BORIS通过表观修饰对人肝癌细胞SOCS3表达的调控

目的 探讨人肝癌细胞系中印记位点结合因子（BORIS）对细胞因子信号传导抑制因子-3（SOCS3）表达的调控方式。方法 通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测SOCS3 mRNA在肝癌细胞中的表达;Western blot检测敲低和过表达BORIS的肝癌细胞中SOCS3蛋白的表达;在敲低和过表达BORIS的肝癌细胞系中使用甲基化特异性PCR（MSP-PCR）,检测SOCS3基因启动子区域甲基化状态;通过UCSC数据库分析,找到SOCS3基因启动子区潜在的BORIS结合位点,使用染色质免疫共沉淀（ChIP）-实时定量PCR（ChIP-qPCR）探索内源性高表达BORIS细胞中BORIS在SOCS3启动子区的富集状况;通过ChIP-qPCR检测敲低和过表达BORIS对SOCS3启动子区组蛋白甲基化状态。结果 在肝癌细胞中SOCS3 mRNA表达较高,在敲低或过表达BORIS mRNA肝癌细胞中,SOCS3蛋白表达相应下调或上调,即在肝癌细胞中BORIS以正向调控的方式调控SOCS3蛋白质的表达;MSP-PCR实验显示在SMMC-7721和HepG2细胞SOCS3启动子为非甲基化,敲低BORIS不改变甲基化状态,Huh7细胞的SOCS3启动子区为甲基化状态,过表达BORIS后,SOCS3启动子区转变为非甲基化状态,但在HCCLM3中SOCS3启动子为非甲基化,过表达BORIS不影响甲基化状态;ChIP-qPCR表明在内源性高表达BORIS的细胞中,BORIS特异性结合在SOCS3启动子区;组蛋白甲基化检测结果表明,敲低BORIS减少了BORIS在SOCS3启动子区富集,同时减少该区域H3K4 me2,增加H3K27 me3,而在过表达BORIS的细胞中呈现相反的结果。 结论 BORIS作为一个表观遗传调控因子调控SOCS3基因启动子区的甲基化状态和组蛋白甲基化修饰,影响SOCS3的表达,进而参与肝癌发生发展的过程。     

中医药保护腹膜透析患者残肾功能的Meta分析

目的:系统评价中医药对保护腹膜透析患者残肾功能的疗效。方法:电子检索"中国知网""万方数据库""维普数据库""Pubmed"数据库,检索时间为建库至2017年12月,按照纳入、排除标准对纳入文献研究进行资料提取及质量评价,采用Rev Man5.3统计软件进行Meta分析。结果入选12篇研究,共627例患者。结果显示与西医治疗组相比,中医药联合西医治疗可以维持高水平的24小时尿量[WMD=210.63,95%CI(102.48,318.79),P=0.0001],提高RRF[WMD=0.98,95%CI(0.29,1.66),P=0.005],提高血红蛋白水平[WMD=6.44,95%CI(2.86,10.02),P=0.0004]。但是未能改善腹透患者的Kt/V[WMD=0.07,95%CI(-0.01,0.15),P=0.11]、血肌酐水平[WMD=-26.23,95%CI(-65.12,12.65),P=0.19]。结论:中医药可以保护腹膜透析患者残肾功能,改善患者血红蛋白水平,提高生活质量。     

子宫内膜异位症及卵巢癌患者血清脑源性神经营养因子水平的表达及意义

目的本研究旨在探讨子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)及卵巢癌患者血清中脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)水平的表达及意义。方法收集2014年5月至2017年8月中国石油天然气集团公司中心医院收治的EMs患者82例(内异症组)和卵巢癌患者96例(卵巢癌组),以及同期来院体检的健康女性50例(对照组)。应用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测患者血清中BDNF的表达水平,比较3组间的差异。比较按照美国生育学会(American Fertility Society,AFS)不同分期的EMs患者血清BDNF水平的表达差异,并分析卵巢癌患者血清BDNF水平与临床病理特征之间的关系。结果术前内异症组与卵巢癌组的血清BDNF水平均明显高于对照组,而卵巢癌患者的血清BDNF水平又明显高于内异症组;术后内异症组与卵巢癌组的血清BDNF水平均较术前明显降低,但仍高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);术后卵巢癌患者的血清BDNF水平与内异症组患者比较差异无统计学意义(P0.05)。不同AFS分期的内异症患者的血清BDNF水平比较,Ⅰ~Ⅱ期患者明显低于Ⅲ~Ⅳ期(P0.05);出现淋巴结转移的卵巢癌患者血清BDNF水平与无转移患者间比较,差异无统计学意义(P0.05);浆液型肿瘤患者血清BDNF水平明显高于黏液型肿瘤、透明细胞癌和子宫内膜样腺癌(P0.05),但黏液型肿瘤、透明细胞癌和子宫内膜样腺癌的血清BDNF水平比较差异无统计学意义(P0.05);临床分期Ⅰ~Ⅱ期患者的血清BDNF水平明显低于Ⅲ~Ⅳ期,差异有统计学意义(P0.05)。结论 BDNF在卵巢癌与EMs患者的血清中均呈高表达,但卵巢癌患者的表达更高。血清BDNF水平在不同AFS分期的EMs患者间存在差异,也与卵巢癌患者的组织学类型和临床分期有关。血清BNDF蛋白在卵巢癌与EMs的鉴别方面具有一定意义。     

