槲皮素通过自噬途径减轻高糖致体外培养RSC96细胞的损伤

目的观察槲皮素对高浓度葡萄糖培养的大鼠雪旺细胞系细胞(rat Schwann cell line,RSC96)自噬、增殖活性和凋亡的影响。方法高浓度葡萄糖(125 mmol/L)及槲皮素(25μmol/L)离体培养RSC96细胞,作用72小时后,噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖活性,原位末端标记法[terminal dexynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL]评价凋亡,Western blot法检测caspase-9活化的P35亚基、caspase-3活化的P20亚基及自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达。结果高糖抑制离体培养的RSC96细胞的增殖活性,吸光度(optical density,OD)值降低,凋亡率增加,P35亚基、P20亚基蛋白表达上调(P0.05,P0.01);槲皮素能够增加高糖培养RSC96细胞的增殖活性,下调P35、P20蛋白表达及凋亡率(P0.05,P0.01)。然而当自噬被抑制后,槲皮素上述保护作用则被削弱,细胞死亡增多(P0.01)。结论槲皮素通过增加自噬以促进RSC96细胞的增殖、减少凋亡,从而减轻高浓葡萄糖的损伤。     

情绪因素及抗焦虑药物对肿瘤休眠及复发的影响

目的 :研究情绪因素以及通过药物控制情绪因素对肿瘤休眠状态的维持与打破及后续复发转移的影响。 方法 :利用肿瘤休眠模型,附加单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪的小鼠慢性情绪应激模型。通过灌胃给予常规抗焦虑药物地西泮来控制焦虑情绪,探讨情绪及抗焦虑药物对肿瘤休眠状态的维持及防止肿瘤复发的作用。实验分为五组,分别为休眠对照组、单纯给药组、诱导焦虑组、焦虑给药组和外伤刺激组。以500个小鼠乳腺癌细胞Ca761-03接种于小鼠左腿肌肉。休眠对照组、单纯给药组和外伤刺激组常规饲养,其中外伤刺激组在第1个月末切除右爪作为外伤刺激,单纯给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。诱导焦虑组和焦虑给药组以单笼饲养和不定时空瓶刺激联合诱导小鼠产生焦虑、愤怒等应激情绪,其中焦虑给药组每天定量灌胃给予地西泮溶液。连续观察2个月,观察小鼠焦虑情况,观察肿瘤休眠打破(肿瘤发生)及肿瘤转移发生情况。 结果 :各组肿瘤休眠率分别为70%、100%、60%、90%和40%。各组成瘤率分别为30%、0、40%、10%和60%。各组的肺转移率分别为20%、0、30%、0和60%。 结论 :本项研究结果证实,长期负面情绪会促进肿瘤休眠状态的打破,加速肿瘤的生长、复发及转移。抗焦虑药物可以明显减少焦虑行为,并有利于肿瘤休眠状态的维持,减少肿瘤的复发。     

金龙胶囊对局部肿瘤切除前后不同时间施药抑制术后复发及转移的研究

目的：研究JLC对小鼠宫颈癌（U14）移植后,手术切除局部原发瘤之前、后用药,观察抑制肿瘤术后局部复发和术后转移的作用。方法：以小鼠宫颈癌（U14）双向高转移模型为对象,以JLC在肿瘤切除前5天和后5天两组用药进行对比,又以相同分组的环磷酰胺化疗进行了比较观察。结果：1）环磷酰胺对U14的局部复发及复发转移均有明显抑制作用,术前组抑瘤率为93．7％,转移抑制率为55．7％;术后组抑瘤率为35．1％,转移抑制率为34．1％;术前组肺转移抑制率为100．0％。2）JLC对U14的局部复发和复发转移均有明显抑制作用,术前组抑瘤率为67．3％;转移抑制率为47．6％;术后组抑瘤率为73．0％,转移抑制率为42．3％;术前组肺转移抑制率为86．5％。无论术前或术后组肺转移抑制率均高于淋巴结转移。结论：金龙胶囊对术后复发转移抑制作用,术前用药优于术后用药。局部抑瘤率均在60．0％以上,转移抑制率均在40．0％以上。因此JLC在手术前和手术后给药均可抑制局部复发和复发转移。提示手术时合并使用JLC是较为理想的治疗方案。     

人喉癌细胞系的建立及生物学特性研究

目的建立2种人喉癌细胞系,确定其生物学特性。方法取喉癌患者原发病灶和淋巴结转移灶组织,用组织块培养法进行原代培养。20代后观察细胞形态,绘制生长曲线图,用免疫组织化学染色方法鉴定细胞分子特征,测定细胞周期和软琼脂集落形成率。结果建立了2个人喉癌细胞系,分别命名为CCC-HLS和CCC-HLSLN,已传至第25代。CCC-HLS细胞形态以梭形为主;CCC-HLSLN细胞呈多形性,少数细胞有细长的突起,末端有分叉。2种细胞角蛋白(CK)免疫组织化学染色均为阳性。2种细胞传代后,2~4 d为对数生长期,第7天开始死亡,CCC-HLS细胞倍增时间为33.9 h,CCC-HLSLN细胞倍增时间为30 h。细胞周期分析表明CCC-HLS细胞G0/G1期为54.7%,G2/M期为5.2%,S期为40.1%。CCC-HLSLN细胞G0/G1期为50.6%,G2/M期为27.4%,S期为22.0%。CCC-HLS细胞软琼脂集落形成率为1.23%,CCC-HLSLN软琼脂集落形成率为2.58%。结论建立的2种人喉癌细胞系可用于喉癌的基础研究。     

