巨核细胞生成和血管新生在细胞和因子调控水平上的相互联系

长期以来推测血管系统和造血系统存在共同的前体细胞,即血液血管干细胞,最近的研究结果也支持该假说。作为各种血管性调节因子的靶细胞,内皮细胞在血管新生中发挥了重要的作用,同时某些血管性调节因子也调节巨核系细胞生成。通过这篇综述,我们可以了解内皮细胞和巨核细胞的共同抗原和共同调节因子,以及这些调节因子对血管新生和巨核细胞生成的影响,从而探讨两者共同的起源。     

腺病毒介导的PF4cDNA对HUVEC的抑制作用

目的 :用一种简便方法构建了含血小板第四因子 (PF4)cDNA的腺病毒载体 ,体外检测其抑制人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)活性。方法 :将含有信号肽的PF4cDNA克隆至腺病毒穿梭质粒 pAdshuttle CMV中 ,形成转移质粒pAdshuttle/PF4,将之用PmeI酶切线性化后与腺病毒骨架质粒 pAdEasy 1共转化大肠杆菌BJ5 183 ,抽提并鉴定含目的基因的重组体质粒 ,PacI酶切后用磷酸钙共沉淀方法转染HEK2 93细胞 ,包装成重组腺病毒AdPF4。经鉴定后扩增、纯化、测病毒滴度及感染率。直接转导HUVEC检测表达蛋白活性。结果 :经鉴定此病毒DNA有PF4cDNA插入 ,病毒滴度可达 1× 10 1 0 pfu/ml,转导AdPF4病毒后的人脐静脉内皮细胞较对照含空载体病毒增殖减低 5 3 %。结论 :实验证实腺病毒介导的PF4cDNA体外具有抑制内皮细胞增殖活性。     

人脐带间充质干细胞分离纯化及基本生物学特性研究

间充质干细胞（MSC）在特定条件下能转化为神经元样细胞，并参与神经损伤修复，使其受到了越来越多的关注。研究表明，MSC不仅存在于骨髓，还存在于脐血，胎儿内脏等。脐带作为胎儿与母体间的营养桥梁．其中是否也含有并能否提取到足量的MSC引起本研究室的关注。本研究首次探讨从脐带获取MSC的方法及其基本生物学特性。     

血小板第4因子对脐血CD34+细胞黏附功能的影响

目的研究血小板第4因子(PF4)对新鲜脐血CD34+细胞及扩增后脐血CD34+细胞黏附功能的影响;PF4对脐血CD34+细胞上的黏附分子CD49d及基质细胞趋化因子(SDF-1)受体CXCR4的作用.方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34+细胞,结晶紫染色测定细胞总黏附性,免疫荧光标记流式细胞仪测定CD49d及CXCR4的表达.结果①PF4 可使新鲜脐血CD34+细胞总黏附性提高,且与剂量相关.②SDF-1 100 ng/ml可使脐血CD34+细胞总黏附性提高.③脐血CD34+细胞扩增10 d后未加PF4刺激的自发以及经SDF-1诱导的黏附功能开始下降,在扩增脐血CD34+细胞不同时间段加入100ng/ml PF4,脐血CD34+细胞对基质层的黏附能力始终保持较高水平,以0天时脐血CD34+细胞黏附性为100%,扩增14 d时脐血CD34+细胞黏附性PF4组为(262.04±64.81)%,同期对照组为(64.35±8.29)%,经SDF-1诱导下扩增14 d的CD34+细胞的总黏附性PF4组为(138.31±32.39)%,同期对照组为(67.66±12.44)%.④PF4 100 ng/ml作用于CD34+细胞时,CD49d表达增长13.02%,CXCR4表达增长17.33%.结论 PF4可使新鲜及扩增后的脐血CD34+细胞黏附功能增强,并促进CD49d及CXCR4的表达,提示PF4可能有助于脐血干细胞的归巢.     

脐血造血干细胞生物学特征与临床应用研究

本文综述了脐血造血干细胞(UCBSC)的生物学特性,具有不同于骨髓造血干细胞的表型特征,增殖潜能强,免疫系统相对不成熟,但存在T、NK前体细胞,可经细胞因子体外扩增产生免疫活性细胞。临床应用表明进行脐血造血干细胞移植(UCBSCT)后,造血植入的成功率稍低干骨髓移植(BMT),尤其血小板恢复慢,故大部分用于儿童患者,但是尽管进行HLA配型1～3个位点不合的UCBSCT,造血植入后发生移植物抗宿主病(GVHD)轻;UCBSC可经体外CD34~+细胞扩增或免疫细胞的定向扩增,从而提高其造血植入和移植物抗白血病作用(GVL),均已试用于临床取得成功。这些研究提示UCBSCT有广阔的临床应用价值和前景。     

