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一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的 选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因-TSF,在大肠肝菌表达,细胞水平上检测表达产物的生物学活性。方法 PF4的C-末端13肽和TSP1的429-459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白-TSF。采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白。采用MTT方法测定TSF及其相关性GST-TSF,PF4(58-70),TSP1(429-459)等对血管内皮细胞,平滑肌细胞,QGY7721人肝癌细胞,HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应。结果 合成的TSF融合基因,克隆到pGEX-2T载体,转化E .coli JM109,获得了TSF蛋白的高效表达。建立了TSF蛋白的纯化复性方法,获得了GST-TSF融合蛋白及TSF蛋白。TSF,GST-TSF,PF4(58-70)和TSP1(429-59)均特异抑制血管内皮细胞的生长,其中TSF的活性最强,活性大小次序为TSF>GST-TSF>PF4(58-70)>TSP1(429-459)。结论 融合表达蛋白-TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长。 相似文献
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速效抗晕胶囊急性毒性实验研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 观察速效抗晕胶囊对小鼠的急性毒性表现以评价药物的安全性.方法 通过对ICR小鼠单次灌胃观察速效抗晕胶囊对小鼠的急性毒性表现,根据死亡率用综合分析法计算药物的半致死剂量(LD50)值.结果 小鼠服药后呈现与浓度正相关的兴奋性神经症状.症状初始时间为服药后10 min左右,高浓度组(1461.6 mg/kg)小鼠快速死亡,死亡时间集中在1~2 h.速效抗晕胶囊对小鼠的LD50为1043.3 mg/kg,LD50的95%可信区间为972.8~1113.8 mg/kg.结论 速效抗晕胶囊灌胃给药小鼠的LD50为1043.3 mg/kg,相当于临床推荐剂量的298~596倍. 相似文献
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目的 探讨半夏总生物碱(total alkaloids from Pinellia Ternata,TATP)对人肺癌细胞株A549增殖的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolil tetracolium,MTT)比色法以及集落形成率实验,检测不同浓度的TATP对A549细胞株的生长抑制作用。应用单细胞凝胶电泳分析检测TATP导致A549细胞的DNA损伤情况。结果 人肺癌细胞A549经TATP处理后,其体外增殖能力明显下降且与药物的剂量、加药时间呈正相关,与对照组比较,差异均有统计学意义。单细胞凝胶电泳(Single cell gel electrophoresis, SCGE)中,TATP组细胞尾DNA含量、尾长及尾动量与对照组相比差异显著(P<0.01),且呈现浓度依赖性。结论 在体外培养的条件下,TATP能明显抑制A549细胞增殖,其机制可能与DNA的损伤作用有关。 相似文献
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目的:研究半夏总生物碱(TAPT)对D-半乳糖诱导的衰老小鼠学习记忆的影响并初步探讨其作用机制。方法:昆明种小鼠100只,随机分为5组,即正常对照组,模型组,TAPT低、中、高剂量组(7.5,15,30 mg.kg-1),每组20只。模型组和TAPT组给予120 mg.kg-1的D-半乳糖注射液(sc,每天1次,连续8周),建立学习记忆障碍的衰老小鼠模型,对照组给予等量生理盐水;同时,TAPT各组给予对应浓度的TAPT药液(ig,每天1次,连续8周),对照组及模型组给予等量蒸馏水。采用跳台法和Y迷宫评价法测试TAPT对模型小鼠学习记忆障碍的改善作用,采用比色法测定小鼠脑组织中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性。结果:TAPT低、中、高剂量组小鼠Y迷宫训练时达标所需总次数减少,分别为(21.9±2.9),(20.8±3.2),(19.7±2.8)次;Y迷宫记忆测试时错误次数也明显减少,分别为(3.8±1.4),(3.2±1.7),(1.7±1.1)次;模型组小鼠脑组织SOD活性明显降低(28.98±13.08)U.mg-1,MDA及AChE含量明显增加(2.78±0.21)nmol.mg-1,(1.05±0.16)U.mg-1;经TAPT干预后,各剂量组小鼠脑组织中SOD活性增高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01);中、高剂量组AChE含量显著减少(P<0.01,P<0.05)。结论:应用TAPT干预D-半乳糖诱导的衰老小鼠,可明显改善其学习和记忆功能,这可能与其具有抗氧化作用及抑制AChE的活性有关。 相似文献
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低剂量率中子长期照射对大鼠外周血白细胞的影响 总被引:8,自引:0,他引:8
造血系统对电离辐射非常敏感.多年来,人们对X射线、γ射线等低传能线密度(linear energy transfer, LET)辐射对外周血的影响研究较多,而对高LET辐射,如裂变中子照射对动物的生物效应研究较少,低剂量率中子长期照射所引起的生物效应研究就更少.由于辐射的品质不同,中子对动物所产生的生物效应与变化规律可能与低LET辐射有所不同.为此,本文对不同剂量的低剂量率中子长期照射对大鼠外周血白细胞的变化进行了探讨.现报道如下. 相似文献
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提高疫苗免疫原性是疫苗开发中一个重要的方向 ,本文对近年来在提高疫苗免疫原性方面所取得的进展予以综述 ,包括肽疫苗佐剂、DNA疫苗佐剂、MHC-肽结合稳定性、共刺激信号、抗原呈递细胞和疫苗改造等 相似文献
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小鼠及家兔对丙型肝炎病毒多表位DNA疫苗免疫应答的研究 总被引:10,自引:4,他引:6
目的 探讨HCV复合多表位DNA疫苗的可行性。方法 把HCV多表位抗原基因PCX克隆到真核表达载体pREP9(RSV启动子)及pcDNA3(CMV启动子)中,构建真核表达载体pREP9/PCX及pcDNA3/PCX。将其肌肉注射免疫小鼠及家兔,检测特异性体液免疫和细胞免疫的水平,并观察免疫小鼠的安全性。结果 质粒pREP9/PCX及pcDNA3/PCX于免疫后第6wk和第10wk时,开始可检测到抗GZ-PCXIgG,随后抗体滴度逐渐升高,但水平较低持续时间较短,pcDNA3/PCX肌肉注射免疫家兔后,于第8wk开始出现特特抗体,至3个月后滴度升至1:3200随后也开始下降,免疫小鼠及家免可诱发针对GZ-PCX融合蛋白的迟发型超敏反应,并刺激淋巴细胞转化,免疫后小鼠的体重正常,肝脾脏未见明显肿大,具有良好的安全性。结论 HCV多表位基因可诱发特异性免疫应答且安全性。结论HCV我表位基因可诱发特异性免疫应答且安全性好,为HCV疫苗的研究提供一定的理论及实验依据。 相似文献