生物芯片技术及其临床应用进展

生物芯片技术是建立在杂交测序基本理论上的分子生物学技术,其突出特点在于高度平行性、多样性、微型化和自动化,已在医学诊断中显示出了及其广阔的应用价值。目前已在遗传病,肿瘤疾病,爱滋病及其他一些难疑病的诊断中取得了重大突破,且已有用于临床诊断的生物芯片问世,在未来的医学领域和实验室工作中必将发挥越来越重要的作用。     

肝硬化及肝癌p53基因突变的实验研究

目的 :研究肝硬化及肝癌p53基因的突变情况。方法 :选择 80例肝硬化、肝癌标本 ,分别以PCR SSCP法 ,双链DNA序列测定法研究其p53基因外显子的突变情况及突变位点。结果 :62例肝癌标本p53总突变率为 19 4 % ,其中 ,早、中、晚期突变率分别为 10 5%、15 0 %、35 0 % ;18例肝硬化标本p53总突变率为 5 6% ;第 7外显子的突变发生在 2 4 9位密码子第 3号碱基上 ,为G :C→T :A的颠换突变 ;第 8外显子的突变发生在 2 73位密码子第 1号碱基上 ,为C :G→T :A的转换突变。结论 :p53基因突变发生在肝细胞发生形态学改变之初 ,随着肝癌的进展逐渐积累 ,突变率呈上升趋势 ,故p53基因突变很可能是启动癌变过程的重要因素之一。     

定量PCR技术研究进展

定量 PCR技术为研究痕量致病因素准确数值提供了可能 ,借助 PCR的高灵敏度及高特异性 ,建立定量 PCR技术将为我们的研究工作以及判断疾病的发生、发展及预后提供有力的帮助 ,具有广阔的应用前景     

KatG基因的分子生物学与结核分支杆菌异烟肼耐药

ＫａｔＧ基因的分子生物学与结核分支杆菌异烟肼耐药黄海南韩金祥结核分支杆菌（ＭＴＢ）耐药性的出现是困惑结核病治疗的主要原因，许多感染了耐药性ＭＴＢ的患者，因缺乏有效的治疗手段而使病情加重甚至死亡。异烟肼（ＩＮＨ）是抗结核治疗中最主要的药物之一，是多种药...     

HDV核酶对乙型肝炎病毒抑制作用的研究

目的研究HDV核酶在细胞内对乙型肝炎病毒(HBV)复制及其抗原表达的抑制作用。方法1)以HBV前基因组mRNA为靶基因,体外筛选出HDV核酶有效作用位点,构建HDV核酶并进行体外测活;2)分别选用tRNA-Val、U6和hCMV 3种真核启动子,重组构建HDV核酶真核表达载体ptVHRz、pSURz和pcDHRz,分别用3种载体转染HepG2.2.15细胞;3)用点杂交、ELISA和实时荧光定量PCR方法分别检测核酶在细胞内的表达及对HBV的抑制作用。结果在HBV C基因区筛选到一位点,所构建的HDV核酶在体外条件下对该位点能产生有效切割。3种核酶表达载体在细胞内均能高效表达,在转染48 h后,ptVHRz和pcDHRz对HBeAg的表达产生了明显的抑制作用,而对HBsAg没有抑制作用。三者对HBV的复制均未产生明显影响。结论HDV核酶在细胞内对HBV抗原的表达能产生特异性抑制作用,但未能有效抑制HBV的复制,对其原因需进一步深入研究。     

软骨发育不全患者FGFR3突变基因分析简

目曲对9例初步诊断为软骨发育不全患者及其父母进行成纤维生长因子受体3（fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3）基因突变筛查,以判定患者是否为软骨发育不全,同时验证中国人群中FGFR3是否为引起软骨发育不全的致病基因。方法提取9例患者及父母的外周血液DNA,并针对FGFR3外显子10序列设计引物,进行PCR扩增、纯化,并对PCR扩增产物进行毛细管电泳测序。结果9例患者的FGFR3基因第10外显子1138位点均发生了G〉A碱基转换,使得其所编码蛋白FGFR3的第380位氨基酸由甘氨酸（G1y）变为精氨酸（Arg）。结论通过毛细管测序,9例患者均可以确诊为软骨发育不全,同时也验证了在中国人群中FGFR3基因是导致软骨发育不全的致病基因,G1138A为热点突变。     

生物超微弱发光与生物体内活性氧含量的相关性及应用

生物超微弱发光技术在许多领域得到广泛应用,但是其发光机制尚未得到明确解析。研究表明,生物超微弱发光与生物体内活性氧含量及其能量代谢有关。本研究对生物超微弱发光与生物体内活性氧含量的相关性及应用作一综述,主要包括生物体内的活性氧、生物超微弱发光与机体内活性氧含量及能量代谢的联系和生物超微弱发光技术的应用三个部分。总之,生物超微弱发光技术作为一种非破坏性、非侵入性、无标签、相对具有成本效益的新兴技术备受人们关注,体现出了该技术在各个领域应用方面的巨大潜力。     

生物芯片技术在临床病原菌检测中的新进展

生物芯片（Biochip）又称微阵列（Microarrav）技术，是近年来生命科学与微电子学等学科相互交叉发展起来的一门高新技犬，是随着人类基因组计划（HGP）的研究发展应运而生。根据芯片上的探针不同，可分为蛋白芯片和基因芯片，如果芯片上固定的分子是寡核苷酸探针或靶DNA，称为基因芯片，如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片。目前生物芯片技术在临床病原菌、毒力基因、抗药性基因、致病因子的快速检测等方面已取得了突破性进展，显示出诱人的应用前景。     

抗乙型肝炎病毒HDV核酶的研究新进展

乙型肝炎病毒(HBV)是严重威胁人类健康的一种病毒，特别是在我国约有1．2亿人为HBV携带者，占世界的1／3。对已感染HBV者，常用的化学及免疫疗法通常无效。今年来，研究者试图利用反义技术，通过在基因表达水平上抑制HBV的复制，来达到治疗HBV感染的目的。核酶是具有RNA裂解活性的RNA分子，能特异地结合并切割靶RNA分子。HDV核酶是唯一在人体细胞天然具有裂解活性的核酶类型，研究将HDV核酶作为HBV的反义抑制剂可能有着其独特的优势。本文就HDV核酶靶位点的筛选、病毒载体导入系统、靶向性分子的构建等热点问题的研究新进展予以综述。     

大鼠骨髓间充质干细胞原代培养及成骨成脂分化能力染色鉴定

目的：实验旨在建立一套简便有效的骨髓间充质干细胞原代培养、诱导分化及染色方法,观测骨髓间充质干细胞生物学特性,及其成骨、成脂分化潜能,为后续进行骨髓间充质干细胞基因修饰实验做好准备。方法本实验通过全骨髓培养法分离骨髓间充质干细胞,并用诱导分化培养液做定向诱导培养,观察骨髓间充质干细胞向成骨及成脂肪细胞分化过程中的细胞形态学变化,进行成骨成脂细胞染色鉴定,以探讨骨髓间充质干细胞的分离培养方法、生长规律及向成骨成脂细胞分化的条件。结果(1)通过全贴壁法成功进行了骨髓间充质干细胞原代及传代培养并绘制出第4代细胞生长曲线;(2)通过茜素红染色验证了骨髓间充质干细胞的成骨分化能力;(3)通过油红O染色验证骨髓间充质干细胞的成脂分化能力。结论全贴壁法提取的大鼠骨髓间充质干细胞经传代4次左右可达到一定纯度,在一定诱导条件下,经特定染色方法鉴定,可分化为成骨细胞,成脂细胞。