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大鼠肾细胞分离制备及培养方法的比较 总被引:5,自引:0,他引:5
目的比较胶原酶消化法、胰蛋白酶消化法和胶原酶、胰蛋白酶两步消化法(简称两步消化法)对大鼠肾细胞分离效果及细胞产量的影响,以及不同培养基(MEM、RPMI1640)、鼠龄(乳鼠、成年鼠)对细胞产量、质量、增殖率和乳酸脱氢酶(LDH)漏出量的影响。方法分别对两组Wistar大鼠(乳鼠和成年鼠)用三种不同的消化方法制备大鼠肾组织细胞悬液,分别在MEM培养液和RPMI1640培养液中原代培养,培养48小时之后第一次传代,观察细胞质量,计算细胞产量,MTT法检测传代细胞24~48小时之间的增殖率,生化分析仪检测传代细胞第1~7天培养液中LDH漏出量。结果胶原酶消化法和两步消化法的肾细胞产量显著高于胰蛋白酶消化法(P<0.01),两步消化法的细胞质量优于胶原酶消化法,MEM培养液和RPMI1640培养液对细胞产量、增殖率和LDH漏出量的影响均无显著性差异,乳鼠的肾细胞产量显著高于成年鼠(P<0.01)。结论两步消化法对于肾细胞的分离制备尤为适合,MEM培养液和RPMI1640培养液均适于肾细胞的培养,乳鼠比成年鼠更适合肾细胞的制备。 相似文献
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哺乳动物细胞基因突变试验是近年来发展的检测化学物质致突变作用一较为成熟的方法.本文利用中国仓鼠肺V79细胞HGPRT基因位点突变试验对蜂胶的致突变性和有机锗Ge-132的抗突变性进行了初步研究.结果显示:①剂量为2μg/ml、10μg/ml,50μg/ml的蜂胶浸出液无诱变性.②剂量为100μg/ml的Ge-132可抑制丝裂霉素C诱导的V79细胞基因突变, 相似文献
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目的观察邻苯二甲酸二异丁酯(DiBP)对小鼠海马cAMP/PKA-CREB信号通路的影响。方法 30只雄性昆明小鼠适应性喂养3天后,按体重随机分为一个对照组和4个实验组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。对照组小鼠灌胃给予玉米油溶剂;实验组小鼠灌胃给予含DiBP的玉米油溶液,剂量分别为:50、250、500、1000mg/kg BW。实验周期8周,普通饲料喂饲,自由饮水。实验结束后冰浴条件下取海马,采用酶联免疫法测定环磷酸腺苷(cAMP)含量;蛋白印迹法测定磷酸化蛋白激酶A(P-PKA C)、磷酸化环磷腺苷反应元件结合蛋白(P-CREB)表达水平;实时荧光定量PCR法测定CREB、脑源性神经营养因子(BDNF)、c-fos和c-jun的mRNA表达水平。结果第Ⅳ组海马组织中cAMP含量和P-PKA C蛋白表达水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);各剂量组P-CREB蛋白表达量均低于对照组,其中第Ⅱ组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),同时CREB、BDNF、c-fos和c-jun的mRNA表达水平与对照组相比都呈不同程度的下调。结论小鼠海马cAMP/PKA-CREB信号通路中多种信号分子的表达异常,可能是DiBP导致小鼠认知损伤的重要机制之一。 相似文献
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目的研究转人α-乳清白蛋白基因奶粉对Wistar大鼠的亚慢性毒性。方法取初断乳Wistar大鼠140只,雌雄各半,按照体重随机分为7组。分别喂饲含有转人α-乳清白蛋白比例为15%、30%和60%成分奶粉的配制饲料,添加比例为15%、30%和60%普通奶粉的配制饲料和基础饲料,喂饲90天。在实验中期(第45天)和实验结束时(第90天)采血检测血液学和血液生化指标。实验结束时处死实验动物,测定脏器绝对重量,计算脏器指数,并对主要脏器进行病理组织学观察。结果转人α-乳清白蛋白基因奶粉组与普通奶粉组和基础饲料组比较,未发现转人α-乳清白蛋白基因奶粉对动物体重、食物利用率、血液学、血液生化、脏器系数和病理组织学观察有生物学意义的改变。结论给予大鼠转人α-乳清白蛋白基因奶粉90天未发现该奶粉对实验动物有毒性作用。 相似文献
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致敏模型属IgE介导的Ⅰ型过敏反应类型,该模型可用于转基因食品潜在致敏性的评价. 相似文献
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<正>咳嗽变异性哮喘(CVA)是指以慢性咳嗽(>8周)为主要或唯一症状的不典型哮喘,常为刺激性咳嗽。近年来本病的全球发病率和病死率仍呈上升趋势,有研究结果显示,30%的CVA患者不经治疗或治疗不当可发展成为典型哮喘[1]。目前西医治疗本病常选用吸入糖皮质激素,同时可联合吸入β2受体激动剂或其他支气管舒张剂以缓解症状,但停药后病情易反复,难以根治,严重影响患者的肺功能和日常生活质量。 相似文献
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植物甾醇具有多种生物活性,如降低胆固醇、抗溃疡、抗肿瘤等,作为用于食品使用的植物化学物已在一些国家获得批准.其降胆固醇效应具有自身特点,且作用机制也有自身特色,公认为其降胆固醇效应是通过抑制肠道胆固醇吸收实现的,除此之外,还有其他作用机制,如影响胆固醇运输以及影响肝脏胆固醇合成和分泌.本文主要对其降胆固醇的机制进行综述. 相似文献
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目的初步研究邻苯二甲酸二异丁酯(DiBP)对小鼠被动回避学习记忆行为的影响,并探讨其是否可以通过血脑屏障并影响海马神经细胞凋亡。方法将60只昆明小鼠按体重随机分为5组,即对照组和4个不同剂量的DiBP剂量组(第Ⅰ组50mg/kg BW,第Ⅱ组250mg/kg BW,第Ⅲ组500mg/kg BW,第Ⅳ组1000mg/kg BW)。其中,对照组给予玉米油溶剂灌胃,而各剂量组给予相应剂量的邻苯二甲酸二异丁酯玉米油溶液灌胃,连续进行8周。实验结束后,分别对各组动物进行避暗箱行为学测试,测定脑组织中DiBP含量及海马神经细胞凋亡率,并在透射电镜下观察海马神经细胞超微结构。结果第Ⅳ组小鼠的被动回避能力显著性降低(P<0.05);第Ⅲ组和第Ⅳ组小鼠脑组织可检测出不同含量的DiBP,平均浓度分别为(1.27±0.56)和(1.96±0.42)μg/g;随着DiBP染毒剂量增高神经细胞凋亡率有升高的趋势,第Ⅳ组和对照组相比有显著性差异(P<0.05);各DiBP剂量组小鼠海马神经元的超微结构发生了不同程度的病理改变。结论在本试验条件下,高剂量DiBP可损伤实验小鼠被动回避学习记忆能力,并可穿透血脑屏障,增加海马神经细胞凋亡率,线粒体损伤是海马神经细胞凋亡规律改变的原因之一。 相似文献