原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者外周血淋巴细胞凋亡率、T细胞亚群和NK细胞的水平变化和临床意义

目的通过检测乙型肝炎肝硬化和合并乙型肝炎病毒感染的原发性肝细胞癌患者的外周血的粒细胞、单核细胞、NK细胞、T细胞及其亚群和淋巴细胞及其凋亡率,探讨两者在细胞免疫方面的差异.方法用Ficoll Hypaque离心法分离外周血单个核细胞(PBMNC),流式细胞仪检测外周血T细胞及其亚群、NK细胞和淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,AnnexinV/FITCKit检测凋亡细胞.结果乙型肝炎肝硬化患者的外周血单核细胞、粒细胞、淋巴细胞、CD3-CD16 CD56 NK细胞、CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD4 CD8 T细胞比值,均与正常对照组无显著性差异(P＞0.05);但淋巴细胞凋亡率明显低于对照组(P＜0.01).原发性肝癌外周血CD3-CD16 CD56 NK细胞、单核细胞和CD4 /CD8 T细胞比值与肝硬化组和正常对照组比较,均无显著性差异(P＞0.05),而粒细胞明显升高(P＜0.05);CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞均较另两组明显减少(P＜0.05),淋巴细胞及其凋亡率均明显低于另两组(P＜0.01).结论乙型肝炎肝硬化患者的外周血细胞免疫只发生不显著的变化,但淋巴细胞的凋亡率明显降低.原发性肝癌外周血的细胞免疫和淋巴细胞凋亡率均明显低下.     

SARS患者白细胞及T细胞亚群的变化

[目的]探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血白细胞和T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。[方法]用全自动血细胞分析仪检测44例SARS患者外周血白细胞计数及分类．用流式细胞仪检测SARS患者外周血T淋巴细胞亚群;并与正常对照组比较。[结果]与对照组比较．SARS组患者白细胞总故显著下降,淋巴细胞百分数和绝对数显著下降．粒细胞绝对数显著下降,粒细胞百分数显著增如：CD、CD2^-和CD8^-细胞绝对数显著下降,CD3^-、CD4^-、CD8^-细胞百分数和CD4^-／CD8^-比值与对照组比较无显著性差异。1年后,恢复期SARS患者的上述各项指标均恢复正常。[结论]SARS冠状病毒感染损伤患者中性粒细胞和细胞免疫功能,但这种损伤是可逆的。     

严重急性呼吸综合征患者康复期T淋巴细胞亚群变化的临床应用分析

严重急性呼吸综合征（SARS）是由SARS冠状病毒（SARS-CoV）感染引发的一种新型传染性疾病，以肺部病变为主，出现合并感染，并引起肺外多器官损伤、功能衰竭。SARS传染性极强，人群普遍易感，发病后，机体出现严重的细胞免疫和体液免疫损害。我们针对SARS患者康复后的免疫恢复状况进行监测，结合正常对照以及文献报道进行对比研究，为临床预后判断提供指导。     

东方蝾螈肢体异位再生的研究

背景:蝾螈具有很强的肢体再生能力,研究蝾螈肢体再生对于实现患者肢体再生有着重要的指导作用.目的:验证东方蝾螈的肢体再生能力,并通过诱导东方蝾螈异位肢体生成,建立东方蝾螈为模式动物的再生医学研究技术平台.设计、时间及地点:观察性实验,于2008-07/2009-01在西北大学教育部西部资源与现代生物技术重点实验室完成.材料:东方蝾螈,购买于西安宠物市场.方法:①将成体东方蝾螈右前肢上臂处切断,连续10周观察记录其断肢再生情况,并分别取材进行组织学观察.②通过东方蝾螈前肢运动神经异位转移和对侧皮肤移植,观察肢体异位再生情况.主要观察指标:①观察东方蝾螈肢体再生能力和组织学过程.②观察东方蝾螈的异位肢体诱导情况,并进行组织学观察.结果:①东方蝾螈断肢后10周左右肢体成功再生.肢体再生过程中,肢芽中出现大量皮肤成纤维细胞.②通过神经异位转移和对侧皮肤移植,可以诱导出肢芽.约13周可以成功在异位诱导出新的肢体.结论:①东方蝾螈具有完全肢体再生能力,皮肤成纤维细胞是参与肢体再生的重要细胞来源.②神经异位转移和对侧皮肤移植可以在异位诱导出新的肢体.     

含淤胆血清的培养体系体外诱导胚胎干细胞表达肝细胞功能的研究

目的探讨病理微环境体外诱导对小鼠胚胎干细胞(ESC)表达肝细胞功能的作用。方法悬滴培养ESC发育5～7d的拟胚体，将其离散细胞种植于不同的分化体系，观察ESC在自主分化、肝细胞生长因子(HGF)或5％淤胆血清 HGF诱导下每天的分化情况(倒置相差显微镜)，以及细胞的糖原、甘油三酯、白蛋白及尿素氮合成功能，细胞吲哚氰绿(ICG)和荧光二乙酯(FDA)染色的情况。结果ESC自主分化难以控制，分化为3个胚层的细胞。HGF促进ESC向内脏内胚层和中胚层(心肌)分化，但两者仅能表达低水平的肝细胞特异性功能。引入淤胆血清的HGF诱导体系中ESC能分化为较为均一的多角形细胞，具有较高水平的糖原、甘油三酯、白蛋白和尿素氮合成能力，ICG和FDA染色阳性。结论自主分化和HGF诱导ESC表达肝细胞代谢的能力有限。体外模拟病理性微环境可诱导ESC定向分化为肝系细胞，并具有较高水平的肝细胞代谢功能。     

