抑肽酶对大鼠实验性慢性肝损伤的治疗作用

目的:研究抑肽酶对大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法: Wistar大鼠60只,随机分为6组(每组10只)：第Ⅰ组为正常对照组;第Ⅱ～Ⅵ组采用皮下注射四氯化碳（CCl₄）12周建立慢性肝损伤实验动物模型后,进行不同处置,即第Ⅱ组为模型组、第Ⅲ组为抑肽酶小剂量（2万kIU•kg^-1）组、第Ⅳ组为抑肽酶中剂量（4万kIU•kg^-1）组、第Ⅴ组为抑肽酶大剂量（8万kIU•kg^-1）组、第Ⅵ组为阳性对照促肝细胞生长素（100 mg•kg^-1）组。第8周后第Ⅲ～Ⅵ组分别用抑肽酶和肝细胞生长素每日腹腔注射1次,连续4周后测定各组肝损伤大鼠血清丙氨酸氨基转换酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、唾液酸（SA）活性及肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量,观察光镜下肝组织的病理改变。结果:模型组与正常对照组比较,血清ALT、AST活性和肝组织Hyp显著升高,血清SA、ALB和A/G比值显著降低。抑肽酶各组与模型组比较,血清ALT、AST活性及Hyp含量降低,血清SA、ALB和A/G比值明显增高。肝组织病理切片观察显示,抑肽酶能显著减轻由CCl₄所致肝细胞脂肪变性及纤维组织增生。结论：抑肽酶对大鼠慢性肝损伤具有明显的治疗作用。     

口服抑肽酶对大鼠急性肝损伤的保护作用

目的：探讨口服抑肽酶对实验大鼠肝损伤的保护作用。方法：Wistar大鼠60只,采用四氯化碳（CCl₄）法建立急性肝损伤实验动物模型,随机分为对照组、模型组及抑肽酶大、中、小剂量组和阳性对照组(甘利欣组),观察抑肽酶对实验 鼠血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、一氧化氮(NO)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量、肝重量系数以及肝组织病理改变的影响。结果：模型组与正常对照组比较,血清ALT及AST均显著增高(P<0.001)、NO明显增高(P<0.01)、肝重量系数明显增加(P<0.001)、GSH明显降低（P<0.01）。抑肽酶小、中、大剂量组与模型组比较：ALT及AST值均显著降低(P<0.001),GSH值均明显增高 (P<0.01),与甘利欣组相近;NO值均明显降低(P<0.05),且低于甘利欣组;肝重量系数均明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。鼠肝组织的病理性损伤改变程度,抑肽酶大、中、小剂量组及模型组依次加重。结论：口服抑肽酶对大鼠急性肝损伤具有明显的保护作用。     

刺五加皂苷的抗辐射损伤作用

目的：探讨刺五加皂苷 (ASS)对X射线照射小鼠抗辐射损伤的作用。 方法：将小鼠50只随机均分为阴性对照组、阳性对照组及低、中、高剂量ASS实验组。测定小鼠脾指数、胸腺指数、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,并测定淋巴细胞转化率和外周血白细胞数。 结果：3个ASS实验组小鼠各项指标与对照组比较,脾指数差异无显著性（P>0.05）,胸腺指数、淋巴细胞刺激指数、血清SOD和GSH-Px活性差异均有显著性（P<0.05）。 结论：ASS对辐射小鼠具有一定的抗辐射和抗氧化作用。     

重组牛胰蛋白酶抑制剂对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的观察重组牛胰蛋白酶抑制剂(rBPTI)对大鼠慢性肝损伤的保护作用。方法大鼠98只,随机分成7组,分别为正常对照组、模型组、rBPTI3个剂量组(20,40和80MU.kg-1)、抑肽酶组(80MU.kg-1)和促肝细胞生长素组(100mg.kg-1)。除正常对照组外,其余各组皮下注射四氯化碳制备慢性肝损伤模型。8周后每天ip给药,给药4周后测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性、白蛋白(Alb)含量、白蛋白/球蛋白(A/G)比值、唾液酸(SA)含量及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,并进行组织病理学检测。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量明显升高,血清Alb含量和A/G比值明显降低。与模型组比较,rBPTI各剂量组大鼠血清GPT和GOT活性、SA含量及肝组织Hyp含量降低,血清Alb含量和A/G比值明显增高。肝组织病理观察显示,rBPTI明显减轻由四氯化碳所致肝细胞脂肪变性及纤维组织增生等病理改变。结论rBPTI对四氯化碳诱导的大鼠慢性肝损伤具有保护作用和抗纤维化作用,在所观察的剂量范围内作用效果与抑肽酶相当。     

