犬左右心室肌细胞L型钙电流不均一性的研究

目的测定犬左、右心室3层心肌细胞上参与离子流平衡的内向电流L型钙电流(ICa.L)的特性。方法经酶解分离获得犬左、右心室外膜下细胞、M细胞和内膜下细胞,应用全细胞膜片钳技术,记录并比较不同部位心肌细胞的ICa.L,分析电流-电压曲线。结果ICa.L的峰值电流密度(pA/pF)在右心室外膜下细胞、M细胞和内膜下细胞分别为:-4.896±1.907(n=31),-3.406±0.904(n=37)和-2.788±0.756(n=33),心外膜下心肌细胞与M细胞比较,差异有统计学意义(P<0.05);在左心室分别为:-3.824±1.201(n=18),-4.854±1.485(n=20)和-2.988±1.082(n=17),3者之间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ICa.L的峰值电流密度在右心室心外膜下心肌细胞大于左心室(P<0.05),而右心室M细胞小于左心室(P<0.01),心内膜下心肌细胞左、右心室之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论ICa.L在犬左、右心室肌的不同细胞(外膜下心肌细胞、M细胞、内膜下心肌细胞)存在不均一性,导致右心室跨室壁的电不均一性较左心室明显。     

STAT3介导G-CSF对原代APL细胞增殖的调控作用

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导后,白细胞介素(IL)-1β和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对原代急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞增殖调控的信号传导因子。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定原代APL细胞培养上清中IL-1β和G-CSF水平的变化,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定IL-1β和G-CSF mRNA表达水平。Western blot测定信号转导和转录激活因子(STAT)1α和STAT3表达水平变化。结果ATRA治疗后APL患者外周血白细胞明显升高,平均12天达到高峰,并且以中晚幼粒细胞为主。ATRA治疗后7天和高峰期的APL细胞体外培养24h后,IL-1β( P＜0．05)和G-CSF(P＜0．05)分泌水平显著升高。RT-PCR结果表明分泌IL-1β和(或)G-CSF升高的原代APL细胞,IL-1β和(或)G-CSF mRNA表达升高。所有患者原代APL细胞的STAT1α蛋白表达均升高,与IL-1β或G-CSF的表达无关。但STAT3的升高却与G-CSF表达和分泌水平变化相一致。结论ATRA诱导高表达的G-CSF,通过STAT3发挥对原代APL细胞的调节作用。     

STAT3介导G-CSF对原代APL细胞增殖的调控作用

目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导后。白细胞介素（IL）-1β和粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对原代急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞增殖调控的信号传导因子。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定原代APL细胞培养上清中IL-1β和G-CSF水平的变化,逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定IL-1β和G-CSF mRNA表达水平。Western blot测定信号转导和转录激活因子（STAT）1α和STAT3表达水平变化。结果ATRA治疗后APL患者外周血白细胞明显升高,平均12天达到高峰,并且以中晚幼粒细胞为主。ATRA治疗后7天和高峰期的APL细胞体外培养24h后。IL-1β（P〈0．05）和G-CSF（P〈0．05）分泌水平显著升高。RT-PCR结果表明分泌IL-1β和（或）G-CSF升高的原代APL细胞。IL-1β和（或）G-CSF mRNA表达升高。所有患者原代APL细胞的STAT1α蛋白表达均升高,与IL-1β或G-CSF的表达无关。但STAT3的升高却与G-CSF表达和分泌水平变化相一致。结论ATRA诱导高表达的G-CSF,通过STAT3发挥对原代APL细胞的调节作用。     

