病毒性心肌炎小鼠心肌细胞线粒体DNA缺失的定量分析

目的：探讨线粒体DNA(mtDNA)缺失在病毒性心肌炎(VMC)发病机制中的作用。 方法： 50只BALB/c小鼠随机分为2组，实验组(40只) 腹腔注射内含CVB3(TCID50＝108)的Eagle液制备VMC小鼠模型，另10只为对照组。分别于病毒感染后第3、11和24 d行在体心功能和心肌细胞mtDNA3867缺失率测定，并用Spearman法对mtDNA3867缺失率及心功能测值行相关分析。 结果： 实验组小鼠病毒感染后第3 d心肌细胞mtDNA3867缺失率比对照组高8.3倍［(0.01970±0.00118)% vs (0.00211±0.00032)%，P＜0.05］，同时可见其-dp/dtmax亦显著高于对照组(P＜0.05)；病毒感染后第11 d时，mtDNA3867缺失率比对照组高14.6倍［(0.03292±0.00308)% vs (0.00211±0.00032)%，P＜0.05］，心脏的收缩(LVPSP、+dp/dtmax)和舒张功能(-dp/dtmax)亦有更显著损伤(均P＜0.05)；病毒感染后第24 d时，mtDNA3867缺失率仍显著高于对照组，比后者高11.5倍，其心功能亦未恢复正常。相关分析显示，mtDNA3867缺失率与LVPSP和+dp/dtmax呈显著负相关，与-dp/dtmax呈显著正相关，相关系数分别为－0.66、－0.79和0.80(均P＜0.05)。 结论： mtDNA3867缺失可能是VMC发病的病理生理机制之一。     

病毒性心肌炎小鼠心肌与骨骼肌细胞线粒体损伤及其相关性

目的探讨病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌与骨骼肌细胞线粒体损伤（线粒体膜磷脂脱失和线粒体DNA3867缺失）程度及二者的相关性。方法50只BALB/c小鼠随机分为2组,实验组（40只）腹腔注射内含柯萨奇B3病毒（Coxsackievirus B3,CVB3,TCID50=108）的Eagle液制备VMC小鼠模型,另10只为对照组。分别于病毒感染后3、11和24 d行心肌和骨骼肌细胞线粒体膜磷脂脱失程度和mtDNA3867缺失率的测定,并用Spearman法对其进行相关分析。结果实验组小鼠在病毒感染后3 d,可见心肌和骨骼肌细胞mtDNA3867缺失率显著高于对照组（P<0.05）,而线粒体膜磷脂脱失程度与对照组相比无显著性差异;病毒感染后11 d,心肌和骨骼肌细胞mtDNA3867缺失性损伤达高峰（P<0.05）,线粒体膜磷脂脱失程度亦显著高于对照组（P<0.05）;病毒感染后24 d,心肌和骨骼肌细胞线粒体膜磷脂脱失和mtDNA3867缺失程度与感染后11 d组比较无显著性差异,但与对照组和病毒感染后3 d组比较,仍有显著性差异（P<0.05）。线粒体的上述损伤性改变在心肌和骨骼肌细胞呈一致性同步变化,且具有良好相关性（P<0.05）。结论CVB3可显著损伤心肌和骨骼肌线粒体DNA和膜磷脂,两者损伤具有相关性,提示骨骼肌有望成为反映心肌细胞线粒体损伤的外周细胞“窗口”。     

扩张型心肌病外周血淋巴细胞亚群测定

为探讨扩张型心肌病（ＤＣＭ）有无免疫调节缺陷，用准确可靠的流式细胞计数仪测定了２０例ＤＣＭ患者及２４例冠心病（ＣＨＤ）患者外周血ＣＤ４及ＣＤ８洒巴细胞。结果发现两组患者心功能相似，ＣＤ４淋巴细胞比较亦无显著差别，而ＤＣＭ患者ＣＤ８细胞百分比明显低于ＣＨＤ患者。认为ＣＤ８淋巴细胞可能在ＤＣＭ发病中起一定作用。     

罗格列酮抑制内皮素诱发心肌肥大的研究

目的研究罗格列酮（rosiglitazone,RSG）抑制内皮素（endothelin-1,ET-1）诱发心肌肥大的作用及其机制。方法在培养新生大鼠心肌细胞中,采用RSG（PPARγ激动剂）、GW9662（PPARγ抑制剂）和蛋白激酶C（Proteinki-naseC、PKC）通路的激动剂（佛波醇酯,PMA）和蛋白激酶C通路的阻断剂白屈菜季氨碱（chelerythrine、che）观察罗格列酮在ET-1和PMA诱导心肌蛋白质合成中的影响。结果培养2d后,对照组（DMEM）蛋白质含量为（291±13）mg/L,ET-1组和PMA组分别为（339±15）mg/L和（329±14）mg/L,较对照组升高15%和13%（P<0.01）;ET-1+10-7mol/LRSG组、ET-1+10-7mol/LRS组+GW9662组、ET-1+che组、分别为（292±14）mg/L,（310±13）mg/L,（291±17）mg/L;与ET-1组比较分别降低13%、8%、13%（P<0.01,P<0.05,P<0.01）;PMA+10-7mol/LRSG组的蛋白含量较PMA组降低10%（P<0.01）。PMA和ET-1促进心肌细胞蛋白质的合成,RSG和che分别抑制蛋白质合成,PPARγ的阻断剂GW9662减弱RSG的抑制作用。测定心肌细胞的3H-亮氨酸掺入,RSG同样可以抑制ET-1和PMA诱导的心肌细胞肥大,GW9662可以削弱RSG的抑制作用。结论RSG抑制ET-1诱发的心肌肥大与PKC和过氧化物酶增值物激活受体γ（PPARγ）途径可能有一定关系。     

硒、谷胱甘肽过氧化物酶-1与地方性扩张型心肌病的交互关系

克山病是我国缺硒地区特有的地方性扩张型心肌病,病因至今未明.硒缺乏是主要的条件致病因子,但并不是惟一的致病因子.同样处在低硒环境下个体的克山病患病风险存在很大差异,提示病区个体可能存在遗传背景差异.本研究旨在筛选与克山病相关的GPx-1基因单核苷酸多态性位点,针对相关的基因位点进行深入的功能研究,以最终明确GPx-1基因多态性位点在克山病发病机制中的作用.     

