rhKD/APP对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的：观察rhKD/APP对四氯化碳（CCl₄）所致急性肝损伤的保护作用，探讨其可能的作用机制。方法：采用CCl₄建立小鼠急性肝损伤模型，取小鼠60只随机分为6组(每组10只)，分别设为空白对照组、模型组、阳性药对照组及rhKD/APP小中大剂量（4.5、9.0、18.0 mg•kg^-1）组。测定实验小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）及肝组织丙二醛（MDA）、肝重系数并观察肝脏组织病理学变化。结果： rhKD/APP小、中、大剂量组血清ALT、AST活性和肝组织中MDA低于模型组（P<0.05或P<0.01）；肝脏组织病理切片显示，模型组有炎细胞浸润,肝细胞坏死，与模型组相比，rhKD/APP小、中、大剂量组肝组织损伤程度较轻，且随着rhKD/APP剂量增加肝组织损伤程度逐渐减轻。结论：rhKD/APP对CCl₄所致急性肝损伤小鼠具有明显的保护作用。     

牛脑垂体提取物是角朊细胞无血清培养的重要添加成分

目的 :探讨牛脑垂体提取物对维持角朊细胞生长的重要性。方法 :采用无血清培养技术 ,以添加各种生物因子的 MCDB1 53培养基为培养液 ,在体外培养成人包皮角朊细胞。结果 :在本实验条件下 ,牛脑垂体提取物是维持皮肤表皮角朊细胞增殖不可缺少的添加成分。结论 :牛脑垂体提取物是角朊细胞无血清培养的重要添加成分     

固相合成法制备环肽Hymenistatin-1及其含statine的类似物

目的研究固相合成法制备Hymenistatin-1[HS-1,序列为cyclo-(-Pro-Pro-Tyr-Val-Pro-Leu-Ile-Ile-)]及其statine类似物的工艺步骤和影响因素。方法采用Fmoc或Boc保护α-氨基,以HBTU/NMM为缩合剂进行直链肽接肽反应、以BOP/HOBt/DIEA为缩合剂进行环化固相合成HS-1及其类似物。用色谱仪和质谱仪对合成的环肽及其杂聚肽类似物进行纯化鉴定。结果多肽合成收率可达65%,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)柱对合成的多肽进行纯化后纯度均达到90%以上,通过基质辅助激光解吸附电离飞行质谱仪(MALDI-MS)检测所合成的环肽及环肽类似物的分子质量与理论分子质量相符。结论成功合成出了较高纯度的目标多肽化合物。     

摇椅形弓丝配合前牙区垂直牵引矫治开(牙合)时牙齿应力分布与位移趋势的研究

目的:研究"摇椅形"弓丝配合前牙区垂直牵引矫治开袷时下颌牙齿的应力分布及移动趋势.方法:建立与人体物理性能相似的1:1的全牙颌光弹模型,对模型进行临床实际应用的"摇椅形"弓丝配合前牙区垂直牵引力加载,将下颌实验模型单颗牙进行三维方向冻结切片,利用三维切力差法,计算单颗牙牙槽骨各点应力值,从而描述单颗牙牙周组织应力分布规律及运动趋势.结果:在"摇椅形"弓丝配合前牙区垂直牵引作用下,17运动趋势为整体远中移动,冠受远中向力大于根,整体龈向压低,轻微颊向移动;(6)整体远中移动,龈向压低,冠向远中舌向倾斜;(5)的移动趋势为整体远中移动,(牙合)向伸长,冠向远中旋转,近中颊向远中舌向扭转;(3)运动趋势为(牙合)向伸长,冠唇向根舌向倾斜;(2)的运动趋势为(牙合)向伸长,冠唇向根舌向转矩.结论:"摇椅形"弓丝配合前牙区垂直牵引作用于全牙弓牙齿的移动趋势符合开(牙合)的矫治机制.     

