微囊包载体肝细胞培养方式对肝细胞功能及活性的影响

目的：探讨采用海藻酸钠/壳聚糖/海藻酸钠（ACA）微囊包裹微载体的肝细胞培养方式对肝细胞功能及活性的影响。方法：设立微囊包载体组和普通单层细胞培养组;以微载体Cytodex3进行肝细胞（HL-7702）培养;选择合适时机进行ACA微囊化包裹。收集两组第1～6天的培养液,测定其中白蛋白及乳酸脱氢酶（LDH）含量;并用Calcein-AM/PI双染细胞,在荧光显微镜下观察细胞的荧光强度变化,了解细胞活性的改变。结果：观察培养6d,微囊包载体组培养液中的白蛋白含量至第4天达到峰值,之后缓慢下降;而普通单层培养组培养液中白蛋白含量至第2天达到峰值,之后迅速下降。微囊包载体组培养液的LDH含量明显低于单层培养组（P〈0.01）。微囊包载体组中活细胞的绿色荧光强度逐渐减弱,至培养第6天,显示黄绿色荧光;而单层培养组中每天有大量失活细胞悬浮于培养液中,至培养第6天,贴壁细胞数量仅占培养前的27%。结论：微囊包载体肝细胞培养方式中前期,微载体细胞培养可在较短的时间及较小的空间内实现细胞扩增;外周的微囊机构对肝细胞营养物质的供给及合成产物的排出无影响,但可阻挡大分子免疫球蛋白;两者结合有利于维持肝细胞的白蛋白分泌功能及细胞活性,是一种兼具高密度培养及免疫屏障功能的细胞培养方式,在生物人工肝中有一定的可行性。     

乳腺癌保乳病人术后生存质量的质性研究

[目的]了解乳腺癌保乳治疗病人对生存质量的主观评价,从生存质量的各维度分析保乳病人术后生活质量影响因素,为提高保乳手术病人生存质量提供例证和启示.[方法]采用质性研究中现象学研究法对12例保乳病人进行深度访谈,对获得的访谈资料进行内容分析、提炼主题,从生理、情感、社会/家庭3个维度分析保乳手术病人生存质量状况.[结果]乳腺癌保乳手术病人对生存质量的主观评价:内涵多样化,健康体现最佳生存质量,保乳手术提高生存质量;生存质量3个层面6个主题被提炼,生理层面:患肢功能受限,化疗反应;情感层面:焦虑,悲观;社会/家庭层面:家庭支持,自我效能改变.[结论]生理功能下降、负性情感和自我效能降低影响保乳手术病人的生存质量,家庭支持提高生存质量.护理人员应采取多种措施,促进病人生理、心理、社会功能方面的适应,提高其生存质量.     

乳腺癌保留乳房手术可吸收性PDT/Fe3O4复合物瘤床标记物研究

目的制备贴合人体组织、安全有效的可吸收性乳腺癌术后放疗指示标记夹,同时为其他组织修复标记材料的设计和构建提供理论指导。方法以外消旋丙交酯(DLLA)、三亚甲基碳酸酯(TMC)为原料,一定条件下,将DLLA与TMC共聚合成共聚物PDT[poly-(D,L-lactide-co-TMC)],将PDT样品与制备的磁性纳米Fe₃O₄颗粒通过溶液共混,制备出分散性良好的磁性纳米复合材料。分别在X射线及CT下观察材料显影效果,并结合所研究材料的表征,筛选最佳磁性纳米Fe₃O₄颗粒浓度。结果PDT/Fe₃O₄复合材料电镜下具有较好的均一性,材料的力学强度随着磁性纳米Fe₃O₄颗粒的质量分数变化而改变,弹性模量最高为399.66MPa,对应Fe₃O₄颗粒的质量分数为0.5%,最低为160.34MPa,对应Fe₃O₄颗粒的质量分数为0%;材料与乳房局部组织的CT值有阳性差异,最大CT值为1762.2HU,利于医学影像学显影。结论PDT/Fe₃O₄复合材料具有良好的生物可吸收性,具备良好的影像学显影功能,降解全程满足放疗周期,可用作乳腺癌术后放疗指示标记夹。     

腹部淋巴血管瘤九例诊治分析

伴有毛细血管增生的淋巴管瘤即为淋巴血管瘤，是来源于间叶组织的良性肿瘤，多发生于头颈部，是一种先天畸形或发育缺陷，常见于儿童，成人少见。虽然少见部位如肠系膜、网膜、腹膜后等淋巴管瘤的个例报道时常见到，但腹部淋巴血管瘤非常罕见。本文总结2002年12月至2005年12月本院收治的9例腹部淋巴血管瘤的诊断与治疗情况，现报告如下。     

肝细胞体外培养技术的研究与进展

目前肝细胞体外培养技术主要有以下几种:单层培养法、胶原凝胶三明治培养法、微载体黏附培养法、微囊包裹培养法、球形聚集培养法、中空纤维培养法。胶原凝胶三明治培养法制备简单,培养效果明确,但是所培养的细胞数量有限,难于大规模工业化培养;中空纤维培养法能为细胞生长提供了三维空间,增加了肝细胞与培养体系的接触面积,有利于物质代谢与交换,但存在管上细胞分布欠均匀、细胞团块易堵塞半透膜孔隙影响物质交换等弊端;球形聚集培养法不需构建载体,但球体大小不易控制,易造成球体中心肝细胞坏死;微囊包裹培养能提供一个较好的免疫阻隔环境,能在免疫阻隔要求较高的环境下使用。微载体黏附培养法能够在单位体积内培养最多数量的肝细胞,能对肝细胞的黏附、生长和分泌提供较好环境,目前微载体的直径和孔径还未达到最理想的培养要求,单位体积肝细胞的培养数量还有很大的提升空间。同时培养液配方与共同培养技术的不断改良,必将使体外培养的肝细胞数量与功能达到肝细胞移植所需。     