中西医结合治疗术后粘连性肠梗阻

目的观察中西医结合治疗术后粘连性肠梗阻的疗效。方法170例腹部手术后粘连性肠梗阻患者,在西医常规治疗的基础上,随机分为治疗组和对照组,其中治疗组89例,采用中药鼻饲加灌肠,对照组81例,采用石蜡油鼻饲及灌肠,共治疗3 d,观察比较两组疗效。结果治疗组总有效率95.51%,对照组总有效率70.37%,两组比较有显著性差异(P<0.01),治疗组疗效显著优于对照组。结论中西医结合治疗术后粘连性肠梗阻,可提高其非手术治疗的疗效,值得临床推广应用。     

血清肌钙蛋白I升高与病毒性心肌炎诊断及病程关系探讨

目的估价血清肌钙蛋白I(cTnI)升高与病毒性心肌炎(VMC)诊断和发展的关系.方法用抗人心肌cTnI单抗2B1.9和2F6.6双夹心ELISA法,定量检测282例VMC患者血清cTnI量,[3HQNB]结合检测cTnI持续升高患者血清对人心肌M2受体数量和亲和力的影响;PCR扩增检测EVs-RNA,淋巴细胞和心肌细胞mtDNA缺失率,部分病例测定柯萨奇B病毒(CVB)IgM及中和抗体滴度.结果临床诊断VMC患者282例,其中157例cTnI升高,阳性率55.7%,3个月转阴率52.3%,6个月转阴率为90.8%.cTnI持续升高的VMC患者,血清内出现抗M受体抗体,减少心肌M受体数目,抑制亲和力,导致心肌M2受体下调和去敏.与扩张型心肌病患者血清抗M受体抗体作用相似.VMC患者心肌细胞与淋巴细胞mtDNA缺失率比正常人明显增高2.5倍和15.8倍.cTnI持续升高3个月患者的CVB-IgM持续时间延长,心律失常和症状改善率明显低于cTnI转阴者.结论血清cTnI升高是诊断VMC心肌损伤的客观证据,cTnI持续升高可能与VMC患者自身抗体出现、心肌受体损伤、mtDNA缺失等向扩张型心肌病发展过程有关.     

可溶性CD163在急性冠脉综合征患者血清中的表达及意义

目的 探讨可溶性CD163(soluble CD163,sCD163)在急性冠脉综合征患者血清中的水平及临床意义.方法 以2013年2月至2014年12月在本院就诊的672例急性冠脉综合征患者和305例同期接受体检的健康成年人作为研究对象,采用酶联免疫吸附法检测两组研究对象血清中sCD163的水平,并进行相关统计学分析.结果 急性冠脉综合征患者血清中sCD163水平在入院后24 h内、72 h及30 d后均显著高于健康对照组(P＜0.05),急性冠脉综合征患者血清中sCD163的水平与患者的Gensini评分存在显著相关性,Gensini评分越高的患者血清中sCD163的水平越高(P ＜0.05);ROC曲线分析表明:以651.5 ng/mL为界值,sCD163诊断急性冠脉综合征的灵敏度为85.40％,特异度为91.52％,ROC曲线下面积为0.931 3.结论 sCD163在急性冠脉综合征患者血清中的水平明显增高,有可能成为诊断急性冠脉综合征的新指标.     

内皮素-1刺激对血管平滑肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达的作用

目的研究ET-1对血管平滑肌过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-1）表达的影响以及与血管平滑肌增殖的关系。方法以成年16m周Wistar大鼠为研究对象，采用主动脉血管平滑肌原代培养技术，培养大鼠腹主动脉血管平滑肌1～3代，然后加入ET-1进行刺激．使用RT—PCR和Western blot技术观察ET-1作用后0、12、24、48、72h以及不同浓度ET—1刺激48h后PPAR-γ mRNA和蛋白表达变化，同时用MTT法检测血管平滑肌（VSMCs）增殖。结果ET-1刺激后12h．PPAR-γ在mRNA和蛋白水平表达上未见明显变化（P〉0．05），而24h时出现了表达轻度下调，与对照组（无ET-1刺激）差异具有显著性（P〈0．05），48～72h下降更加明显，与对照组相比差异具有高度显著性（P〈0．01）。不同浓度ET-1刺激48h后，随着浓度的增加．PPAR-1表达减低，各组相比具有显著性差异（P〈0．01）。而血管平滑肌的增殖在12h就出现，且随着时间的延长，增殖增强而且随着ET-1浓度的增加，VSMCs增殖增加。结论ET-1在引起VSMCs增殖的同时，可引起PPAR-γ在mRNA和蛋白水平的表达减低，提示ET—1导致的VSMCs增值可能与PPAR-γ有一定的关系。