高血压脑出血术后再出血的原因分析与护理监测

目的:探讨高血压脑出血患者再出血原因及护理监测方法.方法:对2010年我科18例高血压脑出血术后再出血患者进行护理监测,并对发生再出血的原因进行探讨.结果:通过严密观察,认真分析及掌握再出血症状等均可提供早期发现,及时处理.结论:掌握再出血原因和护理监测要点可挽救患者生命.     

骨髓间充质细胞和单个核细胞移植对糖尿病小鼠胰岛功能的影响

目的 比较骨髓间充质细胞移植和单个核细胞移植对糖尿病小鼠胰岛功能影响的差异.方法 建立糖尿病小鼠模型并分成3组:对照组(n=14)通过尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS);单个核细胞组(n=14)通过尾静脉移植骨髓单个核细胞;间充质细胞组(n=14)通过尾静脉移植骨髓间充质细胞.观察移植后1周(n=6)和移植后6周(n=8),各组小鼠血糖的变化、胰岛数量、胰腺组织形态学特征及相关标记物的表达.结果 移植后1周,间充质细胞组小鼠血糖出现显著下降(16.6±1.6)mmol/L,与对照组(26.3±0.5)mmol/L和单个核细胞移植组(24.4±1.3)mmol/L比较差异有统计学意义(P＜0.05),并一直维持到移植后第6周,血糖下降到(16.5±1.5)mmol/L,与对照组(27.7±0.1)mmol/L比较差异有统计学意义(P＜0.05);移植后1周,间充质细胞组小鼠胰岛数目(21.2±1. 1)和胰岛β细胞数目(415.9±25.4)显著增加,与对照组(11.2±1.3)/(65.9±7.1)和单个核细胞组(12.2±1.3)/(64.1±6.5)比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).单个核细胞组和间充质细胞组小鼠胰岛中均发现BrdU(+)Insulin(+)细胞和BrdU(+)Insulin(-)细胞.结论 骨髓间充质细胞移植改善糖尿病小鼠胰岛功能的效果优于骨髓单个核细胞移植.移植后胰岛的再生既来源于胰岛β细胞的增殖,也可能来源于胰岛干细胞的分化.

Abstract：

Objective To compare the different effects of bone marrow mononuclear cells vs mesenchymal cells transplantation on islets function of diabetic mice. Methods Mouse diabetic models were created by multiply peritoneal injection of low-dose streptozotocin (STZ) and divided into three groups:control group ( n = 14) , bone marrow mononuclear cells group ( n = 14) , and bone marrow mesenchymal cells group (n = 14). Blood glucose was measured weekly after transplantation by glucometer. Histochem istry and immunofluorescence were performed to characterize pancreatic histology, morphology and markers expressed in receipt pancreas. Results Compared with control group and bone marrow mesenchymal cells group, blood glucose levels in bone marrow mesenchymal cells group were significantly reduced at first week after transplantation[( 16. 6 ± 1.6 ) vs ( 26. 3 ± 0. 5 ) / ( 24. 4 ± 1.3 ) mmol/L, P ＜ 0. 05]and sustained to reduce at 6th week after transplantation[( 16. 5 ± 1.5 ) vs ( 27.7 ± 0. 1 ) mmol/L in control group,P＜0. 05]. One week after transplantation, the islets number in bone marrow mesenchymal cells group was larger than in control group ( 21.2 ± 1. 1vs 11.2 ± 1.3, P ＜ 0. 05 ) and bone marrow mononuclear cells group ( 21.2 ± 1. 1vs 12. 2 ± 1.3 ,P ＜0. 05 ). One weeks after transplantation, the beta cell number in bone marrow mesenchymal cells group was larger than in control group (415.9 ± 25.4 vs 65.9 ±7. 1,P＜0.05) and bone marrow mononuclear cells group (415.9 ±25.4 vs 64. 1 ±6.5,P＜0.05). In bone marrow mononuclear cells and bone marrow mesenchymal cells groups, there were several BrdU ( + )Insulin( - ) cells and BrdU( + )Insulin( - ) cells in the islets. Conclusion The effect of bone marrow mesenchymal cells transplantation to improve diabetic islet function is more satisfactory than bone marrow mononuclear cells transplantation. Bone marrow mesenchymal cells transplantation can initiate pancreatic islets β cells regeneration by both proliferation of β cells and differentiation of pancreatic stem cells.     

