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目的:探讨含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在骨髓瘤细胞中的过表达及其机制。方法:RT-PCR和Western blotting 检测RPMI8226和U266细胞IQGAP1表达;使用不同的寡核苷酸序列构建沉默人IQGAP1的shRNA质粒(clone 1、clone 2、clone 3和clone 4)、转染RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blotting检测其IQGAP1表达;Western blotting检测RPMI8226-shIQGAP1组 (clone 1)、RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、Akt、p-AKT、STAT3和p-STAT3水平,免疫共沉淀确定IQGAP1和ERK的关系。结果:IQGAP1在RPMI8226和U266骨髓瘤细胞株中过表达,使用shRNA表达质粒沉默RPMI8226细胞IQGAP1 后,IQGAP1表达减少,在有或无血管内皮生长因子(VEGF)/白细胞介素6(IL-6)作用下检测RPMI8226-shIQGAP1组 (clone 1) 细胞增殖明显下降。进一步检测3组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、AKT、p-AKT、STAT3和p-STAT3蛋白水平,与RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组相比,RPMI8226-shIQGAP1组ERK1/2磷酸化水平下降70.2%,免疫共沉淀法明确在RPMI8226细胞中IQGAP1和ERK存在相互作用。结论:IQGAP1在骨髓瘤细胞中的过表达可能与MAPK途径的ERK相互作用有关。 相似文献
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白藜芦醇对淋巴瘤细胞增殖及细胞因子分泌的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
马泳泳 《浙江中医药大学学报》2008,32(6)
[目的]探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对淋巴瘤Raji细胞增殖及细胞因子白介素-8(IL-8)和血管内皮细胞生成因子(VEGF)基因表达和分泌的影响.[方法]用不同浓度白藜芦醇处理Raji细胞48h后,用MTT法检测细胞增殖指数,用ELISA法检测IL-8和VEGF蛋白含量,用逆转录/聚合酶链反应(RT/PCR)检测IL-8和VEGF mRNA表达情况.[结果]白藜芦醇体外对Raji细胞无增殖抑制作用,不同浓度白藜芦醇作用Raji细胞48h后,白藜芦醇1组、2组和3组IL-8、细胞上清液VEGF蛋白含量,均显著低于对照组(P<0.05);IL-8、VEGF mRNA表达相对强度,均显著低于对照组(P<0.05),且随浓度增加而减弱.[结论]白藜芦醇体外对Raji细胞无增殖抑制作用,但可抑制IL-8 和VEGF的分泌及mRNA的表达,这可能是白藜芦醇抗肿瘤血管生成的重要机制. 相似文献