恶性疟原虫裂殖子表面蛋白-2DNA疫苗诱导小鼠T淋巴细胞的增殖

目的　为了探讨恶性疟原虫FCC - 1/HN株裂殖子表面蛋白 - 2 (MSP - 2 )DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答的特性及抗感染的保护性免疫机制。方法　将重组真核表达质粒pBK/MSP - 2经骨骼肌注射BALB/c小鼠 ,小鼠经DNA疫苗免疫 8w后 ,用流式细胞仪分析脾脏T淋巴细胞的分化 ,并体外培养脾脏细胞 ,用夹心ELISA法测定IFN -γ和IL - 2的产生。结果　与对照组相比 ,疫苗组CD+ 4CD8+ T淋巴细胞有显著性的增高 ,体外培养的脾脏细胞IFN -γ有一个高浓度的分泌。结论　恶性疟原虫FCC - 1/HNMSP - 2DNA疫苗诱导了一个TH1的免疫应答类型     

青蒿素衍生物对卡氏肺孢子虫基因的影响

目的　研究双氢青蒿素、蒿甲醚、青蒿琥酯对卡氏肺孢子虫 5SrRNA基因、线粒体rRNA大亚基基因 (mtLSUrRNA)、胸腺嘧啶核苷酸合成酶 (TS)基因的影响。方法　以上述 3种药物治疗实验大鼠肺孢子虫肺炎 ,治疗结束后收集鼠肺 ,以酚 -氯仿抽提法抽提肺总DNA。以PCR方法扩增肺孢子虫的上述 3基因 ,以双脱氧末端终止法测定PCR产物的核苷酸序列 ,并研究双氢青蒿素对基因序列的影响。结果　 3种药物作用过的虫体均未见TS基因扩增产物 ,部分虫体无 5SrRNA基因、mtLSUrRNA基因扩增产物。经双氢青蒿素作用过的与正常肺孢子虫的 5SrRNA基因、mtLSUrRNA基因分别有16 5 %、15 .2 %序列差异。结论 3种青蒿素衍生物可破坏肺孢子虫TS基因。双氢青蒿素可致 5SrRNA基因、mtLSUrRNA基因序列发生变异     

某些血液病继发血红蛋白异常的临床意义(附98例报告)

近年来,国内外一些文献报导,在一些获得性疾病而并不存在地中海贫血的患者有正常的血红蛋白A_2或HbF比率改变,少数出现HbH,这有可能造成误诊。但亦有希望通过此种获得性血红蛋白异常的研究进一步了解血红蛋白合成及调节的机制,这对于探索血红蛋白病的治疗和进一步了解某些疾病继发血红蛋白异常的规律性较有意义。例如当某些疾病缓解时,此种继发性的血红蛋白异常亦消失,这有助于对病情及预后判断。为了探索HbH、HbA_2及HbF在某些血液病的诊断意义。我院近2年对各种类型的白血病、血液系统肿瘤、再生障碍性贫血(再障)、阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)等共98例进行治疗前的血红蛋白电泳检查,并分析其临床意义。     

微生物介导的利什曼原虫KMP11疫苗的研制现状

利什曼原虫引起的利什曼病是一种严重危害人类健康的寄生虫病,采用疫苗防治该病是当前研究的热点领域之一。动基体膜蛋白11(KMP11)抗原是一种有效的疫苗候选分子,本文综述了牛痘病毒、疱疹性口炎病毒、腺病毒血清型5、刚地弓形虫和蜥蜴利什曼原虫等微生物介导的利什曼原虫KMP11疫苗的研制现状。     

细粒棘球绦虫Eg95基因工程疫苗研究进展

细粒棘球蚴病(echinococcosis)是由细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)的中绦期幼虫寄生在人体肝、肺等脏器引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病.手术及药物治疗都因其局限性而受到限制,有保护作用的疫苗将成为控制该病流行的有效工具.目前最为成功的棘球蚴病疫苗为Eg95疫苗,作者综述了细粒棘球绦虫Eg95基因工程疫苗的研究进展.     