深入“探访”生活中的乳腺“雷区”

乳房作为最重要的女性性征,是女性的形体美的重要组成部分,但也是一个“多事之丘”。因为乳腺疾病有多种类型,其中乳腺癌就是女性最常见的恶性肿瘤。在美国大约每10个女性中,就有1个人可能在一生中发生乳腺癌,可见乳腺肿瘤与我们的生活并不遥远。通常认为,半数以上的恶性肿瘤与“根植”在生活中的“雷区”——不良的饮食习惯和生活方式有关,乳腺癌也不例外。现在,让我们一起来探一探。     

微载体及其在肝细胞培养中的作用与应用

微载体具有比表面较大等优点，是目前较常用而有效的动物细胞大规模培养的载体，微载体培养技术已经成为动物细胞工程的基础和细胞学研究的主要技术和热点之一，广泛地应用于生产一些具有重要实用和商业价值的产品，积累了大量的实践经验和关键的实验数据，并在肝细胞、软骨细胞、成纤维细胞等组织工程种子大规模扩增研究领域取得了许多进展。文章就微载体及其在肝细胞培养中的研究进展做一综述，为动物细胞培养的载体研究提供理论基础。     

人肝细胞臌孔聚丙烯杂化界面的生物相容性

背景：生物反应器膜材料不仅具备双向物质交换、良好的理化特性，还要具有良好的生物相容性。目的：评价人肝细胞／微孔聚丙烯杂化界面，即接枝改性微孔聚丙烯超滤膜的生物相容性。设计、时间及地点：动物实验观察，于2005—09-007-10在上海交通大学医学院附属瑞金医院器官移植中心（上海消化外科研究所）实验室和浙江大学高分子材料研究所共同完成。材料：选用孔径为0．2um，分子截流量为M50000～100000的微孔聚丙烯超滤平面薄膜为实验模型，利用光化学接枝聚合改性技术，在聚丙烯超滤膜表面通过化学键的形式接枝亲水性丙烯酰胺基冈，成功地构建一种人肝细胞／微孔聚丙烯杂化界面，即新型的生物人工肝生物反应器膜——接枝改性微孔聚丙烯超滤膜。方法：参照国际标准化组织ISO10993-1：1992医疗器械生物学评价标准和要求进行溶血试验、细胞毒性试验、全身急性毒性试验、热原试验、皮肤和皮内刺激试验，评价接枝改性微孔聚丙烯超滤膜的生物相容性。主要观察指标：接枝改性微孔聚丙烯超滤膜浸提液的溶血试验、细胞毒性试验、全身急性毒性试验、热原试验、皮肤和皮内刺激试验结果。结果：接枝改性微孔聚丙烯超滤膜的溶血率为1．90％〈5％，表明其无致溶血性；其浸提液对L929细胞增殖活性无明显的抑制作用；注射接枝改性微孔聚丙烯超滤膜浸提液后24，48，72h，所有小鼠无死亡，体质量无明显变化，未观察到眼睑下垂、呼吸困难、发绀、腹部刺激症、腹泻、运动减少、震颤等全身急性毒性反应。热原试验中兔体温变化范围-0．2～0．4，符合生物医学材料无热原的评价标准。皮肤刺激实验中仅1例有极轻微的红斑，积分1分，其原发刺激指数为0．25〈0．4，皮内刺激试验结果原发刺激指数为0．2，平均原发刺激指数为O．068，均〈0．4，无皮肤刺激性。结论：人肝细胞／微孔聚丙烯杂化界面，即接枝改性微孔聚丙烯超滤膜无致溶血性、细胞毒性、致热原性和皮肤刺激致敏性，证实通过光化学接枝丙烯酰胺后具有良好的生物相容性。     

肝细胞球形聚集体培养研究进展

生物人工肝在治疗肝功能衰竭中起重要作用。球形聚集体培养作为肝细胞培养的主要方式之一，旨在达到高密度、维持长时间生物活性的目标。文章就近年来肝细胞球形聚集体培养的影响因素和培养方式作一综述。     

羧甲基壳聚糖在大鼠创伤出血模型的止血效果的观察

目的:建立SD大鼠创伤出血动物模型,观察羧甲基壳聚糖粉的止血效果及组织相容性和生物降解率。方法:①SD大鼠60只,30只用于建立肝脏出血创面,30只用于建立股静脉出血创面;2种模型的大鼠各分3组(羧甲基壳聚糖组、速即纱组、空白对照组),每组10只,并将材料置于大鼠的创面,观察各组的止血时间及出血量。②肝脏出血模型的大鼠1周后剖腹探查,切取肝脏创面组织,行病理组织检查,观察光镜下组织反应。结果:对于肝脏渗血和股静脉出血创面,羧甲基壳聚糖组、速即纱组及空白对照组均可止血,羧甲基壳聚糖组与速即纱组间止血时间及失血量无差异(P0.05);而羧甲基壳聚糖组及速即纱组与空白组比较,在止血时间、失血量上都有统计学差异(P0.01)。1周后羧甲基壳聚糖组大鼠肝脏创面组织在光镜下可见周围组织炎症反应较轻,且羧甲基壳聚糖已吸收。结论:羧甲基壳聚糖粉对大鼠肝脏渗血创面及静脉出血止血效果明显,组织相容性好,生物降解快。