芪龙活络颗粒质量标准研究

目的 建立芪龙活络颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱法对制剂中黄芪、川牛膝、鸡血藤药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量,色谱柱为Eclipse XDB-C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（23∶77,V/V）,流速为1.0 mL/min,检测波长为286 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果 薄层色谱斑点清晰,且阴性对照无干扰。丹酚酸B的进样量在0.062 4～1.248μg范围内与峰面积线性关系良好（r=1.000,n=5）;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.00%(n=6);平均回收率为107.61%,RSD为4.28%(n=6)。5批样品中丹酚酸B的含量为1.09～1.32 mg/g。结论 该方法专属性好、结果准确,可用于芪龙活络颗粒的质量控制。暂订芪龙活络颗粒中丹酚酸B的含量应不低于1.0 mg/g。     

循环microRNA在人类疾病诊断标志物筛选中的研究进展

目前,疾病的诊断需要结合临床表现(病史、症状和体征)、实验室检查、影像学检查等结果进行综合判断,涉及流行病学、病理生理学、免疫学、微生物学、生化学和遗传学等多学科内容。随着人类寿命延长和环境因素的变化,疾病的诊断模式和诊断方法也更加多样化,临床实践对诊断手段的实用性、准确性及预见性也提出了更高的要求。研究者对作为疾病分子诊断标志物的蛋白质、信使RNA(message     

血红蛋白含量与急性冠状动脉综合征的相关性研究

目的 :探讨冠心病患者外周血红蛋白含量 (Hb)与急性冠状动脉综合征 (ACS)的相关性。方法 :应用美国库尔特JT血球计数器测定Hb含量 ,结合冠状动脉造影 (冠脉造影 )及超声心动图检查 ,观察 2 86例冠心病患者Hb含量及其与冠状动脉硬化及ACS的相关性。结果 :冠心病患者外周血中Hb含量较正常对照组显著增加 (P <0 0 5 ) ,其中ACS组 (急性心肌梗死及不稳定型心绞痛 )Hb含量较正常对照组增加更明显。四分位法研究ACS组Hb含量位于最高 1 4位者较最低 1 4位者显著增加 (P <0 0 5 )。ACS组Hb含量位于最高 1 4位者较稳定型心绞痛 (SAP)组显著增加 (P <0 0 5 )。Hb含量位于最高 1 4位者发生ACS者较Hb含量位于最低 1 4位者显著增加 (P <0 0 5 )。冠状动脉造影显示ACS组冠状动脉狭窄≥ 95 %及冠状动脉闭塞病变的发生率显著高于SAP组 ,冠状动脉闭塞组其Hb含量 (15 0 92± 12 80 )g L显著高于无冠状动脉闭塞组 (139 98± 13 11)g L(P <0 0 5 )。结论 :ACS患者中血红蛋白含量较高。     

人乳腺癌MDR1基因稳定沉默细胞的筛选及其生物学特性

目的筛选MDR1沉默的人乳腺癌细胞并比较其生物学特性。方法采用BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expres-sion System生产表达MDR1基因shRNA的慢病毒载体,转导敏感人乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM,杀稻瘟菌素(blasticidin)筛选获得MDR1稳定沉默细胞MCF-7/RNAi和MCF-7/ADM/RNAi。定量RT-PCR检测MDR1mRNA表达,流式细胞术检测P-GP蛋白表达和功能,MTT法检测药物敏感性。结果经10 mg/L blasticidin筛选12 d获得MCF-7/RNAi和MCF-7/ADM/RNAi细胞。MCF-7、MCF-7/RNAi、MCF-7/ADM和MCF-7/ADM/RNAi细胞的MDR1mRNA相对表达水平分别为1、0.13、17.14和2.01;P-GP表达分别为(1.5±0.3)%、(1.2±0.2)%、(89.4±3.6)%和(16.3±1.9)%;细胞内Rh123的潴留分别为(92.4±3.1)%、(90.6±4.0)%、(13.6±1.6)%、(72.4±2.8)%;IC50值分别为0.90、0.92、19.61和4.04 mg/L。结论应用慢病毒载体稳定沉默MDR1基因可有效逆转人乳腺癌细胞耐药性。     

尿红细胞平均直径法在肾小球性与非肾小球性血尿鉴别中的应用

血尿是肾脏患者最常见的症状之一,其鉴别意义重大。临床上,往往广泛地采用相差显微镜等进行形态学分析,国外学者还建议使用血液细胞全自动分析仪进行尿红细胞分布曲线的分析等。前述一法重复性和特异性较差,前述二法设备要求较高、分析费用较高,均不宜在普通医院和患者中推广应用。