15例纯红细胞再生障碍性贫血临床分析

目的:探讨纯红细胞再生障碍性贫血的病因、发病机制、诊断和治疗.方法:采用回顾性病例分析方法.结果:纯红细胞再生障碍性贫血有多种病因;骨髓象有诊断意义;激素、免疫抑制剂、大剂量球蛋白、EPO、环孢菌素A治疗均有效.结论:针对纯红细胞再生障碍性贫血的不同病因采用多种方法治疗可取得满意疗效.     

转hGM-CSF基因骨髓基质细胞在体外扩散盒中的表达

目的　研究转人粒 巨噬细胞集落刺激因子 (hGM CSF)基因骨髓基质细胞系在体外扩散盒中的表达。方法　采用阳离子脂质体介导法将构建好的真核表达载体pIRESIneo hGM CSF导入人骨髓基质细胞系HFCL ,建立转基因人骨髓基质细胞系HFCL hGM CSF ,用Southernblot和Northernblot方法分别检测其基因组DNA整合和mRNA转录 ,并将其移入体外扩散盒中 ,用ELISA法检测其蛋白表达量。结果　Southernblot和Northernblot分析表明hGM CSF基因已整合到HFCL细胞基因组DNA中 ,在mRNA水平上可以检测到其表达 ,移入扩散盒的HFCL hGM CSF细胞稳定分泌hGM CSF ,量为 5 1 6± 0 5ng 10 6 细胞 天。结论　转hGM CSF基因骨髓基质细胞可以在体外扩散盒中持续稳定表达hGM CSF ,为进一步体内实验奠定了基础     

CCR10通过NRF2抑制结直肠癌细胞铁死亡的机制研究

目的 探究C-C趋化因子受体10(C-C chemokine receptor 10,CCR10)在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中对细胞增殖和铁死亡的影响,并探究其影响铁死亡的机制。方法 在GEPIA数据库(Gene Expression Profiling Interactive Analysis)共表达分析CCR10与铁死亡关键基因的相关性。构建慢病毒介导的CCR10过表达(CCR10-OE)、敲除(CCR10-KO)及其阴性对照(NC)稳转HCT116细胞,采用细胞活力(CCK8)、克隆形成和裸鼠成瘤实验检测CCR10过表达或敲除后的细胞增殖。利用CCK8法、流式细胞术检测细胞铁死亡和脂质过氧化,评估CCR10过表达及敲除后细胞对铁死亡诱导剂erastin和rsl3的耐受。利用WB检测CCR10过表达和敲除后铁死亡关键蛋白质的表达。在CCR10敲除细胞株瞬时转染核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,NRF2)质粒,鉴定铁死亡表型以及其下游分子溶质载体家族7成员11(solute Carrier Family 7 Membe...     

上皮间质细胞转化的分子机制及其在肿瘤转移中的作用

上皮细胞间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)是具有极性的上皮细胞转换成为具有移行能力的间质细胞并获得侵袭和迁移能力的过程,它存在于人体多个生理和病理过程中。EMT与肿瘤细胞的侵袭和转移有着密切的关系。E钙黏蛋白（Ecadherin,Ecad）用于维持正常细胞间连接的稳定性,其表达水平与EMT的发生以及肿瘤的侵袭能力呈负相关,是EMT的关键分子。转录因子如锌指蛋白Snaill、SIP1等可下调Ecad的表达而促进EMT;Slug、Twist也可诱导EMT的发生。多种生长因子如HGF、TGFβ等可通过细胞内多个不同信号转导途径调控EMT的发生,促进肿瘤的转移。细胞外基质（ECM）对EMT的发生起着重要的作用,整合素介导的细胞与基质之间的黏附作用改变可引起EMT,基质金属蛋白酶（MMPs）通过影响ECM诱导EMT的发生。不同的MicroRNA如microRNA 10b或microRNA 200对EMT发生有促进或抑制作用。发生EMT的肿瘤细胞可获得某些类似于干细胞的能力如自我更新等,而胚胎干细胞在分化时伴有类似EMT过程的分子生物学事件。EMT的分子生物学过程、信号转导通路还有待更深入地研究完善。     

低剂量辐射对造血系统兴奋效应的研究

目的 探讨低剂量辐射对造血系统的兴奋效应。方法 采用深部X线对小鼠进行低剂量辐射,甲基纤维素半固体培养造血祖细胞,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中GM－CSF、IL－3水平变化,脾组织切片原位杂交、脾细胞RNA狭缝杂交、Northern blot检测GM－CSF、G－CSF和IL－3的mRNA表达水平。结果 ①受照后小鼠造血细胞体外培养中CFU－GM和BFU－E数量明显增多;②血清中GM－CSF水平升高;③GM－CSF、G－CSF的转录升高。结论 低剂量辐射对造血系统有兴奋效应,这种兴奋效应可能与造血刺激因子升高有关。     

阳离子脂质体介导hGM-CSF真核表达载体在骨髓基质细胞系中的表达

目的 构建人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ,并观察其在人骨髓基质细胞系ＨＦＣＬ中的表达,方法 用ＤＮＡ重组技术,将ｈＧＭ－ＣＳＦ ｃＤＮＡ插入到真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ的多砍隆位点中,获得阳性重组载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ。以脂质体介导法转染人骨髓基质细胞系ＨＦＣＬ细胞筛选获得的阳性细胞用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分别检测其基因组ＤＮＡ整合和ｍＲＮＡ转录,用ＥＬＩＳＡ及依赖株（ＴＦ－１）法检测其蛋白表达量和活性。结果 酶切鉴定表明成功地构建了重组真核表达载体ｐＩＲＥＳ１ｎｅｏ／ｈＧＭ－ＣＳＦ;ｈＧＭ－ＣＳＦ基因已整合到ＨＦＣＬ细胞基因组ＤＮＡ中,在ｍＲＮＡ和蛋白质水平上均可检测到其表达;ｈＧＭ－ＣＳＦ的表