4型黏蛋白及表皮生长因子受体在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的 研究4型黏蛋白(MUC4)及表皮生长因子受体(EGFR)在膀胱尿路上皮癌中的表达,探讨其相互关系及临床病理意义.方法 采用免疫组织化学法检测MUC4及EGFR蛋白在78例膀胱尿路上皮癌和13例膀胱正常黏膜中的表达.结果 膀胱尿路上皮癌组织中MUC4蛋白阳性率为52.6％,显著高于膀胱正常黏膜组织(0 0％)(P＜0.05).EGFR蛋白在膀胱尿路上皮癌组织中阳性率为60.3％,显著高于膀胱正常黏膜组织(0.0％)(P＜0.05).结论 MUC4及EGFR蛋白表达增高与膀胱尿路上皮癌的临床分期、病理分级,复发密切相关.MUC4与EGFR呈正相关.联合检测MUC4和EGFR有助于膀胱尿路上皮癌的早期诊断及判断患者预后.     

七氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制研究

目的：了解非受体酪氨酸激酶 c-Src 在七氟醚预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用。方法将健康雄性 Wistar 大鼠50只,随机分为5组（n＝10）,假手术组（Ⅰ组）、缺血再灌注组（Ⅱ组）、七氟醚预处理组（Ⅲ组）、七氟醚预处理加二甲基亚砜（DMSO）组（Ⅳ组）和七氟醚预处理加 c-Src 特异性抑制剂 SU6656组（Ⅴ组）。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组于再灌注前1 min 进行七氟醚后处理;Ⅴ组于再灌注前5 min 静脉注射 SU6656;Ⅳ组给予等容量 DMSO。再灌注120 min 后,采集动脉血样,检测血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）的活性。取小鼠心脏并分离左心室,计算心肌梗死面积;检测 Src、磷酸化 Src（p-Src）、心肌过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的表达水平。结果与Ⅰ组比较,其余4组血清 CK-MB、LDH 的活性、心肌梗死面积、心肌 p-Src／Src、CAT、SOD 升高（P ＜0．05）;与Ⅲ、Ⅳ组比较,Ⅱ、Ⅴ组血清 CK-MB、LDH 的活性、心肌梗死体积、CAT 升高,SOD 活性降低,同时心肌 p-Src／Src 显著下降（P ＜0．05）。结论c-Src-活性氧（ROS）信号通路可能介导了七氟醚预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤作用。     

白细胞介素-6对胰腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长及Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路的影响

目的 探讨白细胞介素（IL)-6促进胰腺癌MPC-83细胞荷瘤小鼠移植瘤生长的Caspase-3/Bax/Bcl-2凋亡信号通路的作用机制。 方法 取40只小鼠,腋部皮下注射小鼠胰腺癌MPC-83细胞制作胰腺癌荷瘤动物模型,随机分为空白对照组（A组）,腹腔注射PBS 10 ml/kg;IL-6组（B组）,腹腔注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg;IL-6受体阻断剂组（C组）,腹腔注射托珠单克隆抗体100 mg/kg;IL-6+IL-6受体阻断剂组（D组）,腹腔注射托珠单抗 100 mg/kg,30 min后再注射重组小鼠IL-6 200 μg/kg,每组10只。各组小鼠每3 d给药1次,持续至28 d。于实验开始后第0、7、14、21及28天,记录瘤体积变化;采用ELISA法检测瘤组织生存素（survivin）和细胞色素C（Cyt-C）含量;采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blotting法检测瘤组织Caspase-3、Bax及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。结果 与A组比较,B组荷瘤小鼠瘤组织第7、14、21及28天生长较快,瘤组织生存素含量升高,细胞色素C含量下降,Caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平上调（P<0.05,P<0.01）;与B组比较,C组与D组荷瘤小鼠瘤组织第14、21及28天生长缓慢,瘤组织生存素含量降低,细胞色素C含量升高,Caspase-3、Bax mRNA和蛋白表达水平升高,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）;C组与D组比较,各检测指标差异无显著性（P> 0.05）。结论 IL-6促进胰腺癌生长增殖的作用与其调控Caspase-3/Bax/Bcl-2细胞凋亡信号通路相关。     

IL-6调控TLR4/NF-κB炎症信号促进人胰腺癌细胞增殖的实验研究

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖的影响及其调控Toll受体4(TLR4)/核转录因子kappaB(NF-κB)信号通路作用机制。方法 MTT法检测IL-6对BxPC-3细胞增殖的影响并计算增殖率;台盼蓝拒染法检测IL-6对BxPC-3细胞生长的影响并绘制生长曲线;克隆形成实验观察IL-6对BxPC-3细胞克隆形成的影响并计算克隆形成率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测IL-6对BxPC-3细胞TLR4、髓样化因子(MyD88)、NF-κB、白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平的影响;Westen blot法检测IL-6对BxPC-3细胞TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1β及TNF-α蛋白表达水平的影响。结果与阴性对照组比较,IL-6可促进BxPC-3胰腺癌细胞生长,升高细胞增值率和克隆形成率;IL-6干预后,BxPC-3胰腺癌细胞TLR4、MyD88、NF-κB、IL-1β和TNF-α等因子的mRNA和蛋白表达水平均明显上调。结论 IL-6可促进BxPC-3胰腺癌细胞生长增殖,其机制可能与上调TLR4/NF-κB信号通路有关。     

胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞分化和凋亡的影响

目的 观察胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化和凋亡作用.方法 用不同浓度的1-(3,4-二氧亚甲基)苯甲亚氨基-2-吡啶-3-基-5-甲硫基-[1,2,4]三唑(LH-36)与BEL-7402细胞体外培养.MTT法检测细胞增殖和LH-36对细胞增殖的抑制作用.用Hoechst 33258荧光染色观察细胞凋亡变化.免疫细胞化学检测细胞内激活型Caspase-3表达.反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞甲胎蛋白(α-FP)和白蛋白(Alb)mRNA表达,以了解细胞分化状态.蛋白质免疫印迹分析P53的表达.可见光法测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力.结果 LH-36在0.1 μmol/L～10 μmol/L的浓度范围能抑制细胞增殖,且抑制率随浓度和时间的增加而增高.0.1 μmol/L和1.0 μmol/L的LH-36使细胞α-FP mRNA表达量明显下降,Alb表达量增高,P53的蛋白表达明显增加,SOD活性升高(P＜0.01),而CAT活性降低,差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05).药物浓度在10 μmol/L作用48 h,BEL-7402细胞皱缩,呈现凋亡各期改变,Caspase-3阳性细胞明显增加,细胞凋亡率显著高于对照组(P＜0.05).结论 胡椒醛缩氨基均三唑席夫碱对人肝癌BEL-7402细胞具有抗增殖、促分化和凋亡作用,作用可能与过氧化氢的氧化损伤作用有关.