小鼠肝星状细胞分离纯化和体外培养模型的建立

目的 建立小鼠肝星状细胞(m-HSCs)分离纯化的高效稳定方案,并通过原代和传代培养观察其生物学特性.方法 依次应用预灌注液、0.1% Pronase E、0.075% Collagenase NB4G对在体肝脏原位灌注消化.肝脏离体后,在0.02%DNaseI液中磁力搅拌消化10 min,低速离心(25g,5 min)去除残余肝实质细胞,进一步用Optiprep密度梯度液获得纯化的m-HSCs.采用锥虫蓝染色法评估细胞产量及活力;采用自发荧光及油红O染色鉴定细胞纯度;采用光镜、电镜以及Desmin/α-SMA免疫荧光双染色观察细胞形态和生物学特征.结果 分离得到的原代m-HSCs数量为(1.4±0.3)×106/g肝脏,细胞活率＞95%;原代培养24 b后,细胞纯度＞90%,传1代后细胞纯度接近100%.静止期和不同活化阶段的m-HSCs在亚显微结构以及α-SMA表达强度等方面存在差异.结论 建立的m-HSCs分离和纯化方法及体外细胞培养模型具有稳定性和高纯度性及高活率性.

Abstract：

Objective To establish a high-performance and stable model for isolation and purification of mouse hepatic stellate cells, and investigate their biological phenotypes by primary culture and subculture. Methods The liver was digested by in situ perfusion of pre-perfusion solution, 0.1% pronase E and 0.075% collagenase NB4G in turn. The liver was continued to digest using 0.02% DNase Ⅰ liquid with magnetic stirring for 10 min in vitro. After low-speed centrifugation used to remove residual hepatocytes, cells were treated with Optiprep density gradient solution to obtain the purified m-HSCs. Trypan blue staining method was used to calculate cell production and viability. The cell purity was identified by mHSCs autofluorescence and oil red O staining. Light microscopy, electronic transmission microscopy and double immunofluorescence staining of Desmin and α-SMA were done to observe morphological characteristics and biological phenotypes of m-HSCs. Results The yeild rate of m-HSCs was (1.4±0.3)×106/g of liver tissue, the cell viability was more than 95%, the cell purity was more than 90% after 24 h of primary cluture and close to 100% after the first cell passage. The activated m-HSCs had different characteristics of submicroscopic structures and expression level of α-SMA. Conclusion This study established a stable model for isolation, purification and culture of m-HSCs, which obtained the high purity and high-living rate of m-HSCs.     

肩锁关节脱位闭合穿针固定定位导向器的研制和临床应用

目的：通过研究一种方便于闭合复位经皮缝合内固定治疗肩锁关节脱位的辅助工具观察其临床应用效果。方法：自2008年6月至2009年12月,应用自行设计的肩锁关节脱位闭合穿针固定定位导向器穿针固定配以经皮修复肩锁韧带治疗肩锁关节脱位36例。其中男24例,女12例;年龄20～61岁,平均38.6岁。术前受伤时间3.5～72h,平均15.2h。均为TossyⅢ度肩锁关节脱位,无合并锁骨骨折。总结手术所用时间、术中出血量及临床效果。结果：术中未发生锁骨下神经、血管损伤,平均手术时间20min,平均出血量10ml,X线片示肩锁关节固定克氏针位置准确。术后6周取针,随访2～26个月,平均14.3个月,按Karlsson标准评定临床效果满意,优22例,良13例,差1例。结论：此方法简便易行,缩短了手术时间,费用低,且无手术切口瘢痕形成,保证了体表美观,属微创范围,便于推广应用。     

二孔法拖出式腹腔镜阑尾切除术(LA)36例

目的 探讨二孔法拖出式腹腔镜阑尾切除术(LA)的临床经验.方法 回顾性分析36例LA的临床资料.结果 本组全部顺利完成手术,无中转开腹,手术时间28～90 min,术后1 d下床活动,1～3 d肠蠕动恢复正常,3～6 d出院.1例发生切口轻度感染,未发生残端瘘、腹腔脓肿及肠粘连等并发症.结论 二孔法LA具有创伤小,恢复...     

颅内破裂动脉瘤栓塞后再出血分析

目的分析颅内破裂动脉瘤栓塞后再出血的发生率及其可能的影响因素。方法随访285例破裂动脉瘤病人，随访时间2-72个月，平均28.1个月，通过书信，电信以及门诊的方式进行随访，内容以询问病人症状，体征为主，重点在于动脉 瘤栓塞后是否再出血。结果4例病人发生动脉瘤再次破裂出血，再出血率为1.4%，其中不全栓塞3例，大动脉瘤2例。结论颅内破裂动脉瘤应用弹簧圈栓塞后再出血发生率大大降低，再出血主要发生于不全栓塞的动脉瘤和何种较大的动脉瘤。     

