20008/壳聚糖球形多孔微载体支持下培养的肝细胞功能及其代谢活性检测(想明年4月之前发，想申请加急)

摘要 背景：微载体培养技术作为一项体外高浓度细胞培养技术,近年来已在肝细胞的体外培养中得到应用。 目的：对壳聚糖球形多孔微载体培养的人肝细胞L-02进行定时的形态学观察。 方法：以自制的壳聚糖球形多孔微载体样本为支架来培养人肝细胞L-02设为实验组;无壳聚糖球形多孔微载体支持下人肝细胞的培养设为对照组。对两组细胞进行定时的细胞计数,并对实验组进行形态学观察,包括倒置相差生物显微镜观察和扫描电子显微镜观察。 结果：两组培养的细胞数量均呈现前3 d增长,在第3天细胞数量达到最高值;而且实验组3个样本培养的细胞数明显高于对照组无微载体培养的细胞数量(P < 0.05),实验组各样本之间差异无显著性意义(P > 0.05);倒置相差生物显微镜下动态观察,可见前3 d微载体表面黏附生长的肝细胞则逐渐增多,第3天可见大部分微载体表面有许多肝细胞黏附成团,总的存活率均在90%以上,且肝细胞保持着良好的形态学结构;扫描电子显微镜观察,微载体表面、切面和内部均可看到有许多球状肝细胞紧密黏附。提示,以自制的壳聚糖球形多孔微载体作为一种支架,在体外三维环境下可以进行高浓度细胞培养。 关键词：微载体;壳聚糖;人工肝脏;肝细胞培养;组织工程 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2011.12.018     

微载体培养技术的研究与进展

背景：微载体培养技术是一种新兴的大规模细胞培养技术,广泛地应用于组织工程中种子细胞的扩增。微载体具有比表面积大等优点,在微载体培养技术中具有决定性作用。 目的：文章就近年来制备微载体的生物材料和方法的研究进展做一综述,为微载体培养技术和组织工程的研究提供理论基础。 方法：由第一作者于2009-10应用计算机检索PubMed数据库、万方数据库和维普数据库相关文献。英文资料的检索时间为1967/2009;中文资料的检索时间为1990/2009。英文检索词为“microcarrier,biomaterials cell culture, tissue engineering”;中文检索词为“微载体,生物材料,细胞培养,组织工程”。 纳入标准：①微载体材料、制备工艺及性能的研究。②微载体细胞培养的研究。③动物实验及临床应用。阅读标题和摘要进行筛选,共纳入34篇用于综述。 结果与结论：虽然国内外研究人员在微载体的研究与制备方面做了很多工作,但迄今仍与临床应用有一定的距离。目前的主要工作是将不同种类的材料通过新型的工艺制备得到复合材料,通过表面改性来调节微载体的力学和生物降解性能。 关键词：微载体;生物材料;细胞培养;制备工艺;组织工程;综述文献 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.16.024     

834 例乳腺癌临床分析

 目的　探讨维吾尔族等少数民族乳腺癌的临床病理学特点。方法　对我院 1 982年至1 996年诊治的 834例乳腺癌进行临床回顾性分析。结果　维、汉等不同民族间乳腺癌的发病年龄、病理学类型无明显统计学差异 ( P>0 .50 )。在不同年龄组腋淋巴结状态比较中 ,35～ 65岁组中以维吾尔族腋淋巴结转移率最高为 75.5% ( P<0 .0 0 5) ,而其余年龄组无明显差异 ( P>0 .1 0 ) ,且肿瘤大小以维吾尔族肿瘤直径较大 ( P<0 .0 5)。结论　维吾尔族乳腺癌患者其肿块多较大 ,腋淋巴转移率较高 ,此可能是由于不同民族间乳腺癌之生物行为之间的差异而造成.     

