rCTB和TT为蛋白载体的A群流脑多糖黏膜免疫初步研究

目的 对重组霍乱毒素B亚单位(rCTB)作为多糖蛋白结合疫苗候选载体的可行性进行分析,并对以破伤风类毒素(TT)与rCTB为蛋白载体的黏膜投递型疫茸的免疫效果进行初步探讨.方法 首先通过基因工程手段获得具有五聚体结构的rCTB.再将rCTB五聚体蛋白利用化学方法(ADH方法)与A群脑膜炎球菌多糖(GAMP)耦联,获得多糖蛋白结合物GAMP-rCTB,并将其与TT为蛋白载体的A群流脑多糖蛋白结合物(GAMP-TT)以滴鼻和注射途径免疫BALB/c小鼠,并对其进行免疫学评价.结果 以rCTB和TT为载体的A群流脑多糖蛋白结合物,通过黏膜投递途径均可在血清中产生相对较高的多糖特异性IgG抗体,在肺部盥洗液和小肠黏膜也产生了相应的特异性IgA抗体.结论 rCTB和TT均可作为黏膜投递型多糖结合疫苗的候选蛋白载体.以rCTB为载体的多糖蛋白结合物,黏膜途径可能在免疫功能方面优于注射途径.     

生黄合剂对缺血再灌注模型大鼠心肌细胞凋亡及相关基因bax、bcl-2 mRNA的影响

BACKGROUND:Sheng-Huang mixture including Chinese medicine Shengmai Decoction and total flavonoids of stems and leaves of radix has been shown to resist inflammation, regulate immune function, and protect ischemic myocardial tissues. However, its effect on the apoptosis of cardiac muscle cells after ischemia/reperfusion injury remains unclear. OBJECTIVE:To investigate the effects of Sheng-Huang mixture on cardiocyte apoptosis and bax and bcl-2 mRNA expression in rats with ischemia-reperfusion injury.  METHODS:Thirty-six Sprague-Dawley rats were divided randomly into six groups: low-dose, moderate-dose and high-dose Sheng-Huang mixture, positive control, blank and model groups (n=6). After 7 days of administration, models of myocardial ischemia-reperfusion injury were established. TUNEL was used to detect myocardial apoptosis. RT-PCR was utilized to measure bax and bcl-2 mRNA expression in the ischemic and reperfusion region.  RESULTS AND CONCLUSION: (1) The bcl-2 mRNA expression was significantly higher in the Sheng-Huang mixture group than in the model group (P < 0.05), but bax mRNA expression was significantly lower (P < 0.05). Thus, bcl-2/bax ratio increased. In addition, apoptosis index was more significantly decreased in the Sheng-Huang mixture group (P < 0.05). (2) Results demonstrated that Sheng-Huang mixture can protect rat myocardium against ischemia/reperfusion injury, and effectively increase the bcl-2/bax ratio and inhibit the apoptosis of cardiomyocytes, and the underlying mechanism is mediated by up-regulating bcl-2 mRNA expression and down-regulating bax mRNA expression.     

人源性抗角蛋白单链抗体在巴氏毕赤酵母的分泌表达

目的：用巴氏毕赤酵母表达人源性抗角蛋白单链抗体。方法：从已构建好的质粒p3MH／ScFv中亚克隆目的片段ScFv并插入酵母表达载体p^PIC9K，构建成重组质粒p^PIC9K／ScFv，并测序鉴定。通过电转将重组质粒p^PIC9K／ScFv整合到巴氏毕赤酵母菌GS115的染色体上。经G418筛选得到高拷贝转化子及Mut表型鉴定后，用含0．5％甲醇的培养基诱导其分泌表达。结果：通过6天的诱导，该系统成功表达了抗角蛋白单链抗体，Western blot实验证实表达产物具有特异性。结论：获得了真核表达的抗角蛋白单链抗体，为其应用研究打下了基础。     

监测急性脑血管意外患者血清甲状腺素水平的临床意义

目的探讨急性脑血管意外患者血清甲状腺素变化及临床意义,方法应用放射免疫测定法(RIA)测定52例急性脑血管意外患者及60例健康成人血清甲状腺激素水平,结果用t检验统计。结果52例急性脑血管意外患者血清TT3,FT3显著下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),病死组17例,TT3、FT3下降更为显著。与正常组对照有非常显著性差异(P<0.001),与成活组比较亦有显著差异(P<0.05),观察组TT4、FT4有所下降,与正常对照组比较无显著差异(P>0.05),病死组TT4、FT4与正常组对照有显著性差异(P<0.05)。急性脑血管意外患者TT3、FT3的降低与疾病的严重程度正相关,当TT4、FT4下降和TT3、FT3极度低下时,预后不良且死亡率高。结论监测急性脑血管意外患者的血清甲状腺激素水平,可做为临床判断病情轻重及预后的一项重要参考指标。     

社会能力评定量表的编制及信效度检验

目的：编制社会能力评定量表并检测其信度和效度。方法：在全国五大行政区用社会能力评定量表评估1605例正常人(男性814名，女性791名)，分析量表的信效度。结果：全量表的Cronbach's α系数为0．88-0．92，三个分量表的d系数为0．81～0．88；量表的分半信度为0．76～0．87，量表的重测信度为0．67～0．86，量表评分者信度为0．91～0．97，表明量表具有较好的内部一致性和稳定性；各条目与总分的相关系数0．49-0．80，分量表与总分的相关系数为0．76～0.89，通过因子分析，证实了量表的结构效度；全量表总分和职业能力得分与被试单位提供的实际社会能力评分呈高度相关，与韦氏智商呈中低度相关。结论：量表编制符合心理测量学要求，具有良好的信度和效度。     

