CD151对人脐带来源间充质干细胞生物学特性的影响

 目的：探讨CD151对人脐带来源间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）生物学性状的影响。方法：使用siRNA干扰hUC-MSCs 表面CD151,实验分为实验组（siRNA-CD151组）和对照组（siRNA-NC组）;流式细胞术检测干扰72 h后hUC-MSCs CD151及其它细胞表型,von Kossa和油红O染色检测体外成骨、成脂诱导分化情况;流式细胞术分析细胞周期变化;real-time PCR检测hUC-MSCs CD151、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）、环氧合酶2（cyclooxygenase 2,COX-2)和吲哚胺2,3-双加氧酶（indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO）mRNA的表达量;ELISA检测hUC-MSCs HGF分泌量。结果：(1) 流式细胞术检测发现干扰72 h hUC-MSCs实验组CD151（11.97±2.63 vs 95.66±1.56;P<0.01）和CD105（93.66±0.21 vs 83.37±0.71;P<0.05）较对照组显著降低;real-time PCR 检测hUC-MSCs CD151 mRNA变化和流式结果一致。(2)给予siRNA-CD151后能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G1期增多,S期减少。(3)实验组hUC-MSCs HGF和TGF-β1表达量低于对照组（P<0.01）,而COX-2表达量升高（P<0.05）,IDO无明显改变;ELISA检测显示实验组hUC-MSCs HGF分泌量较对照组下降（P<0.01）。结论：体外干扰CD151后hUC-MSCs 仍保持干细胞表型,体外成脂诱导分化能力无明显变化,但成骨诱导分化能力、增殖能力和相关免疫调节因子表达发生改变。     

小鼠骨髓间充质干细胞生物学特性和体外诱导分化

目的研究小鼠骨髓间充质干细胞的生物学性状和多系分化潜能。方法取Balb／c小鼠骨髓单个核细胞在低糖的培养液中培养出贴壁生长的细胞,进行形态学观察、细胞周期和免疫表型分析;在不同的因子作用下诱导向成骨细胞、软骨细胞,脂肪细胞分化,并检测诱导后细胞相应的基因表达。结果小鼠骨髓间充质干细胞贴壁生长后形态较均一,增殖能力随着传代逐渐增强,但从第8代后增殖能力明显减退。细胞表达CD29,CD38,CD44,CD106等标记,但CD34和H-2k表达阴性。在不同的诱导培养体系里间充质干细胞能分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞,相应的骨钙蛋白基因,Ⅱ型胶原基因,脂蛋白脂酶基因表达都明显增强。结论从小鼠骨髓可以分离培养出间充质干细胞,在体外有效扩增和诱导分化。表明可以以小鼠为模型研究间充质干细胞在组织工程、细胞移植、基因治疗等领域的运用。     

神经毡蛋白-1在急性髓系白血病细胞中的表达和作用

本研究旨在探索神经毡蛋白(neuropilin-1,NRP-1)和NRP-2在髓系白血病细胞中的表达及抑制NRP-1基因表达后对白血病细胞生长和迁移的影响.采用RT-PCR观察NRP-1和NRP-2 mRNA在24例急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(MNC)及7种髓系白血病细胞系中的表达;以小干扰RNA(siRNA)干扰NRP-1基因在HEL细胞的表达,用MTT和细胞迁移试验观察细胞增殖、迁移的变化.结果显示NRP-1在24例AML患者骨髓MNC中表达,其阳性率为100%,显著高于正常对照组67%(p=0.03).79%AML患者表达NRP-2,67%正常人表达NRP-2,两者无明显差异(p=0.6).NRP-1的表达与AML患者骨髓、外周血原始细胞比例呈正相关(r=0.5,r=0.4,p＜0.05).NRP-1和NRP-2 mRNA分别在6/7和3/7种髓系白血病细胞系表达.用siRNA转染HEL细胞24小时后NRP-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低,当有VEGF165作用时,对照组细胞增殖明显增加,而干扰组无变化(MTT值对照组vs干扰组0.6±0.01 vs 0.49±0.02,p＜0.001).转染24小时后干扰组细胞迁移显著降低,其迁移细胞数干扰组vs对照组为500±17 vs 123±7(p＜0.001).结论NRP-1在AML患者骨髓MNC中表达增高,并在髓系白血病细胞的增殖和迁移中起重要作用.     

