碘致甲状腺肿机理的研究

我院于1984～1986年对碘致甲状腺肿的机理进行了研究,认为碘致甲状腺肿可分为有机碘蓄积使甲状腺滤泡肿大和甲状腺滤泡上皮增生两个阶段。(一)材料与方法实验用莱亨鸡,3.5月龄。分6组:雌、雄对照组各60只;实验组分4组,每组50只。实验组每天分别喂碘化钠5、20、20、80ml、分批处死。检测指标:甲状腺、垂体等器官的病理、电镜观察;血液内T_3、T_4、TSH含量、蛋白结合碘及总碘测定;用高压     

生物芯片技术的原理

生物芯片(biochip)技术是90年代中期以来影响最深远的重大科技进展之一,是融微电子学、生物学、物理学、化学、计算机科学为一体的高度交叉的新技术,具有重大的基础研究价值及明显的产业化前景。该技术可将大量探针同时固定于支持物上,一次可以对大量的生物分子进行检测分析,从而弥补传统核酸印迹杂交(SouthernBlotting和NorthernBlot-ting等)技术复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、低通量等不足。而且,通过设计不同的探针阵列、使用特定的分析方法可使该技术具有多种应用价值,如基因表达谱测定、突变检测、多态性分析、基因组文库作图及杂交测序(SBH)等,为“后基因组计划”时期基因功能的研究及现代医学科学及医学诊断学的发展提供强有力的工具,有助于在新基因的发现、基因诊断、药物筛选、给药个性化等方面取得重大突破,为整个人类社会带来深刻广泛的变革。     

应用cDNA芯片分析与食管鳞癌相关的基因表达

目的：应用cDNA芯片技术研究食管鳞癌的异常基因表达,并对这些基因的功能进行初步分析。方法：选择382个肿瘤相关基因克隆,制备成cDNA芯片,提取食管鳞癌组织以及相应正常食管组织RNA,反转录后标记为cDNA探针,与自行制备的cDNA芯片杂交,经扫描及分析后筛选出两种组织中差异表达基因。结果：发现差异表达基因75个,表达上调基因44个,下调基因31个,包括癌基因、抑癌基因、细胞周期相关蛋白、粘附因子、基质金属蛋白酶、信号传导因子、生长因子及其受体、与细胞代谢相关的酶等。结论：食管鳞癌的发生发展涉及多基因改变,cDNA芯片技术是疾病基因筛选的有效方法。     

SARS病毒刺突蛋白与TAP标签在Vero细胞内的融合表达研究

目的：探讨SARS冠状病毒（SARS-CoV）刺突蛋白（Spike protein,S蛋白）与钙调蛋白结合肽（calmodulin binding peptide,CBP）-蛋白A串连亲和纯化（tandem affinity purification,TAP）标签在Vero细胞内的融合表达及亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础。方法：从质粒pGEM-4Z-S中扩增S片段,在5’端加入Kozak序列,并与TAP标签基因共同插入pcDNA3．1（-）中,构建出真核表达栽体pcDNA3．1-S-TAP（C）。将构建好的质粒瞬时转染Vero细胞,并共感染重组痘苗病毒vTF7-3,用间接免疫荧光及Western-blotting技术检测融合蛋白的表达及亚细胞定位。结果：成功构建出真核表达载体pcD-NA3．1-S-TAP（C）,瞬时转染Vero细胞后S-CBP-蛋白A融合蛋白[S-TAP（C）]得到表达,重组痘苗病毒vTF7-3可有效增强该融合蛋白的表达水平,且检测到S-TAP（C）融合蛋白表达于细胞膜上。结论：S蛋白与TAP标签融合蛋白表达于细胞膜上,且vTF7-3的感染有助于靶蛋白表达水平的提高,可用于S蛋白结合蛋白的筛选。     

骨形态发生蛋白-7及其受体的信号转导

骨形态发生蛋白-7(BMP-7)是BMP家族中的一员,具有高效的骨诱导活性,属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员。BMP-7受体属于转化生长因子β(TGF-β)受体超家族的成员,是一种膜蛋白受体。BMP-7首先与Ⅱ型跨膜丝/苏氨酸激酶受体(ActRⅡ、ⅡB)结合,受体的蛋白激酶活性被激活,再与Ⅰ型受体(主要是ALK2)结合,形成异源二聚体,催化Ⅰ型受体GS区的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化。Ⅰ型受体被激活后,作用于Smad1、Smad5或Smad8的C端SSXS模体,使其磷酸化,再与Smad4形成复合物,进入核内与多种转录因子相互作用发挥基因调控作用。     

