中药神经再生素作用于背根神经节细胞过程中基因的表达变化

目的 探讨中药神经再生素(NRF)作用的分子生物学机制。方法 采用半定量PCR方法，观察和比较NRF组、NGF组和空白对照组中生长相关蛋白43(GAP-43)、低分子量神经丝蛋白(NF-L)、翻译延伸因子2A3-2(EF-Ts，RRAJ5161)和锌指样蛋白DDP2(F196315)基因水平的表达变化。结果 在NRF作用于离体培养的DRG细胞过程中，GAP-43、NF-L、2A3-2和DDP2基因表达在不同时间呈不同程度的上调。结论 NRF促神经生长的作用与NGF相似，可作用于蛋白翻译水平，促进神经细胞的生长；作用于细胞骨架蛋白水平，维持神经细胞的形态和神经细胞正常生理活动；作用于神经细胞特异的蛋白水平，具有维持细胞生存及促进神经细胞突起生长的作用；还可以作用于反式因子调控水平，影响相关基因的表达，促进神经元存活和神经突起延伸。     

大鼠损伤性周围神经组织cDNA文库的构建

为克隆神经损伤及再生过程中出现的诱向因子和营养因子基因，以ＳＤ大鼠手术损伤的坐骨神经组织为材料，提取ｍＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ，以λｇｔ１１为载体，构建了一个ｃＤＮＡ文库。     

胶质细胞系源性神经营养因子分子生物学的研究新进展

胶质细胞系源性神经营养因子属于转化生长因子β家族，由两条同源多肽链构成。ｃＤＮＡ长度有５８１ｂｐ和６５９ｂｐ两种，在神经组织和非神经组织中均有表达。ＧＤＮＦ对中脑多巴胺神经元和外周感觉，运动神经元的发育、存活和再生有较高的促进作用。     

红景天苷对谷氨酸损伤海马神经元的保护作用

目的观察红景天苷(salidroside)对谷氨酸(Glu)损伤海马神经元的保护作用。方法胚鼠原代培养海马神经元,与不同浓度的红景天苷(10、20和40mg/L)共同孵育24h,加入125μmol/L谷氨酸损伤海马神经元15min。采用MTT法检测细胞活性;生化法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;膜联蛋白-V-FITC(annexin V-FITC)和碘化吡啶(PI)双标染色以及Hoechst染色观察细胞凋亡情况;激光共焦显微镜观察细胞内Ca2 的变化。结果红景天苷可明显改善谷氨酸损伤后细胞的活性,抑制谷氨酸损伤后培养液中LDH的活力,降低谷氨酸引起的细胞凋亡率,降低谷氨酸损伤后细胞内的Ca2 浓度。结论红景天苷可明显拮抗谷氨酸损伤海马神经元的作用,其机制可能与抑制谷氨酸引起的Ca2 内流有关。     

生长相关蛋白在损伤坐骨神经中的表达

目的：研究大鼠周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白的表达。方法：取正常SD大鼠坐骨神经和离断损伤后不同时间近侧端和远侧端神经组织，采用Anti-GAP－43抗体以Western blot方法检测GAP－43的表达变化。结果：NC膜上43kDa位置出现阳性反应条带，在正常坐骨神经中反应微弱，损伤后明显加强，随损伤时间延长，神经近侧端的反应无明显改变，神经元侧端的反应逐渐加强，以第3周为最强，之后逐渐减弱，结论：GAP－43在正常坐骨神经中低表达，损伤后近侧端与远侧端表达均增加，远侧端的表达增加以第3周为高峰。     

周围神经损伤与再生的分子生物学研究

在当今世界医学领域内 ,周围神经损伤与再生仍然是科学研究的热点之一 ,近十多年来 ,周围神经损伤后再生的修复研究十分活跃。其原因在于无论在战争时期还是在和平环境中 ,周围神经损伤后伤残症状严重 ,痊愈的可能性较小 ,直接影响患者的生活质量。本文就以下三个方面的研究进展略作介绍。1　神经再生过程中的诱向生长在神经发育过程中 ,当生长的轴突到达周围的靶器官时 ,这些靶器官就开始产生神经营养因子。在神经损伤时轴突横断处新生的轴芽开始向远端生长 ,神经损伤后的再生依赖于损伤侧的雪旺细胞所提供的神经营养因子。神经营养因子通…     

Tropic 1808基因在大肠杆菌中的表达

目的;在大肠杆菌宿主系统中表达Ｔｒｏｐｉｃ１８０８基因编码的蛋白。方法：用ＰＣＲ方法从质粒中扩增出Ｔｒｏｐｉｃ１８０８ｃＤＮＡ开放阅读框架片段,并重组人表达载体ｐＥＴ－２１ａ中,转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）,用ＩＰＴＧ诱导Ｔｒｏｐｉｃ１８０８融合蛋白的表达,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,表达蛋白条带转至ＰＶＤＦ膜进行氨基酸序列分析,结果：构建了ｐＥＴ－２１ａ－１８０８重组质粒,外源性Ｔｒｏｐｉｃ１８０８基     

基因芯片技术进展及应用

1　基因芯片概述随着人类基因组计划 (Human Genome Project)即全部核苷酸测序的即将完成 ,人类基因组研究的重心逐渐进入后基因组时代 (Postgenome Era)向基因的功能及基因的多样性倾斜 [1 ,2 ] 。通过对个体在不同生长发育阶段或不同生理状态下大量基因表达的平行分析 ,研究相应基因在生物体内的功能 ,阐明不同层次多基因协同作用的机理 ,进而在人类重大疾病如癌症、心血管疾病的发病机理、诊断治疗、药物开发等方面的研究发挥巨大的作用。它将大大推动人类结构基因组及功能基因组的各项基因组研究计划。基因芯片的工作原理与经典的核酸…     

脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞影响的观察

目的：了解脑组织提取液对体外培养雪旺氏细胞的影响。方法：酶消化法培养的雪旺氏细胞分烃 加脑组织提取液组,对细胞形态和数量进行观察比较。结果：体外培养的五氏细胞在加入脑组织提取液后细胞增殖加快,并出现细胞突出起细长（为对照组的２－３倍）,互相延伸等形态学改变。结论：雪旺氏细胞在接触脑组织提取液后,表现为细胞增殖加快,突起生长明显的功能活跃状态。     

RNA酶保护试验检测基因表达的研究

目的：探讨应用RNA酶保护试验（RNAse Protction Assay,RPA)进行基因表达的检测法。方法：应用RPA检测了SD大鼠脑组织,肝脏组织,外周神经组织中一氧化氮合酶（NOS）三种同分异构体一神经型NOS（nNOS),内皮型NOS（eNOS),诱导型NOS（iNOS)以及看家基因2,3－二羟基丙醛－3－磷酸脱氢酶（GAPDH）的表达。结果：放射自显影显示出清晰的各具没密度的与预期产物相同大小的杂交信号。结论：RPA具有操作简便,特异性强,灵敏度高,准确度高的特点,是进行基因表达研究的较佳方法。