骨髓间充质干细胞对免疫介导再生障碍性贫血的治疗

背景：骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用,可以影响淋巴细胞和其他免疫细胞的功能,同时其分泌的因子尚有支持造血的作用。而再生障碍性贫血的发生、发展与T细胞功能亢进引起的造血干、祖细胞凋亡密切相关。目的：比较骨髓间充质干细胞和全骨髓细胞治疗免疫介导再生障碍性贫血小鼠的疗效。方法：建立BALB/C小鼠免疫介导再生障碍性贫血模型。将BALB/C小鼠随机分成正常组、对照组、注射骨髓间充质干细胞和注射全骨髓细胞组。观察骨髓间充质干细胞和全骨髓细胞对实验动物的疗效及骨髓的造血组织容量、脂肪细胞和血窦结构。结果与结论：再生障碍性贫血模型小鼠至第20天,对照组全部死亡,骨髓间充质干细胞组4例死亡,全骨髓细胞组1例死亡。②骨髓间充质干细胞组和全骨髓细胞组存活小鼠,其体质量变化趋势、血细胞计数、骨髓造血功能恢复均无显著性差异。③检测骨髓间充质干细胞组和全骨髓细胞组脾脏CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD4＋/CD8＋的比值示无差异,与正常小鼠相比,骨髓间充质干细胞组外周血CD4＋T细胞、CD8＋T细胞水平有下降趋势。全骨髓细胞组CD8＋T细胞水平明显下降。提示,单独使用骨髓间充质干细胞治疗能够使部分再生障碍性贫血模型小鼠症状改善、造血恢复。骨髓间充质干细胞治疗有效率不如全骨髓细胞,但两组无显著性差异。     

人脐带间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的评价

目的 观察人脐带间充质干细胞（human umbilical cordmesenchymal stem cell，hUCMSC）移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响。方法 SD大鼠70只，随机分为3组：脊髓半切＋hUCMSC组（n=30）、脊髓半切＋PBS组（n=30）和假手术组（n=10）。脊髓半切＋hUCMSC组和PBS组又分为头侧注射、尾侧注射和头尾两侧注射三个亚组。移植后1、7、14、21、28d观察大鼠神经功能恢复情况，应用免疫组化检测移植到脊髓的hUCMSC胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和神经元特异性烯醇化酶（NSE）表达情况。结果 大鼠脊髓半切损害后，hUCMSC组动物较PBS组有明显的神经功能恢复。植入后28d在宿主脊髓中存活的hUCMSC细胞MABl281（mouse antiuman nuclei monoclonal antibody）染色阳性，免疫组化双标染色显示MABl28l阳性细胞亦分别有NSE或GFAP表达并向损伤部位迁移，hUCMSC来源的GFAP阳性细胞可见明显的树突生长。结论 hUCMSC移植到宿主损伤脊髓后可以存活、向损伤部位迁移，并向神经元样和星形胶质细胞分化，且可促进大鼠脊髓损伤后神经功能恢复。hUCMSC作为一种来源广泛的干细胞用于治疗脊髓损伤可能具有重要的价值。     

细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

干细胞修复脊髓损伤是目前研究的一个热点。具有发育全能性的胚胎干细胞、神经系统来源的细胞(神经 干细胞、嗅鞘细胞、雪旺氏细胞)和成体干细胞(骨髓间充质干细胞、脐带血干细胞)各有其优缺点。移植方式和移 植时间窗的选择也对细胞的迁移和分化以及动物神经功能的恢复有重要影响,新技术的开展为细胞移植疗法提供 了新思路。     

抗CD44抗体HI44a诱导THP-1细胞凋亡作用的研究

背景与目的:研究抗CD44抗体HI44a体外诱导白血病细胞THP-1凋亡的作用及其机制.材料与方法:应用Annexin-V/PI染色法、原位凋亡检测试剂盒及透射电镜分别检测形态学变化及其凋亡情况,RT-PCR及western-blot方法检测原癌基因c-myc mRNA及蛋白水平的表达,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.结果:采用多种方法均可证实,HI44a对THP-1细胞有明显的诱导凋亡作用.HI44a明显抑制THP-1细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达(P＜0.05);同时c-myc在mRNA及蛋白水平的表达水平均明显降低;并可诱导细胞线粒体膜电位的改变.结论:HI44a能够有效诱导THP-1细胞凋亡.其作用机制可能与调节相关癌基因及抗凋亡蛋白的表达,降低线粒体膜电位有关.     

实体肿瘤的抗血管新生基因治疗现状及进展

实体肿瘤的抗血管新生基因治疗就是将外源基因靶向血管内皮细胞,直接作用于肿瘤细胞生长所依赖的新生血管,而达到治愈肿瘤的目的.同时也最大程度地减少了抗血管新生物质的全身毒副作用.本文就实体肿瘤的抗血管新生基因治疗现状作一综述.     

实体肿瘤的抗血管新生基因治疗现状及进展

实体肿瘤的抗血管新生基因治疗就是外源基因靶向血管内皮细胞，直接作用于肿瘤细胞生长所依赖的新生血管，而达到治愈肿瘤的目的，同时也最大程度地减少了抗血管新生物质的全身毒副作用，本文不实体肿瘤的抗血管新生基因治疗现状作一综述。     

抗CD33抗体在治疗急性髓系白血病中的应用

CD33抗原是靶向治疗急性髓系白血病的一个合适的靶点，抗CD33单克隆抗体经过基因工程改造后，可通过抗体依赖性细胞毒作用杀伤靶细胞，并且可将靶向性单抗与细胞毒药物或放射性同位素偶联杀伤靶细胞，发挥治疗作用。抗CD33单抗GO(gemtuzumab ozogamicin)已用于临床治疗。本文就抗CD33抗体在治疗急性髓系白血病中的应用作一综述。