Ⅰ型单纯疱疹病毒糖蛋白D成熟肽基因毕赤酵母表达载体的构建及序列分析

目的构建单纯疱疹病毒Ⅰ型包膜糖蛋白D成熟肽基因毕赤酵母表达载体,并对序列进行分析,为进行高抗原性的真核表达重组gD蛋白奠定基础.方法PCR扩增HSV1-gD成熟肽基因,将该段基因克隆于pGEM-T克隆载体,转化鉴定后,与巴斯德毕赤酵母表达载体(pPIC9K)酶切连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选测序确定构建了pPIC9K-gD的真核表达载体,对克隆的序列进行分析,预测表达产物的理化特性及抗原性.结果获得了重组的酵母表达载体pPIC9K-gD.测序结果证实为HSV1-gD成熟肽基因,序列分析其高度保守,预测蛋白分子量为40.52 ku,pI为7.67,包含完整成熟肽分值达1.7的多个抗原决定簇.结论成功构建了HSV1-gD成熟肽基因的毕赤酵母表达载体.     

同时检测优生4项IgM抗体免疫层析试纸条的制备优化

目的:建立一种新型胶体金免疫层析试纸条,用于同时检测优生4项IgM抗体。方法:选择与制备、检测胶体金免疫层析条有关的6个因素进行优化,根据优化结果,制备出同时检测优生4项IgM抗体的免疫层析试纸条。结果:同时检测层析条与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测阴性和阳性血清标本结果对比,发现巨细胞病毒IgM抗体(CMV-IgM)、风疹病毒IgM抗体(RV-IgM)、弓形虫IgM抗体(TOX-IgM)、单纯疱疹病毒IgM抗体(HSV-II-IgM)的总符合率分别为97.9%、100%、100%、100%。结论:4项IgM抗体同时检测层析条具有特异、稳定、操作简便、结果显示直观的优点,有广泛的应用价值。     

城市社区老年人生活质量研究

目的 描述社区老年人生活质量的现状,探讨影响老年人生活质量的相关因素.方法 采用分层整群抽样方法,应用世界卫生组织生活质量量表和社会支持评定量表等对北京市西城区60~80岁老人进行生活质量调查.结果 在2342名社区老人中,91.89%能获得社会支持,6.32%有焦虑情绪,8.58%有抑郁情绪.老年人的生活质量与家庭类型、家人关系、月收入、退休适应、情绪调节、锻炼、焦虑、抑郁和社会支持等因素有关.结论 北京市西城区老年人生活质量及获得的社会支持均较高,生活质量与家庭类型等诸多因素有关.     

蛋白质芯片技术在过敏原特异性IgE检测中的初步应用

目的研制过敏原特异性IgE检测蛋白芯片,对该芯片的检测灵敏性和特异性进行评估。方法将不同浓度的过敏原提取液按一定阵列方式点样到固相载体上,经过固定,封闭,洗涤步骤,加入待检血清,血清中的抗体与基片上的抗原反应,用生物素-亲和素系统使Cy3荧光信号扩增,最后用Scanarray4000激光共聚扫描仪成像。与IVT试剂盒(EIA法)进行了对比检测。结果芯片的灵敏性和特异性较好,血清稀释128倍仍可检测到豚草特异性IgE的存在。芯片法对食入性过敏原的检测效果好,对吸入性过敏原的检测效果比EIA法差。结论过敏原特异性IgE抗体检测芯片,具有样本血清量少,操作简便,价格低廉等优点,具有较强的临床检测使用价值,是未来诊断试剂的发展方向。     

量子中医学、中医学、西医学的异同

中医学基于中国文化背景源于两千多年前的中国,其哲学观为有机、辨证唯物主义,以取象思维为主,方法为思辨;西医学基于古希腊文化背景源于400多年前的欧洲,其哲学观为机械唯物主义,以逻辑思维为主,方法为还原分析;量子中医学是中医现代化研究的成果,用量子理论等现代理论转化中医理论而成,其哲学观为有机、辩证唯物主义,以逻辑思维为主,方法为还原分析、综合。中医学的支撑学科为中国古哲学,西医学的支撑学科为经典物理、化学等近代科学学科,量子中医学的支撑学科为量子理论等现代科学学科。中医学诊断以定性为主,西医学和量子中医学诊断以定量为主。中医学和量子中医学以天然中药、针灸等治疗方法为主,主要是调整机体状态治未病;西医学以化学药物、手术等治疗方法为主,主要是直接控制逆施性对抗疗法,治已病。认识三者之间的差异,寻求三者的共同点和可以交融的契合点,对医学研究、临床诊治及医学的发展具有重要的现实意义。