突变人CD59基因在真核细胞中的表达活性

目的构建突变人CD59的真核表达系统,检测突变人CD59蛋白糖化前后抗补体活性,探讨CD59在糖尿病血管并发症病理机制中的重要作用,为人类糖尿病血管增殖症的发病机理提供依据。方法应用阳离子脂质体法将含有突变人CD59的重组pALTER质粒与pCDNA共转染入CHO细胞;G418筛选出阳性克隆,流式细胞术进一步筛选出高表达克隆;免疫组化、免疫荧光、Western-blot、ELISA验证CD59的表达;BCECF释放试验研究糖化前后突变人CD59抗补体活性。结果成功构建突变人CD59的真核细胞表达系统;糖化后较糖化前突变人CD59转染CHO细胞BCECF释放率明显升高。结论高糖使CD59活性下降,可能导致或加速糖尿病血管并发症的发生。     

人外周血自然杀伤T细胞体外扩增及其功能的初步研究

为了建立人自然杀伤T(NKT)细胞在体外扩增的方法并对其功能进行初步的研究,通过不同的方法从人外周血单个核细胞(MNC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24+/Vβ11+NKT细胞,并采用流式细胞术测定NKT细胞中IL-4、IFN-γ、TNF-α分泌水平。采用CD4/CD8免疫磁珠去除CD4+和CD8+细胞进一步纯化NKT细胞,并用DIOC18染色及流式细胞术测定NKT细胞杀伤活性。α半乳糖神经酰胺(α-Galcer)和IL-2可以使NKT细胞在体外扩增。扩增19d后,TCRVα24+/Vβ11+细胞比率最高上升到25.5%±7.2%,NKT细胞最大扩增倍数达到(1.51±0.91)×104倍。体外扩增的NKT细胞高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56。在CD3单克隆抗体和IL-2刺激下,TCRVβ11+细胞分泌IL-4和IFN-γ的细胞比例均高于TCRVβ11-细胞(P<0.05)。去除CD4+和CD8+细胞后NKT细胞含量上升到80%。NKT细胞对肿瘤细胞株U937和HL60以及树突状细胞具有较强的细胞毒效应。NKT细胞可以通过α-Galcer直接从人外周血MNC扩增获得,从而简化实验步骤。     

过量维生素A酸对金黄地鼠胚胎神经管维生素A酸受体α、β基因表达的影响

目的：探讨过量维生素A酸(RA)对金黄地鼠胚胎神经管RA受体α和RA受体β基因表达的影响。方法：采用RT-PCR方法,半定量分析金黄地鼠神经管正常发生及RA致神经管畸形过程中RA受体α和RA受体βmRNA表达水平的变化。结果：过量RA可使RA受体α和RA受体βmRNA在金黄地鼠神经管中的表达水平呈现短时下降,而后又大幅上升的变化。结论：过量RA引起的RA受体α和RA受体βmRNA表达水平的变化与RA致金黄地鼠神经管畸形相关。     

中国七大城市早产儿脑损伤发生率的多中心调查报告(英文)

目的中华医学会儿科学分会新生儿学组组织国内7个城市的10家三级甲等医院进行了早产儿脑损伤多中心协作研究。该文报告其中早产儿脑损伤发生率的调查结果。方法 2005年1月至2006年8月期间,各参加单位对所有胎龄<37周的早产儿在生后3 d内常规进行初次床边头颅B超检查,以后每隔3～7 d复查1次,直至出院。结果 9单位总脑室内出血(IVH)发生率和重度IVH发生率分别为10.8%(406/3 768)和2.4%(92/3 768),其中I级IVH 22.6%(92/406),Ⅱ级54.7%(222/406),Ⅲ级17.2%(70/406),Ⅳ级5.4%(22/406);10医院中总脑室周围白质软化(PVL)发生率和囊性PVL发生率分别为2.3%(112/4 933)和0.3%(16/4 933),其中Ⅰ级PVL 85.7%(96/112),Ⅱ级12.5%(14/112),Ⅲ级1.8%(2/112)。发生重度IVH的可能高危因素为阴道分娩(OR=1.874,95%CI=1.172～2.997,P<0.01)、围产期窒息(OR=1.598,95%CI=1.077～2.372,P<0.05)、机械呼吸(OR=3.98...     

胎膜早破绒毛膜羊膜炎患者胎膜组织中HMGB1和MMP-9的表达及意义

目的:研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胎膜早破(PROM组)合并绒毛膜羊膜炎(CAM)患者胎膜组织中的表达及意义。方法:选取足月PROM剖宫产患者30例为研究组,足月择期剖宫产妊娠妇女30例为对照组。取胎膜组织行病理检查,按病理结果再分为合并和非合并CAM组。采取免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测PROM组和对照组孕妇胎膜组织中HMGB1、MMP-9蛋白及mRNA表达。结果:PROM组的CAM发生率为56.67%(17/30),高于对照组[13.33%(4/30)],差异有统计学意义(P0.05)。PROM组和对照组中,合并CAM者胎膜组织中HMGB1、MMP-9蛋白和mRNA相对表达量均高于未合并CAM者,差异有统计学意义(P0.05)。PROM组胎膜组织中HMGB1和MMP-9 mRNA表达呈正相关(r=0.439,P0.05)。结论:HMGB1和MMP-9表达可能与PROM发生、发展相关。