芪胶膏的质量控制.     

小儿外科手术配合的注意要点

小儿外科手术与成人手术不同，有其自己的特点。因此，综合医院手术室护士要尽是熟悉、掌握小肠十科手术中与手术医师和麻醉师的配合要点，使手术取得成功。现就这方面的实践体会如下。1临床资料我院自1993～1996年共施行小儿外科手术282例，其中先天性胆道闭锁120UX－Y肝门空肠吻合术3例，先天性食道裂孔庙食道裂孔修补胃低折送术4例，巨大纵用淋巴管囊肿切除术1例，先天性无肛尾后路肛门成型术10例，高位无肛直肠膀优疾腹会阴肛门直肠成型术1例，幽门肥厚幽门环肌切开术5例，肠套迭肺切除吻合术8例，美克尔憨室切除肠修补术8例，颈淋巴…     

药理学三届本科生期末考试分析

我们对本院82级、84级和88级三届本科生药理学期末考试进行了总结分析,认为这些试题难度适中,区别性较好,基本能全面、客观、准确地测试学生的知识水平。三届试题中88级的试题比较满意,好题约占70％,差题仅占1.4％,偏易题较少,漏考章节也较少。     

浅谈运用中西医结合治疗牙周炎

资料与方法收集60例门诊患者,其中男性42例,女性18例,年龄20~70岁;居住农村40例,城镇20例。①西医治疗:牙周炎是口腔科常见感染性疾病,厌氧菌在口腔感染性疾病中的作用越来越受到重视。牙周炎龈下菌斑中厌氧菌的检出率达90%以上,专性厌氧菌被认为是牙周炎致病因素之一,并由此提     

瘦素在异位骨化模型大鼠骨化组织中的表达

瘦素(Leptin,LEP)作为一个骨调节因子,其骨科领域对其研究多聚焦在骨质疏松和关节炎方面.我们采用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测模型大鼠异位骨化(HO)分离组织中Leptin(10周)和Leptin mRNA(5、10周)表达,探讨Leptin在HO 形成中潜在的作用. 一、材料与方法 1.材料:山羊血清(美国Sigmaaldrich公司),兔抗鼠Leptin抗体、生物素酰化的山羊抗兔抗体(美国Santa Cruz 公司),链霉素抗生物素-过氧化物酶(SP)、DAB(美国Dako公司).