鼠胚胎干细胞早期分化来源的心肌细胞同种异体移植后的电生理特性

目的 探讨小鼠胚胎干细胞早期分化来源的心肌细胞进行同种异体移植后的电生理特性.方法 首先通过电转染构建a-MHC-EGFP-ESc系[将心肌细胞特异的OL-MHC启动子与表达基因--绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合,构建成真核表达载体],悬滴法诱导胚胎干细胞分化,在分化早期(7+4)d利用流式细胞仪筛选带绿色荧光的心肌细胞,将纯化的心肌细胞(5×106个/ml)移植到小鼠心室壁,对照组注入等体积培养基,移植前3 d开始应用环孢素A(静脉注射,5 mg·kg-1·d-1)和泼尼松龙(静脉注射,2.5 mg·kg-1·d-1)抑制免疫排斥反应.移植后2周分离两侧颈迷走神经行电刺激抑制窦房结与房室结,记录刺激前后的体表心电图,然后分别行免疫荧光显像和膜片钳研究.结果 刺激迷走神经前,移植组和对照组均呈正常的窦性心律,两组无室性心律失常的发生;刺激迷走神经后,两组动物均出现异位的心室起搏心律,细胞移植组与对照组心室频率无差异.移植区冰冻切片免疫荧光分析可见EGFP标记的移植细胞具有肌钙蛋白I(cTnI)表达,说明分化细胞移植后仍具有心肌特性,且移植细胞与宿主心肌细胞间有连接蛋白43的表达,表明移植细胞与宿主心肌细胞间形成电偶联通道.膜片钳分析,绿色荧光细胞移植前后其具有起搏细胞动作电位的比例分别为(85.1%vs 1 1.4%,P＜0.05),该类细胞在移植前后的起搏电流强度有所增强((11.2±2.4)pA/pF vs(15.5±1.9)pA/pF,P＜0.05].移植区分离的绿色荧光细胞中48%具有心室肌动作电位.结论 胚胎干细胞早期分化来源的心肌细胞在体移植后能进一步分化为成熟的心室肌细胞及起搏细胞.     

异丙肾上腺素对犬右心室肌细胞L型钙电流不均一性的影响

目的测定犬右心室三层心肌细胞上参与离子流平衡的内向电流L型钙电流(ICa.L)的特性,并研究其对异丙肾上腺素的反应。方法经酶解分离获得犬右心室外膜下细胞、M细胞和内膜下细胞,应用全细胞膜片钳技术,记录并比较不同部位心肌细胞的ICa.L,分析使用异丙肾上腺素前后电流-电压曲线的差异。结果ICa.L的峰值电流密度(pA/pF)在右心室外膜下细胞、M细胞和内膜下细胞分别为-4.868±1.362(n=20),-3.594±0.544(n=20)和-2.874±0.547(n=20),差异有统计学意义(F=33.493,P<0.05)。使用0.5μmol/L异丙肾上腺素后,右心室外膜下心肌细胞ICa.L的峰值电流密度由-4.832±1.127(n=11)增至-22.348±4.057(P<0.01),M细胞由-3.726±1.051(n=11)增至-17.992±4.159(P<0.01),心内膜下心肌细胞用药前后变化(-2.714±0.879,-2.987±1.012)差异无统计学意义(P>0.05)。结论ICa.L在犬右心室肌的不同细胞(外膜下心肌细胞、M细胞、内膜下心肌细胞)存在不均一性,β-肾上腺能激动剂可以减小右心室外膜下心肌细胞和M细胞动作电位复极1期末离子流的外向转移。     

糖尿病性视网膜病变患者房水血管内皮生长因子的检测

目的:探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy,DRP)发生、发展中的作用。方法:采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)法测定房水VEGF浓度。结果:老年性白内障合并2型糖尿病组房水VEGF浓度明显高于老年性白内障组。结论:VEGF参与DRP的发生、发展。     

乌鲁木齐市区居民1991～1992年恶性肿瘤死亡率水平分析

乌鲁木齐市区居民１９９１～１９９２年恶性肿瘤死亡率为６５．７５／１０万，标化死亡率为８６．３５／１０万。其中男性恶性肿瘤死亡率为８３．３４／１０万，标化死亡率为６７．７７／１０万，女性恶性肿瘤死亡率为４６．７５／１０万，标化率为５２．４６／１０万。死因顺位中，位居前５位的恶性肿瘤在男性依次为肺癌、肝癌、胃癌、食道癌和白血病；在女性依次为肺癌、胃癌、肝癌、食道癌和乳腺癌。不同民族中，汉族恶性肿瘤死亡率高于维吾尔族。     

急性白血病凋亡基因及细胞DNA检测的临床意义

目的 :研究急性白血病促、抑凋亡基因表达、白血病细胞DNA含量及三指标间相关性。方法 :用流式细胞术检测 51例急性白血病及 2 0例良性血液患者CD95、bcl 2表达率、白血病细胞DNA含量。结果 :急性白血病CD95表达率降低且与完全缓解率无关。bcl 2表达率、白血病细胞DNA异倍体率增高且化疗后完全缓解率低。CD95、bcl 2、白血病细胞DNA指数 (DI)间无相关性 ,三指标表达均异常相关性分析 ,CD95与bcl 2呈负相关 ,r =- 0 .80 11,P <0 .0 5,CD95与DI无相关性r =0 .50 12 ,P >0 .0 5,bcl 2与DI呈正相关 ,r =0 .790 2 ,P <0 .0 5。结论 :急性白血病CD95、bcl 2表达率 ,白血病细胞DNA检测可进一步研究急性白血病发病机制 ,指导临床合理用药及预测预后