软骨型蛋白多糖的提纯及生物化学特点的研究

本文分别用Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析和氯化铯平衡密度梯度离心法从仔猪软骨提纯了软骨型蛋白多糖单体，它在ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－２Ｂ柱层析上显示了大分子的特点（Ｋａｖ＝０．２２）．能够与透明质酸结合形成巨大分子的聚合体。提纯的核心蛋白在ＳＤＳ电泳上显示出单一的银染色区带，分子量为４６０ｋＤａ，与抗人蛋白多糖单克隆抗体（３－Ｂ－３）呈强阳性反应．离子交换层析法简便、快速、经济更适合于以蛋白多糖损害为主要特点的软骨疾病的研究。     

rhKD/APP对实验性大鼠急性胰腺炎合并肺损伤的影响

目的 观察rhKD/APP对实验性大鼠急性胰腺炎合并肺损伤的影响.方法 采用3.5 %的牛磺胆酸钠0.1 ml/100 g逆行注入大鼠胰胆管内诱导急性胰腺炎合并肺损伤模型,观察rhKD/APP治疗急性胰腺炎合并肺损伤大鼠肺干湿重比值、支气管肺泡灌洗液蛋白含量(BLAF)、大鼠肺组织髓过氧化物酶(MPO)以及肺组织匀浆肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化.结果 rhKD/APP治疗组可明显降低大鼠肺干湿重比值、BLAF、MPO以及 TNF-α的含量.结论 rhKD/APP可显著减轻胰腺炎症反应,对大鼠急性胰腺炎合并肺损伤具有治疗作用.     

人胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定

目的研究人胚胎神经干细胞的培养条件及体外分化情况。方法将新鲜分离的胚胎(自然流产胎儿4~6周,经志愿者知情同意)无菌条件下取海马,采用无血清培养基进行培养,原代培养的细胞增殖成神经干细胞球,倒置显微镜观察细胞的形态学,并用免疫荧光方法对神经干细胞进行自我更新能力(Brd U)的鉴定及特异性抗原Nestin的检测。结果培养5~7d的神经干细胞球呈桑葚样悬浮生长,呈明显的Brd U阳性反应,其具有增殖能力;神经干细胞表达了Nestin抗原阳性。结论人胚胎神经干细胞具有神经干细胞的基本特征,可进一步用于基础及临床研究。     

人脐带间充质干细胞的分离培养及成脂成骨分化

目的建立小胎龄人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的分离和培养方法,探讨hUCMSCs的成脂、成骨分化潜能。方法采用Ⅱ型胶原酶和透明质酸酶消化法从胎龄12～18w的流产胎儿脐带中分离hUCMSCs;流式细胞仪检测其免疫表型;应用不同因子诱导hUCMSCs向脂肪细胞及成骨细胞分化并进行鉴定。结果体外培养的hUCMSCs呈长梭形,细胞形态均一;表达CD29、CD44、CD73、CD105、CD166;不表达CD34、CD45、CD40、CD40L、CD80、CD86、HLA-DR;油红O、茜素红染色及RT-PCR证实hUCMSCs可分化为脂肪细胞和成骨细胞。结论建立了小胎龄hUCMSCs分离培养方法,证实其具有成脂、成骨分化潜能,有望成为细胞治疗及组织工程更为理想的种子细胞。     

选择性刺激犬房室结脂肪垫的电生理实验研究

目的 选择性刺激犬心脏房室结(AVN)脂肪垫,观察其对心脏窦房结(sAN)功能及房颤(AF)时房室传导的影响.方法 取蒙古犬36只,经开胸直接刺激AVN脂肪垫.刺激能量由O mA逐级增高直至AF诱发.测量不同能量状态下窦性周期长度(SCL)及AF诱发阈值.AF诱发后,继续逐级增加刺激电流及脉宽,分别记录诱发AF的连续lO个RR间期.结果 AF诱发阈值为(4.1±1.2)mA.无1例犬(0%)在直接AVN脂肪垫刺激下延长SCL>10%.逐级递增的AVN脂肪垫刺激导致AF的RR间期进行性延长.结论 直接AVN脂肪垫刺激诱发AF并有效延长AF时的房室传导,通过介入方法 定向消融AVN脂肪垫有望成为有效控制AF心室率的新方法 .     

Hymenistatin-1及其类似物的免疫活性研究

目的 研究固相合成的Hymenistatin-1(以下简称HS-1,序列为cyclo-(-Pze-Pro- Tyr-Val-Pro-Leu-Ile-Ile)]及其四种statine类似物的免疫活性.方法 通过DNFB诱导小鼠迟发型超敏反应试验、体外淋巴细胞增殖试验和小鼠碳廓清试验,研究HS-1及其类似物对小鼠迟发型超敏反应、体外淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬能力的影响.结果 HS-1及其四种类似物对淋巴细胞增殖都表现出抑制作用,且修饰后的HS-1类似物在低浓度时表现出比阳性对照和天然HS-1更强的免疫抑制作用;A3 HS1低浓度组(50 μg/ml)对淋巴细胞增殖的抑制作用最强,抑制率为28.4%.用statine修饰的HS-1类似物A2 HS1和A4 HS1能够抑制巨噬细胞的吞噬功能,但不能对小鼠迟发型超敏反应有很好的抑制作用.通过胸腺指数和肿胀度的比较可以得出,阳性对照在高浓度的时候对迟发型超敏反应有抑制作用,HS-1类似物的低浓度组比高浓度对小鼠迟发型超敏反应的抑制作用强.其中A1 HS1和A3 HS1的低浓度组已经表现出比天然HS-1组和阳性对照组强的免疫抑制活性.结论 HS-1类似物A2 HS1和A4 HS1对巨噬细胞吞噬能力的抑制作用和对淋巴细胞增殖的抑制作用比阳性对照组和天然HS-1组强;HS-1类似物A1 HS1和A3 HS1对小鼠迟发型超敏反应的抑制作用和对淋巴细胞增殖的抑制作用比阳性对照组和天然HS-1组强.由此可见,通过对天然HS-1进行statine修饰,能增强其免疫抑制作用.