非返性喉返神经的解剖特点及术中损伤的预防

目的研究非返性喉返神经(non-recurrent laryngeal nerve,NRLN)的解剖学特点和变异,探讨甲状腺手术中发现NRLN的方法和总结预防其损伤的经验。方法对北京协和医院于2007年1月至2012年6月期间行单侧或双侧甲状腺腺叶全切手术的2 211例患者的资料进行回顾性分析,同时对国内文献报道的114例NRLN患者的资料进行分析。结果北京协和医院2 211例甲状腺手术中暴露喉返神经3 479条,11条确认为右侧NRLN(0.32%,11/3 479),其中Ⅰ型3例,ⅡA型7例,ⅡB型1例;1例为同时伴有返支和非返支的喉返神经,余10例均为完全型;手术中均未发生神经损伤。文献报道的114例NRLN占报道病例总数的0.14%～4%;其中右侧NRLN 109例,Ⅰ型4例(3.7%,4/109),ⅡA型75例(68.8%,75/109),ⅡB型9例(8.3%,9/109),分型不详21例(19.3%,21/109),同时伴有喉返神经返支3例(2.8%,3/109);左侧NRLN 5例,ⅡA型2例,分型不详3例,其中1例同时伴有喉返神经返支。论著或病例报道的104例患者中,手术导致NRLN麻痹共16例(15.4%,16/104),其中Ⅰ型1例,ⅡA型9例,分型不详6例。结论 NRLN少见,主要发生在右侧,术中易损伤,主要损伤类型为ⅡA型;外科医生应充分认识NRLN及其变异类型,预防其损伤。     

第一跖底动脉的外科解剖

目前第二趾移植和(?)趾甲皮瓣移植重建手功能的术式,常采用足背动脉与第一跖背动脉为血管蒂。但该血管蒂常有变异,据临床的实践经验,改用第一跖底动脉是一种可行的方法。但分离第一跖底动脉难度较大,故在55例足标本和13例血管铸型标本上观察了第一跖底动脉有关的外科解剖,讨论了利用第一跖底动脉的应用解剖学要点。     

瘢痕表皮角蛋白的变化规律及正常表皮细胞培养液对成纤维细胞胶原合成的影响

目的：研究增生性瘢痕和正常皮肤表皮角蛋白的变化规律以及正常表皮细胞培养液对瘢痕和正常皮肤成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法：4例烧伤患者,每人取少量增生性瘢痕和临近的正常皮肤组织,用免疫组化法观察两种组织中与细胞增殖有关的角蛋白14、与细胞分化有关的角蛋白10和与细胞活化有关角蛋白16的变化。收集正常表皮细胞培养12h后的无血清培养液,用DMEM依次配成体积分数为0、5％、10％和20％,分别加入到加有正常和瘢痕组织成纤维细胞的培养板中。分别以MTT法测定吸光度（A）值,Beckman液闪计数仪测定3H-脯氨酸掺人值,分别用以反映成纤维细胞的增殖和胶原合成速率。结果：与正常表皮比较,瘢痕表皮中角蛋白16明显表达增强,角蛋白10降低,角蛋白14无明显变化;正常表皮细胞培养液能促进正常皮肤和瘢痕成纤维细胞的增殖并抑制胶原的合成,但对两种成纤维细胞的作用程度不尽相同,对正常成纤维细胞增殖的促进作用和对胶原合成的抑制作用都较瘢痕成纤维细胞显著。结论：瘢痕表皮的活化可能是瘢痕增生的一个重要因素;正常表皮细胞培养液既能促进成纤维细胞增殖,还能抑制胶原的合成,但对瘢痕成纤维细胞胶原合成的抑制作用较正常成纤维细胞弱。     

快速康复外科理念在胃癌患者中的临床研究

【摘要】 目的 探讨快速康复外科理念在胃癌患者中临床应用的安全性和有效性。方法 回顾性研究184例胃癌患者临床资料,一组为快速康复外科组,另一组为传统治疗组,每组92例。比较两组患者的手术及术后恢复相关评价指标。结果 快速康复外科组与传统治疗组相比,在手术时间(182±43 min vs 190±46 min,P=0.68)、术中出血量(179±64 mL vs 182.59±74.65 mL,P=0.52)、淋巴结清扫数(21.2±7.2个vs 20.8±8.7个, P=0.59)、术后并发症(8.70% vs 10.87%,P=0.17)比较无显著性差异。而术后首次排气时间(3.6±0.6 d vs 5.0±0.8 d,P<0.01)、术后住院天数(7.1±1.4 d vs 11.5±2.0 d,P<0.001)和住院总费用(40583±3693元 vs 46438±6311元,P<0.001)比较有显著性差异。结论 快速康复外科理念应用于胃癌患者安全有效,可明显加快胃癌患者术后康复进程。