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11.
12.
目的:构建分泌性小鼠β-防御素2(MBD2)真核表达质粒,转染L1210淋巴细胞白血病细胞,对转染细胞进行功能及特性鉴定。方法:RT-PCR法从小鼠皮肤细胞克隆MBD2成熟部分基因片段,用overlap PCR法将小鼠Igκ信号肽与MBD2成熟片段相连,构建MBD2分泌表达载体。经测序证实序列正确后,脂质体法转染L1210细胞,筛选稳定表达细胞株。RT-PCR、Western blot检测瘤苗MBD2的表达。Transwell法检测瘤苗分泌的MBD2对不成熟树突状细胞(iDC)迁移的作用。细胞计数、PI染色及FACS观察转染MBD2对肿瘤细胞增殖、细胞周期及MHCⅠ类(H-2K^d,H-2D^d)、Ⅱ类(I-A^d)分子及共刺激分子(CD80、CD860)表达的影响。结果:转染MBD2基因的肿瘤细胞表达并分泌MBD2,并以剂量依赖方式趋化iDC,表明具有生物学活性。转染MBD2基因对肿瘤细胞生长增殖、细胞周期及细胞表面MHC分子及共刺激分子表达无明显影响。结论:本实验成功构建了MBD2白血病细胞疫苗,为进一步体内评价抗白血病效果奠定了基础。 相似文献
14.
人类疱疹病毒6型与造血紊乱初探 总被引:4,自引:2,他引:2
为探讨人类疤疹病毒6型(HHV-6)感染与造血紊乱的关系及对造血细胞移植受体的影响,用PCR法检测132例血液病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)HHV-6 DNA特异序列,另对15例移植受体移植前后BMMNC HHV-6 DNA及血清抗HHV-6抗体滴度进行比较,并作病毒分离。结果表明,各组血液病患者的HHV-6 DNA阳性率不同。原发性血小板减少性紫癜(ITP)组和急性白血病(AL)组的阳性率明显高于其它组;移植后受体HHV-6 DNA阳性率及血清抗体滴度均较移植前升高,4例延迟植活患者中3例出现血清抗体滴度增长,1例移植失败患者移植后检出HHV-6 DNA,并出现脑炎症状。结论提示,HHV-6感染可能与ITP和AL相关。造血细胞移植受体移植后出现HHV-6的活化或感染可能与部分患者延迟植活有关。 相似文献
16.
为探索并比较人类外周血单个核细胞(PBMC)IL-23、IL-12亚基表达的诱导剂和调控模式,分离正常人PBMC、单核细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群,检测各种细菌、细菌产物、细胞因子、丝裂原对上述细胞IL-23和IL-12亚基表达的诱导作用,半定量RT-PCR方法测定各亚基的mRNA表达水平。结果显示,未经刺激的PBMC可表达IL-23p19和IL-12p35mRNA;脂多糖(LPS)和金黄色葡萄球菌(SAC)可上调PBMCIL-23和IL-12各亚基的表达;γ干扰素(IFN-γ)预处理后予LPS刺激可使单核细胞IL-23p19、IL-12p35和IL-12p40表达高于LPS直接作用的表达水平。植物血凝素(PHA)可促进CD4+、CD8+T细胞IL-23p19表达,而对IL-12p35、p40表达无调节作用。本文结果提示,IL-23的两个亚基的表达都处于紧密调控之下,易受各类诱导剂调节;人类外周血细胞IL-23p19的表达和调控模式与IL-12p35既有相似之处又存在不同点。 相似文献
17.
趋化因子与肿瘤和炎症 总被引:1,自引:0,他引:1
趋化因子是指一组相对分子质量为8×104 ̄12×104,至少存在2个保守的Cys,能使白细胞向炎症部位迁移的因子,可调节白细胞的功能和运动方向,不仅在免疫系统的反应中起重要作用,而且参与调节T,B淋巴细胞的发育和血管新生。趋化因子与炎症和肿瘤密切相关。现已开发各种新型治疗分子,包括趋化因子及其衍生物、受体拮抗剂、受体的阻断抗体以及与受体有关的低分子量复合物,用于多种疾病的治疗。 相似文献
18.
19.
目的 探索白细胞介素(IL)-24 delE5对人类白血病细胞系K562的抑制作用。方法 用TPA诱导白血病细胞系U937和HL-60向单核-巨噬细胞分化后,检测mda-7/IL-24及其选择性剪接体IL-24 delE5的表达。构建IL-24 delE5真核表达载体,稳定转染K562细胞。通过MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Annexin-Ⅴ/PI检测及动物实验,观察IL-24 delE5对K562细胞增殖、集落形成、细胞周期、凋亡及体内致瘤性的影响;同时与mda-7/IL-24进行比较。结果 在TPA诱导分化的U937和HL-60细胞中发现IL-24 delE5的表达。稳定转染IL-24 delE5的K562增殖及集落形成明显下降,与空载体相比,G0/G1期细胞比例由(24.46±3.99)%增至(42.69±3.04)%,细胞周期阻滞于G0/G1期,体内实验证实K562细胞移植瘤生长明显被抑制。与mda-7/IL-24相比,上述各实验结果差异均无统计学意义。结论 IL-24 delE5与mda-7/IL-24一样对人类白血病细胞系K562具有明显的体内外抑制作用,该作用可能与IL-24 delE5所引起细胞周期G0/G1期阻滞有关。 相似文献
20.
白细胞突触:结构、功能和意义 总被引:1,自引:1,他引:0
神经突触是神经网络的关键性结构,免疫网络主要是无形网络。近年来的研究进展表明,免疫细胞在有些功能状态下形成白细胞突触,称为免疫学突触(immunological synapse,IS),构成局部暂时性结构网络,实际上是动态结构,有人将其分为synapse和kinapse。研究表明,不同白细胞的IS不尽相同,炎症细胞和白血病细胞的IS有其特点。在有些病毒感染的白细胞中也观察到类似结构,称为病毒学突触(virological synapse,VS),是病毒在细胞间传播的一种机制,它不仅提高了传染效率,还逃逸了抗体的中和作用,导致持续性感染。最近法国学者报道了呈花瓣样的多聚突触(polysynapses),即花瓣样的多个细胞膜纳米管道,病毒能从一个感染细胞同时传播给多个邻近细胞。本文作者显示了早期工作中观察到的感染EB病毒的人白血病细胞系J6-2中的类似结构。作者结合工作中的体会评述白细胞突触的结构和功能,探讨其生物学意义。 相似文献