用组织块培养法从骨髓滤网颗粒物中分离大量骨髓间充质干细胞

本研究探讨能否从废弃的骨髓滤网颗粒物中获得间充质干细胞(MSC)。应用组织块培养法,对2例正常供者骨髓滤网中的颗粒物进行分离培养,计数获得的MSC数量,对其表型和分化能力进行鉴定。结果表明:骨髓滤网颗粒物中存在大量的MSC,经过3代扩增后其数量接近107;这些细胞具有典型的MSC形态和表型特征,可以分化为骨、软骨和脂肪细胞。结论:用组织块培养法可以从骨髓滤网颗粒物中获得大量MSC。     

205例成年血液病患者的膳食营养调查

目的:了解血液病患者膳食营养素的摄入情况以及各种膳食营养素的比例、来源是否合理,以指导患者饮食,合理改善膳食结构,促进身体康复。方法:采用24h膳食回顾自我记录法,连续记录患者7d早、中、晚3餐及3餐外的进食情况(水除外);用SPSS11.5统计软件进行分析,与《中国居民膳食营养素参考摄入量》(Chi-neseDRIs)进行比较。结果:与中国营养学会推荐的平衡膳食宝塔相比,大部分血液病患者豆类、蔬菜、水果、乳类及肉鱼禽的摄入量较少,能量和蛋白质的摄入水平较低,分别达到RNI的69.0%和82.0%,蛋白质、脂肪和碳水化合物在热量营养素来源分布中的比例较为合理,优质蛋白质占总蛋白质来源的40%以上;维生素A、维生素C、硫胺素、核黄素的摄入量均明显不足;矿物质中,除了铁的摄入水平较好以外,其他元素摄入均较低,尤其是钙,其平均摄入量仅达到参考标准的40%左右。结论:血液病患者的膳食结构存在一些不合理性,大部分患者的能量、蛋白质、维生素A、维生素C、硫胺素、核黄素、钙、锌、硒摄入水平较低。     

胎儿真皮间充质干细胞中的全能性相关转录因子的表达

背景:人真皮纤维母细胞或间充质干细胞可形成诱导性多能干细胞,但不同研究者所用的转录因子组合却并不相同。目的:分离人胎儿真皮间充质干细胞,检测其全能性相关转录因子的表达。方法:水囊引产5月龄胎儿,按照既往分离培养间充质干细胞的方法,得到胎儿真皮间充质干细胞。结果与结论:胎儿真皮间充质干细胞高表达Oct4和C-myc、中度表达Sox2,是形成诱导性多能干细胞较好的体细胞。     

人胎盘绒毛膜来源间充质干细胞的生物学特性

背景：骨髓是间充质干细胞的主要来源,但骨髓中间充质干细胞数量和质量会随着年龄的增长而逐渐降低。因此,寻找一种新的干细胞来源具有重要意义。 目的：分离研究了一种新的间充质干细胞来源——人绒毛膜来源间充质干细胞,并研究其生物学特性。 方法：将胎盘冲洗干净后,分离出脐带和羊膜组织,将剩余的胎盘组织进行原代和传代培养。通过短串联重复序列分析检测细胞是否来源于绒毛膜,用MTT法检测细胞生长方式,流式细胞仪分析细胞表型及干细胞标记,使用不同的诱导分化培养基检测其多向分化的能力。将该细胞与植物血凝素刺激的外周血单个核细胞共培养,用酶联免疫吸附试验检测上清γ-干扰素的水平。 结果与结论：短串联重复序列分析证明所得到的细胞来源于绒毛膜,这种绒毛膜来源的细胞生长呈典型的成纤维细胞形态。细胞表达常见的间充质干细胞表面标记CD90、CD73、CD105、CD44,不表达CD45,CD11b和CD34。同时,细胞也表达Nestin和Sox-2。在不同的条件培养基培养状态下,细胞可向成骨、成脂方向分化。这些结果证明所得到的细胞为人绒毛膜间充质干细胞。这些绒毛膜间充质干细胞能抑制植物血凝素刺激的人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素。可见绒毛膜来源的间充质干细胞具有和传统的骨髓来源间充质干细胞具有相似的生物学特性。     

脐带来源间充质干细胞在成脂培养条件下骨形态发生蛋白2的表达

背景：脐带间充质干细胞在成脂培养条件下成脂相关信号因子过氧化物酶体增殖体激活受体Y的表达水平增高,同时成骨相关信号因子骨形态发生蛋白的表达水平也增高。目的：检测成脂诱导条件下脐带间充质干细胞的过氧化物酶体增殖体激活受体Y及骨形态发生蛋白2的表达水平变化,并对结果进行初步探讨。方法：取脐带来源的间充质干细胞,以成脂诱导体系对细胞进行诱导分化培养,倒置显微镜下观察细胞体外培养生长情况：油红O染色法观察成脂现象,茜素红及von kossa染色观察是否有沉淀形成：荧光定量PCR方法检测成脂相关因子过氧化物酶体增殖体激活受体Y及骨形态发生蛋白2的表达变化情况。结果与结论：获得脐带来源间充质干细胞,并成功进行了成脂诱导分化。荧光定量PCR检测发现在成脂诱导条件下脐带间充质干细胞的过氧化物酶休增殖体激活受体Y和骨形态发生蛋白2的表达水平令都呈升高趋势,但是前肯对分化方向的调控起主要作用。