微载体cytodex 3大量扩增成人骨髓间充质干细胞的初步研究

目的建立一种体外分离、大量扩增培养成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的方法。方法用Percoll梯度离心结合贴壁法分离hMSCs,用微载体cytodex 3培养hMSCs,以普通单层聚苯乙烯(TCPS)培养作对照,用流式细胞仪(FCM)和MTT法对其细胞表型和增殖活性检测。结果①梯度离心结合早期换液是分离hMSCs的较好方法,FCM检测表明hMSCs表面表达CD29、CD44和CD105,而不表达CD14、CD34、CD45、VLA-1和HLA-DR。hMSCs细胞周期分布显示:G0/G1期(86.4±3.8)%,S G2 M期(13.6±4.2)%;②hMSCs与cytodex 3有良好的相容性,MTT法表明hMSCs在cytodex 3表面悬浮生长时具有比普通单层TCPS培养时更高的数量和增殖活性,FCM分析表明两者的细胞表型和细胞周期分布相同,无显著性差异(P>0.05)。结论微载体cytodex 3培养方法是扩增组织工程种子细胞hMSCs的有效方法。     

胰肾联合移植研究进展

自1966年首例胰肾联合移植（pancreas-kidney transplants．PKT）在美国Minnesota大学成功实施以来[11．随着新型免疫抑制剂的临床应用、器官保存技术和手术方式的改进．胰肾联合移植成功率显著提高。据国际胰腺移植登记机构（International Pancreas Transplant Registry，IPTR）记录，至2003年全球已实施21208例胰腺移植，其中多数是胰肾联合移植。胰肾联合移植已成为治疗Ⅰ型糖尿病和部分Ⅱ型糖尿病合并尿毒症的有效常规方法。     

海藻酸钠/壳聚糖微囊冻存的低温显微实验

背景:目前国内外对微囊的低温保存效果均不理想,已成为制约微胶囊广泛应用的一个重要环节.目的:观察不同溶液、不同降温速率冻存海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(alginate-chitosan-alitosan-alginate,ACA)微囊时冰晶的特点及其对微囊形态的影响,探索一种适合ACA微囊低温保存的降温方法.设计:观察实验,于2008-02/04在上海理工大学低温显微镜实验室完成.材料:应用自制的高压脉冲微胶囊成型装置制备ACA微囊.方法:在低温显微系统下以1,10,30和100℃/min的降温速率对微囊进行低温保存,最后以50℃/min复温;然后在ACA微囊悬液中加入10%二甲基亚砜,重复实验.主要观察指标:不同降温速率及添加了二甲基亚砜后冰晶生长情况及其对ACA微囊形态的影响;复温后微囊形态的变化及微囊的破损率.结果:在以小于10℃/min降温速率且不添加低温保护剂的情况下,冻结过程中生成的冰晶粗大.冰晶的生长会导致微囊发生形变,当提高降温速率、添加二甲基亚砜后,冰晶变得细小,对微囊的损伤也更小.从复温后微囊的形态来看,以超过30℃/min降温、添加10%二甲基亚砜为低温保护剂时微囊的破损率较小(P＜0.05).结论:微囊在低温保存过程中主要受到由冰晶生长引起的机械性损伤,提高降温速率及添加低温保护剂可以有效抑制冰晶的生长.     

无乳头溢液导管内乳头状瘤的超声图像特征分析

目的 总结无乳头溢液导管内乳头状瘤的超声图像特征.方法 回顾性分析我院62例(73个病灶)经病理确诊的导管内乳头状瘤超声图像,根据有无扩张导管、结节,以及扩张导管与结节的关系将病灶分为Ⅰ～Ⅴ型5型,分析各型声像图特点.结果 73个病灶中,Ⅰ型27个,Ⅱ型11个,Ⅲ型30个,Ⅳ型3个,Ⅴ型2个;超声对各型的诊断准确率分别...     

