日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32的构建及其在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达

目的 构建日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,分析该质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达情况.方法 超声粉碎日本血吸虫成虫提取总RNA,通过RT-PCR扩增获得Sj26GST和Sj32抗原编码基因,然后采用基因拼接法(gene SOEing)剪接Sj26GST和Sj32,得到Sj26GST-Sj32融合基因,克隆至原核表达载体pET32α(+),构建重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,转化人大肠埃希菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达后用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行分析和鉴定.结果 基因拼接法扩增出约1991 bp的Sj26GST-Sj32融合基因;双酶切和PCR鉴定证实Sj26GST-Sj32融合基因成功插入pET32a(+)中,SDS-PAGE分析显示表达产物为分子质量约82000 Mr的重组蛋白,与预期结果一致,表达的蛋白约占菌体总蛋白的22%;Westem-blot鉴定重组蛋白能被日本血吸虫感染的兔血清识别.结论 成功构建了日本血吸虫重组质粒pET32α-Sj26GST-Sj32,该质粒在大肠埃希菌BL21中获得了高效融合表达,表达的融合蛋白具有特异的抗原性.     

骨髓腔内给药治疗急性白血病20例临床分析

1980年10月以来我院血液内科将骨髓腔内给药治疗各型急性白血病列为计划,现将资料完整的20例治疗效果报告如下: 一、临床资料本文病例系1980年10月～1981年7月在我院住院经骨髓检查确诊为急性白血病共20例,采用骨髓腔内给药配合全身化疗,其中男15例,女5例,年龄16～58岁。白血病类型:急淋7例,急粒10例,急单3例。诊断和疗     

杂合子地中海贫血11个家族33例的临床和实验研究

本文作者于1981年3～6月在海南黎族、苗族自治州4县1市调查21,446人,发现F地中海贫血患者60人,随机选择11个家族作进一步调查,结果在60名家系成员中又发现杂合子F地中海贫血33例并进行了有关遗传、生化、临床和实验研究,现综合报告如下。材料和方法一、调查对象:海南黎族、苗族自治州琼中、保亭、乐东、崖县及通什等4县1市的大、中、小学生共21,446人,对F地中海贫血11个家族33例阳性患者进行有关调查研究。二、调查研究项目:包括临床和家族病史的询问、体检、血常规、红细胞形态观察,红     

血吸虫病DNA疫苗研究进展

血吸虫病疫苗研究已有 6 0多年的历史 ,大体上经历了死疫苗、减毒活疫苗和分子疫苗这几个研究阶段。死疫苗的抗感染效果很差 ,几乎不能诱导机体产生保护性免疫力 ;减毒活疫苗虽能产生明显的保护性免疫力 ,但存在抗原大批量供应及潜在致病性等缺点 ,其实际应用受到一定限制 ;分子疫苗比较完全 ,是一种很好的血吸虫病疫苗 ,但它要经过基因克隆、表达和蛋白纯化等复杂过程 ,成本较高 ,因此尚需研制新型血吸虫病疫苗。Wolff等 [1 ]将编码功能蛋白的质粒 DNA肌肉注射小鼠 ,发现质粒 DNA可在局部肌肉组织表达。这种 DNA既是载体 ,又是抗原的来…     

蠕虫幼虫移行症——感染性疾病（7）

蠕虫幼虫移行症——感染性疾病（７）重庆医科大学传染病寄生虫病研究所（６３００４２）陈雅棠蠕虫幼虫移行症是临床常见的一组由动物寄生性蠕虫幼虫在人体内移行而引起的疾病。由于人不是适宜的终宿主，因此该类蠕虫幼虫在人体内一般不能发育成熟为成虫，但幼虫移行过程...     

重组细菌-St疫苗研究进展

细菌性疫苗简称菌苗,在控制鼠疫、炭疽、破伤风和结核等细菌性疾病方面作出了重要贡献。传统菌苗种类包括活菌苗、纯化菌苗或亚单位菌苗、类毒素和联合菌苗,现代菌苗则包括分子疫苗、DNA疫苗和微胶囊疫苗等,这些菌亩均存在这样或那样的副作用,因此尚需研究新型菌苗。     

白果内酯抗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究

目的　研究白果内酯治疗实验大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的疗效。方法　以地塞米松皮下注射大鼠 6周诱导建立肺孢子虫肺炎动物模型 ,用不同剂量白果内酯治疗实验大鼠 ,以免疫抑制为对照组 ,通过大鼠肺质量 /体质量的值 ,肺印片每视野的包囊均数为指标评价疗效。结果　白果内酯 2 0mg/kg、3 0mg/kg治疗组大鼠肺质量 /体质量的值分别为 0 0 0 97± 0 0 0 3 3、0 0 10 2± 0 0 0 2 1,明显低于免疫抑制组对照组 0 0 14 6± 0 0 0 3 4(P <0 0 5 )。白果内酯 2 0mg/kg、3 0mg/kg治疗组大鼠肺印片每视野的包囊均数分别为 2 3 1± 0 88、1 95± 0 5 7明显低于免疫抑制组对照组 7 3 9± 2 3 3 (P <0 0 1)。结论　白果内酯具有一定抗卡氏肺孢子虫肺炎作用     

网状细胞肉瘤误诊为恶性网状细胞病一例报告

目前对于淋巴——网状细胞系统疾病的概念、分类及命名等方面的认识尚较混乱,有各种各样的分类方法。恶性网状细胞病与国外所称的组织细胞性髓性网状细胞病为同一种疾病。国内对恶性网状细胞病陆续有报导。本病的病理、组织及临床表现变化多端,容易造成误诊。最近我院收治1例网状细胞肉瘤,初误诊为恶性网状细胞病,后经颈部淋巴结活检始证实为本病。兹报导如下: 患者男性,21岁,工人(住院号185590)。于入院前二月余感觉左下肢关节疼痛,但无红肿,入院前40余天开始出现颜面及下肢浮肿,伴发热,面色逐渐苍白,乏力,胃纳下降。在当地按风湿性关节炎治疗,曾使用过     

环介导等温扩增技术用于消化道细菌检测的研究现状

消化道细菌是消化道疾病的一种病原体。环介导等温扩增技术（LAMP）是一种新的核酸扩增技术,具有敏感性高、特异性强和简便快速等优点,可用于消化道细菌的快速诊断。本文拟就 LAMP 检测消化道细菌的研究现状加以阐述。