MALDI- TOF MS快速鉴定腹泻病原菌的评价

目的 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)是近年发展迅速的鉴定病原菌的新技术，具有快速、准确、高通量、方便、低成本的优越性，本研究评价MALDI Microflex鉴定腹泻病原菌的效果。方法 收集3家医院临床分离的腹泻病原菌379株，采用提取法对其进行鉴定，评价质谱的鉴定效果；选择其中200株病原菌进行直接涂抹法和提取法前处理，对比鉴定效果。结果 腹泻病原菌包括沙门菌属、气单胞菌属、志贺菌属、大肠埃希菌属、弧菌属、艰难梭菌属、邻单胞菌属、耶尔森菌属等8个菌属，28个菌种，MALDI-TOF MS技术鉴定腹泻病原菌整体在属水平鉴定正确率为87.07%,种水平鉴定正确率59.37%;不同菌属及不同种的鉴定正确率有差别，气单胞菌和沙门菌较好；提取法鉴定沙门菌和气单胞菌的正确率明显高于直接涂抹法(P<0.05)。结论 MALDI-TOF MS技术鉴定腹泻病原菌具有简单、快速、部分准确的优越性，需要扩充菌种库并结合生化及血清学鉴定。     

乙型肝炎病毒X蛋白增强人血管生成因子b FGF基因启动子转录活性

目的 检测乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitis B virus X protein, HBx）对人血管生成因子bFGF基因转录的激活作用并确定其作用于bFGF基因启动子的区域,分析HBx激活bFGF基因转录可能的分子机制,为揭示HBx促进肝癌发生的分子机制及发现新的治疗靶点。方法 运用高保真DNA聚合酶从人肝癌HepG2细胞cDNA文库中扩增出bFGF基因启动子DNA序列;从含完整HBV DNA序列的表达载体中扩增HBx编码序列并克隆入真核表达载体p CDNA3-FLAG中,将HBx表达载体转染人肝癌HepG2细胞中,裂解细胞进行蛋白SDS-PAGE电泳,Western blot检测HBx蛋白的表达;将HBx表达载体和含bFGF基因启动子不同区段的荧光素酶报告载体共转染肝癌HepG2和SMMC-7721细胞,检测HBx对bFGF基因启动子转录活性的影响;运用Western blot检测在肝癌细胞中HBx过表达对ERK磷酸化的影响。结果 成功克隆了HBx并使其在肝癌细胞中得到表达;成功克隆了bFGF基因启动子2.2 kb、1.4 kb、720 bp和360 bp的区段;在肝癌细胞SMM...