海藻酸钠/壳聚糖微囊冻存的低温显微实验

背景：目前国内外对微囊的低温保存效果均不理想,已成为制约微胶囊广泛应用的一个重要环节。 目的：观察不同溶液、不同降温速率冻存海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(alginate-chitosan-alitosan-alginate, ACA)微囊时冰晶的特点及其对微囊形态的影响,探索一种适合ACA微囊低温保存的降温方法。 设计：观察实验,于2008-02/04在上海理工大学低温显微镜实验室完成。 材料：应用自制的高压脉冲微胶囊成型装置制备ACA微囊。 方法：在低温显微系统下以1,10,30和100 ℃/min的降温速率对微囊进行低温保存,最后以50 ℃/min复温;然后在ACA微囊悬液中加入10%二甲基亚砜,重复实验。 主要观察指标：不同降温速率及添加了二甲基亚砜后冰晶生长情况及其对ACA微囊形态的影响;复温后微囊形态的变化及微囊的破损率。 结果：在以小于10 ℃/min降温速率且不添加低温保护剂的情况下,冻结过程中生成的冰晶粗大,冰晶的生长会导致微囊发生形变,当提高降温速率、添加二甲基亚砜后,冰晶变得细小,对微囊的损伤也更小。从复温后微囊的形态来看,以超过30 ℃/min降温、添加10%二甲基亚砜为低温保护剂时微囊的破损率较小（P < 0.05）。 结论：微囊在低温保存过程中主要受到由冰晶生长引起的机械性损伤,提高降温速率及添加低温保护剂可以有效抑制冰晶的生长。     

生物人工肝的研究进展

目的：分析近些年来生物人工肝相关的研究,对生物人工肝的发展作一总结。 资料来源：以bioartificial liver, liver cell, hepatocyte culture, bioreactor为检索词,检索Ovid、SpringerLink数据库(1990-09/2008-09);以生物人工肝、肝细胞、细胞培养、生物反应器为检索词,检索维普数据库、中国期刊网及万方数据库(1990-09/2008-09)。文献检索语种限制为英文和中文。 资料选择：纳入有关生物人工肝肝细胞、反应器及辅助装置的研究,排除生物人工肝免疫和动物传染的研究。 结局评价指标：①生物人工肝肝细胞的来源、数量及培养方式。②生物反应器的类型及主要结构膜的性质及类别。③生物人工肝供氧及温控装置的构成。 结果：计算机初检得到3 898篇文献,根据纳入排除标准,对29篇进行分析。生物人工肝是在体外生物反应器中培养肝细胞,当患者的血液流经生物反应器时,通过半透膜或直接接触的方式与培养的肝细胞进行物质交换,使其中的肝细胞发挥解毒、合成、生物转化等功能,以达到支持和治疗目的。它不但具有解毒功能,而且还能参与3大营养物质代谢,分泌促进肝细胞生长的物质等,可有效替代肝脏的解毒功能和合成功能,并可较好地预防肝性脑病、肝昏迷和脑水肿,临床上可作为肝衰竭患者肝移植前的过渡辅助措施。 结论：生物人工肝研究虽然取得了重大进展,但仍然面临寻找理想肝细胞来源,长期维持肝细胞的活性和功能,进一步优化反应器设计等问题。     

胰胃吻合在胰十二指肠切除术中的应用

目的 探讨胰十二指肠切除术中采用胰胃吻合重建胰腺残端的手术指征及疗效.方法 回顾性分析上海同济医院2005年8月至2008年2月期间施行的胰十二指肠切除并行胰胃吻合的38例患者的临床资料.结果 本组患者均顺利完成手术,平均手术时间(352.1±78.3) min, 术中平均输血量(911.3±601.4) ml; 术后住院时间平均(26.2±12.1) d; 术后发生并发症8例(21.1%),其中胰瘘1例(2.6%),胃排空障碍2例(5.3%),切口感染2例(5.3%),腹腔积液1例(2.6%),肺部感染2例(5.3%),均经保守治疗后痊愈,无住院手术死亡病例.结论 胰胃吻合是一种安全、可靠及有效的胰腺残端重建方式,根据患者的具体情况合理地选择胰胃吻合可以最大程度地减少胰十二指肠切除术后胰瘘的发生.