日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

目的构建日本血吸虫重组质粒pET32_α-Sj32,研究该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法超声粉碎日本血吸虫成虫,提取总RNA,通过RT-PCR扩增Sj32抗原编码基因,克隆至原核表达载体pET32_α(+),构建重组质粒pET32_α-Sj32,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析和鉴定。结果 RT-PCR扩增出1270bp的Sj32基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj32基因成功插入pET32_α中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量单位约为55 ku的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的23%;Western blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别。结论成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32_α-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。     

扫描电镜观察双氢青蒿素对大鼠体内卡氏肺孢子虫表面形态的影响

目的研究双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫表面结构的影响.方法 Wistar大鼠皮下注射地塞米松磷酸钠7周诱导建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型,用双氢青蒿素治疗大鼠,并用扫描电镜观察大鼠肺组织卡氏肺孢子虫表面结构的变化.结果扫描电镜下,卡氏肺孢子虫表面有密集的类似微绒毛的结构,呈念珠状或小簇状,通过其丝状伪足可与Ⅰ型肺泡上皮细胞或虫体间相粘连.经双氢青蒿素治疗后,卡氏肺孢子虫表面微绒毛脱落,残存微绒毛变形,虫体表面出现凹陷,表膜出现较大较深的缺损.结论双氢青蒿素可破坏卡氏肺孢子虫表膜.     

多房棘球绦虫基因研究进展

多房棘球绦虫 (Echinococcus multilocularis,Em)属绦虫纲 (Class cestode) ,其成虫寄生于狐等终宿主小肠内 ,呈扁平多带状小型寄生虫 ,幼虫寄生于以野生啮齿动物为主的中间宿主 ,如野鼠等的肝、肺等器官中。流行区家养的食肉动物如猫、狗等可因捕食中间宿主或喂食被 Em幼虫感染的动物内脏而感染成为终宿主 ,排泻虫卵 ,造成与之接触的人的感染 [1 ]。继绦期幼虫寄生于人体内 (多见于肝 )浸润迁移生长 ,类似癌症 ,危害极大 ,被视为最致命的蠕虫感染之一。 Em幼虫寄生所致的疾病称为多房包虫病或多房型棘球幼病(Alveolaris Echinococcosis,…     

聚合酶链反应结合非放射性标记探针检测粪便中微小隐孢子虫

目的：利用非放射性标记探针技术检测经聚合酶链反应扩增后的人粪便中微小隐孢子虫DNA，观察该方法的特异性和敏感性。方法：用裂解法从粪便标本直接制备微小隐孢子虫模板DNA，用一对人工合成的寡核苷酸作PCR引物，扩增长度为452bp的微小隐孢子虫目的DNA片段。将扩增产物直接点在或经Southern印迹法转移到硝酸纤维素膜上，再和生物素标记的寡核苷酸探针杂交，经底物（BCIP）呈色观察。结果：阳性杂交信号只见于微小隐孢子虫DNA扩增产物，而约氏疟原虫、杜氏利什曼原虫、贾第虫、白色念珠菌、大肠杆菌和人白细胞DNA均无杂交信号。PCR结合斑点杂交或Southern印迹法检测隐孢子虫DNA 的敏感性均为011 pg。结论: 非放射性探针检测人粪便隐孢子虫DNA 的PCR 扩增产物, 具有敏感性高、特异性强、操作较简便及无放射性污染等优点。     

多房棘球绦虫重组抗原研究

应用基因工程技术检测多房棘球绦虫诊断抗原已成为多房棘球蚴病(泡型包虫病)研 究的热点。本文综述了多房棘球绦虫和幼虫抗原基因的克隆、表达、测序,与其它蠕虫基因的比较 及重组抗原用于血清检测的效果和应用前景。