诱导脐血单个核细胞分化为树突状细胞的实验研究

目的：诱导脐血源树突状细胞对恶性血液病脐血移植后的过继免疫治疗十分重要。诱导条件对树突状细胞产率影响很大。本研究观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4及TNF-α分阶段诱导脐血单个核细胞来源树突状细胞的效果。方法：通过Ficoll-Hypaque法分离脐血单个核细胞,以GM-CSF、IL-4及TNF-α分阶段诱导脐血来源树突状细胞的生成,培养12 d收获细胞,以光镜和电镜观察其细胞形态学特点,以流式细胞术检测其表面标记。结果：经培养12 d,每2×10 6脐血单个核细胞收获树突状细胞数为(0.46±0.13)×106,CD80+、CD86+细胞比例分别为89.98%±4.32%、86.86%±7.17%,而CD1a+细胞比例43.16%±5.80%,经光镜和电镜下观察细胞具有典型的树突状细胞形态学特征。结论：通过GM-CSF、IL-4及TNF-α的树突状细胞培养体系和分阶段诱导法可高效率诱导脐血树突状细胞。［中国当代儿科杂志,2004, 6(5): 377-380］     

VEGF抑制血清撤离诱导的颊癌细胞凋亡的初步研究

目的 体外实验中初步观察VEGF对血清撤离诱导的人颊鳞癌BCaCD885细胞凋亡的影响。方法 分别将处于对数生长期的BCaCD885细胞培养于完全RMP11640（10％胎牛血清）、无血清RMPI1640、含VEGF（50ng/ml)的无血清RMPI1640，48h后观察不同培养条件下癌细胞形态变化及用流式细胞仪检测细胞凋亡发生比率。结果 无血清RMPI1640培养组BCaCD885细胞凋亡增加，而含VEGF（50ng/ml)的无血清RMPI1640培养组的细胞凋亡率低，两之间差异有显性（P＜0．01）。结论 外源加入的VEGF可抑制血清撤离诱导的颊癌细胞的凋亡，提示VEGF在口腔恶性肿瘤的发生发展中起着多重的促进作用。     

重组人IL-6对近曲肾小管上皮细胞增殖及生物学表型的影响

 【目的】观察重组人白细胞介素6（rIL-6）在体外对人近曲肾小管上皮细胞株（HK-2）增殖及生物学表型的影响。探讨rIL-6对HK-2细胞作用的时间-效应及剂量-效应关系。【方法】用MTT比色法检测rIL-6对细胞增殖的影响；用流式细胞术检测rIL-6对细胞周期及α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）阳性细胞百分率的影响；倒置显微镜观察rIL-6对HK-2细胞形态改变的影响。【结果】MTT比色法示，rIL-6在10～50ng／mL作用浓度范围内促进HK-2细胞增殖，呈剂量、时间依赖效应；rIL-6作用浓度为100～200ng／mL时抑制细胞增殖，随作用浓度增加抑制作用加强（F=201．582，P〈0．001），（F=43．943，P〈0．001）。rIL-6影响HK-2细胞的DNA合成。HK-2细胞有基础量的α—SMA表达，25ng／mL rIL-6与HK-2孵育1～48h后，α—SMA阳性细胞百分率高峰出现在48h（F=442．22，P〈0．001）。rIL-6干预下，HK-2细胞形态由卵园型渐转变为长棱型、长条型。【结论】rIL-6可促进HK-2细胞增殖及生物学表型的转化，但大剂量的rIL-6可抑制HK-2细胞增殖。     

术中自体血回收对回收血中血小板、白细胞的影响

目的 探讨术中自体血液回收是否增加回收血中激活血小板、黏附白细胞的含量及是否有并发症发生。方法30例骨科患者,40～65岁,ASAⅠ-Ⅲ级预计术中失血量800—1000ml,利用流式细胞仪对回收血和体内血中血小板表面的α颗粒膜蛋白140（GMP．140、P-选择素）进行检测,比较两者的血小板激活程度、激活的血小板表面黏附的白细胞含量。术中观察患者的血压,术野的出血情况有无异常,有无血红蛋白尿发生。术后随访患者有无相关的并发症发生。结果回收血中激活血小板的含量,与血小板相黏附的白细胞量,均明显高于体内血;术中和术后患者均未出现低血压,弥散性出血,呼吸功能不全的表现。结论血液回收的过程可激活血小板和白细胞,且洗涤过程并不能去除所有的血小板和自细胞,但术中、术后未发现自体血回收相关并发症。     

儿童急性淋巴细胞白血病分型及其不同治疗方案与预后的临床研究

目的：研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的细胞形态学、免疫表型分型及不同方案治疗与预后的相关性。方法：采用骨髓涂片染色进行细胞形态学检查，采用单克隆抗体(McAb)和流式细胞仪(FCM)进行免疫表型检测。结果：103例儿童ALL患者中，67例(65．05％)为L1型，33例(32．04％)为L2型，无L2型，3例(4．91％)为其他。行免疫分型的87例中，58例(66．67％)为B系表达，12例(13．79％)为T系表达，10例(11．49％)为B系、髓系混合表达，3例(3．45％)为T系、B系混合表达，1例(1．15％)为T系、髓系混合表达，1例(1．15％)为B系、T系、髓系混合表达，2例(2．30％)为髓系表达。采用XH-88方案治疗25例，缓解卒92％，复发率52．17％，死亡率43．48％；协作组方案治疗41例，缓解率92．68％，复发率36．84％，死亡率55．26％；SUM-99方案治疗29例，缓解率93．10％，复发率18．52％，死亡率14．81％。结论：结合免疫分型与细胞形态学分型，将儿童ALL患者分为标危(SR)、中危(IR)和高危(HR)三组，按型采用不同的治疗方案对提高儿童ALL缓解率和降低其复发率有重要意义。