乳腺增生病ER和PR表达的临床与实验研究

目的通过ER和PR表达探索乳腺增生病的癌变倾向及其预防，阐明乳癣合剂的作用机理。方法用手术切除的乳腺增生病（85例）和乳腺癌（65例）患者手术标本，及以苯甲酸雌二醇造成豚鼠乳腺增生病模型的乳腺组织标本；并对豚鼠乳腺增生病模型灌服天冬素片水溶液及乳癣合剂，观察人与豚鼠乳腺组织病理变化并检测ER和PR表达。结果临床乳腺增生病患者ER和PR阳性表达率37．6％，乳腺癌为67．7％，P〈0．001；乳癣合剂降低ER和PR阳性表达，小剂量组优于大剂量组和天冬素片组，P〈0．05。结论降低乳腺增生病发病率和ER、PR阳性表达率是乳腺癌的二级预防措施。     

猪脂肪干细胞与脱细胞真皮基质的生物相容性

背景：脱细胞真皮基质已广泛应用于器官或组织缺损的修补。 目的：观察猪脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质的相容性。 方法：酶消化法原代培养猪脂肪源性干细胞,利用流式细胞仪和多向诱导分化方法鉴定脂肪干细胞,将其与脱细胞真皮基质共培养。 结果与结论：实验成功培养出猪脂肪源性干细胞,流式细胞仪检测结果显示阳性表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45;在诱导培养基条件下,可向脂肪细胞、成骨细胞分化。苏木精-伊红染色及扫描电镜发现干细胞能在脱细胞真皮基质表面黏附生长。脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质具有良好的相容性,将两者体外复合培养后,有望将复合物植入体内进行缺损组织、器官的修复。     

无张力疝修补术治疗复发性腹股沟疝26例

我院自1999年6月至2003年8月采用聚丙烯锥形填充物及成型补片对26例复发性疝进行无张力疝修补术,取得满意效果,现报告如下。     

分化抑制蛋白Id-1 在胃癌分化中的表达及作用

目的:研究Id- 1 蛋白与肿瘤分化程度的关系,选取临床病理分化程度诊断明确的胃癌组织芯片作为主要研究对象,确定Id- 1 蛋白在胃癌组织中的分布状况及该蛋白与胃癌病理学分级（分化程度）的相关性;利用体外实验模型,通过诱导分化,改变胃癌细胞的分化状态,进一步研究Id- 1 蛋白在体外是否随着胃癌细胞分化程度的改变而改变,确定Id- 1 蛋白在胃癌分化中的作用。方法:通过免疫组织化学法检测Id- 1 蛋白、Ki-67抗原在胃癌组织芯片表达;通过形态观察、细胞化学染色（PAS ）观察丁酸钠（sodium butyrate,NaB）对人低分化胃癌细胞MGC803 诱导分化,利用细胞免疫化学染色、Western-blot研究诱导分化前后Id- 1蛋白表达的改变。结果:胃癌组织中Id- 1 蛋白检测总阳性率为88.8% ,Id- 1 蛋白在高、中、低分化癌中阳性率分别为77.4% 、97.0% 、92.0% ,有显著性差异（P<0.001）;Ki-67抗原的总阳性表达率达78.7% ,在高、中、低分化癌中阳性率分别为64.5% 、90.9% 、80.0% ,有显著性差异（P<0.001）;组间比较Id- 1 蛋白与Ki-67抗原表达呈正相关。NaB 在体外作用于MGC803 细胞后细胞体积变大,核浆比变小,伸展状态好,细胞中PAS 阳性物质显著减少,出现分化状态改善的现象,分化后的MGC803 细胞内Id- 1 蛋白表达减少。结论:Id- 1 蛋白表达与胃癌分化程度呈负相关,可作为辅助诊断胃癌分化的标记物。      

Jinmaitong(筋脉通)Alleviates the Diabetic Peripheral Neuropathy by Inducing Autophagy

Objective:To observe the deregulation of autophagy in diabetic peripheral neuropathy(DPN) and investigate whether Jinmaitong(筋脉通i,JMT) alleviates DPN by inducing autophagy.Methods:DPN models were established by streptozotocin-induced diabetic rats and Schwann cells(SCs) cultured in high glucose medium.The pathological morphology was observed by the improved Bielschowsky's nerve fiber axonal staining and the Luxol fast blue-neutral red myelin staining.The ultrastructure was observed by the transmission electron microscopy.Beclinl level was detected by immunohistochemistry and Western blot.The proliferation of cultured SCs was detected by methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide.Results:Diabetic peripheral nerve tissues demonstrated pathological morphology and reduced autophagic structure,accompanied with down-regulation of Beclinl.JMT apparently alleviated the pathological morphology change and increased the autophagy[in vivo,Beclinl integral optical density(IOD) value of the control group 86.6±17.7,DM 43.9±8.8,JMT 73.3 ±17.8,P0.01 or P0.05,in vitro Beclinl IOD value of the glucose group 0.4710.25 vs the control group 0.88 ±0.29,P0.05].Consequently,inhibition of autophagy by 3-methyladenine resulted in a time- and concentrationdependent decrease of the proliferation of SCs(P0.05,P0.01).Conclusions:Down-regulation of autophagy in SCs might contribute to the pathogenesis of DPN.JMT alleviates diabetic peripheral nerve injury at least in part by inducing autophagy.     

某印刷企业噪声作业人员护听器防护效果影响因素分析

选择某印刷企业4个工种37名接触噪声作业人员进行问卷调查,结合接噪人员护听器个人适合性检验、噪声检测及职业健康检查结果评估护听器个人声衰减值(PAR)和改善措施的有效性;通过调查对护听器的选择、佩戴方法、使用和维护、护听器的使用障碍等影响个人防护效果的关键因素进行识别。对防护不足的员工及时干预,帮助员工正确佩戴护听器,提高防护效果。