红外热像扫描技术在组织工程皮肤移植修复中的应用

目的　探索红外热像扫描技术在组织工程皮肤移植修复中应用的可能性。方法　在组织工程皮肤对大面积皮肤缺损动物 (裸鼠 )进行移植修复的不同时间 ,应用红外热像扫描仪对移植修复区进行动态观察。结果　在移植术后第 7天 ,热像图上移植区与正常皮肤温差明显 (>0 7℃ ) ;在移植的第 14天 ,移植区与周围正常皮肤的温差变小(<0 3℃ ) ;在移植的第 2 1天 ,移植区与正常皮肤无明显区别 ,温度几乎没有差别 (<0 1℃ )。预示着移植区的血运、代谢情况与正常皮肤差别不大 ,移植区有毛细血管长入、营养供应充足。结论　在应用组织工程皮肤进行皮肤缺损的移植修复时 ,可以应用红外热像扫描技术对移植修复的效果进行动态观察 ,监测毛细血管的生成情况、血运状况以及移植的组织工程皮肤与宿主皮肤的融合情况。     

组织工程化软骨修复软骨损伤的研究进展

人类在整个生命历程中 ,机体的组织和器官由于外伤或病变受损后 ,难以恢复其原有的结构和功能 ,研究者一直不断努力寻求解决办法。从 2 0世纪 6 0年代初首次应用体外培养的软骨细胞修复关节软骨缺损[1 ] ,到 70年代Green[2 ] 将分离 ,培养的软骨细胞与脱钙骨支架材料联合培养 ,观察软骨形成 ,实验虽未成功 ,但是却为未来软骨组织工程奠定了理论基础。利用组织工程学方法和手段修复组织缺损是一种全新的治疗模式 ,具有广阔的应用前景 ,是目前医学界研究的热点。人们希望利用组织工程技术制成各种组织、器官 ,来替代因各种疾病造成的组织结构…     

重组人uPA_(17)-KPI在毕赤酵母中的表达及鉴定

目的研究重组人尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)-Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂(Kunitz protease inhibitor,KPI)融合蛋白在毕赤酵母中分泌表达的条件。方法利用已构建的KPI-pPICZαC毕赤酵母表达载体,人工合成uPA17,利用基因重组技术构建uPA17-KPI-pPICZαC表达载体。电转化毕赤酵母菌X-33,PCR法筛选阳性克隆,分别用SDS-PAGE、胰蛋白酶抑制实验分析鉴定发酵产物。结果酶切鉴定和DNA测序证实,成功构建uPA17-KPI-pPICZαC表达载体。SDS-PAGE分析在相对分子质量约8 800处出现目的条带,摇瓶水平诱导表达120 h表达量达到高峰,含量可达50 mg/L。表达产物具有胰蛋白酶抑制活性。结论本研究在毕赤酵母中成功表达uPA17-KPI融合蛋白。     

重组人β-淀粉样蛋白1-42大规模发酵及纯化工艺

目的:在毕赤酵母（Pichia pastoris）中高效表达人β-淀粉样蛋白1-42(hAβ_1-42),用80 L的发酵罐大量制备hAβ_1-42。方法: 在成功构建表达载体pPICZα-hAβ_1-42并电转化至毕赤酵母X-33的基础上,筛选高表达hAβ_1-42工程菌,对发酵液的pH值、溶解氧、甲醇流加速度以及诱导表达的时间等发酵条件进行系统优化,通过阳离子交换层析和反向疏水层析对其进行纯化,实现其大规模制备。结果: 筛选出的高表达工程菌采用80 L发酵罐甲醇诱导补料批式发酵,在pH 4.0、溶解氧浓度20 %～30 %、罐内压力为10 psi、甲醇诱导48 h时产量最高可达150 mg•L^-1;纯化的hAβ_1-42经SDS-PAGE分析显示单一区带,相对分子质量约为4 200。结论:构建、筛选出高效表达hAβ_1-42的毕赤酵母工程菌,并建立稳定的发酵和纯化制备工艺。     

应用改性聚乳酸构建复层组织工程皮肤的可行性研究

目的：以改性聚乳酸为细胞外基质网架,探索利用其构建复层组织工程皮肤的可行性。方法：取出生24 h以内的Wistar大鼠背部皮肤,以Dispase-trypsin双酶消化分离培养表皮角质形成细胞;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养真皮成纤维细胞。采用盐析法制备机械性能得到部分改进的聚乳酸多孔泡沫支架,向支架接种真皮成纤维细胞（密度为3.0×10⁵cell•mL^-1）和表皮角质形成细胞（密度为5.0×10⁵cell•mL^-1）,体外培养1周,构建复层组织工程皮肤,并取培养的皮肤进行切片检测。结果：复层组织工程皮肤在结构上与正常皮肤相似,具有真皮、表皮双层结构。改性聚乳酸网架上有双层细胞生长,生长的细胞与网架接触,并且在其表面形成较为明显而连续的细胞层。结论：双醛淀粉作为良好的增柔剂在改善聚乳酸网架机械性能的同时,也使其具有良好的细胞相容性,不影响细胞的生长增殖和代谢,可以进一步用作组织工程皮肤的支架材料。