细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后Th1/Th2型免疫应答的动态观察

目的:动态观察细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31疫苗免疫小鼠后Th1/Th2型免疫应答的变化.方法:将5×108克隆形成单位(CFU)和5×105CFU疫苗分别采用口服灌胃和鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18和20周各剖杀4只小鼠,收集血清,用ELISA法测定血清IgG及其亚类和IgE水平;无菌取脾,用ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平.结果:口服免疫组小鼠血清IgG、IgG2a 、IgG2b、IgG1、IgG3和IgE水平分别在免疫后8～10周、2～20周、2～20周、4～8周、6～12周和10周显著升高,脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～16周、2～12周、2～6周和4～12周显著升高;鼻腔内接种组小鼠血清IgG、IgG2a 、IgG2b、IgG1、IgG3和IgE水平分别在免疫后4～10周、4～20周、2～20周、2～12周、4～12周和10～12周显著升高,脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后2～8周、2～12周、2～8周和6～16周显著升高.结论:细粒棘球绦虫重组Bb-Eg95-EgA31疫苗可诱导小鼠产生1个Th1/Th2混合型免疫应答.口服免疫和鼻腔内接种是两种较好的免疫途径,且前者优于后者.     

曼氏血吸虫Sm28GST疫苗研究进展

曼氏血吸虫病(Schistosomiasis mansoni)是由曼氏血吸虫(Schistosoma mansoni,Sm)引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,主要流行于非洲、拉丁美洲和亚洲的53个国家和地区。本文综述了Sm28GST蛋白分子、DNA疫苗、rSt疫苗以及rBCG疫苗等方面的研究进展。     

细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95的构建及其在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达

目的构建细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95,并研究该质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达。方法超声粉碎细粒棘球蚴组织提取总RNA,通过RT—PCR扩增Eg95抗原编码基因;克隆至原核表达载体pGEX—1λT,构建重组质粒pGEX-Eg95;转化大肠杆菌BL21,经异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达后用SDS-PAGE和Western blowing对表达产物进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出471bp的Eg95抗原编码基因;双酶切证实Eg95抗原编码基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达产物为相对分子质量约42500的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的21％;Western blot鉴定显示重组蛋白能被细粒棘球蚴感染鼠血清识别。结论成功构建了细粒棘球绦虫重组质粒pGEX-Eg95,该质粒在大肠杆菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性。     

多房棘球蚴病诊断抗原研究进展

多房棘球绦虫特异性和保护性抗原的研究是多房棘球蚴病免疫和诊断的基础。由于天然抗原来源有限,应用受到限制,重组抗原的研制则可解决质量控制和抗原来源的问题。本文就近年来国内外对多房棘球蚴病诊断抗原尤其是重组抗原的研究进展进行了综述。     

恶性疟原虫FCC1/HN株环子孢子蛋白基因在BCG中的表达

卡介苗 (ＢＣＧ)由于其广泛应用的安全性和免疫佐剂作用 ,因而近年来以ＢＣＧ为载体的重组疫苗研究日益受到重视[1] 。环子孢子蛋白 (ｃｉｒｃｕｍｓｐｏｒｏｚｏｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎ ,ＣＳＰ)分子量为 4 0～ 6 0ｋＤａ,是一种覆盖于子孢子表面的蛋白 ,是目前已鉴定的子孢子特异性抗原分子 ,也是疟疾疫苗候选抗原之一[2 ] 。本研究将克隆有ＣＳＰ基因的重组大肠杆菌 分枝杆菌穿梭表达质粒ｐＢＣＧ/ＣＳＰ通过电穿孔转化法导入ＢＣＧ ,观察其在ＢＣＧ中的表达情况。1　材料与方法1.1　主要试剂、载体及宿主菌　丙烯酰胺、Ｎ′,Ｎ′ 丙烯酰胺…     

恶性疟原虫FCCl/HN株环子蛋白基因在BCG中的表达

卡介苗(BCG)由于其广泛应用的安全性和免疫佐剂作用,因而近年来以BCG为载体的重组疫苗研究日益受到重视[1].环子孢子蛋白(circurmporozoim protein,CSP)分子量为40～60kDa.是一种覆盖于子孢子表面的蛋白,是目前已鉴定的子孢子特异性抗原分子,也是疟疾疫苗候选抗原之一[2].本研究将克隆有CSP基因的重组大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG/CSP通过电穿孔转化法导人BCG,观察其在BCG中的表达情况.