5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

目的:比较5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)于不同浓度、不同孵育时间对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSC)向心肌样细胞分化的影响;观察诱导后不同时间点心肌标志物的表达情况.方法:体外分离培养Wistar大鼠MSC,传代纯化后进行诱导实验.浓度分组(C1-C4):分别以3、5、10、20μmol/L5-aza处理24h,之后更换新鲜培养基继续培养.时间分组(T1-T5):以10μmol/L分别孵育6h、12h、24h、48h、72h,之后更换新鲜培养基继续培养.各组均于首次加药4周后行免疫细胞化学染色检测.RT-PCR检测10μmol/L5-aza处理后2、4、8周细胞GATA4mRNA、cTnTmRNA的表达情况.结果:经5-aza诱导处理后4周,C1-C4组Desmin及α-Sarcomeric Actin染色阳性率各组比较均无统计学差异(P＞0.05);而T1-T5各组其阳性率比较存在统计学差异(P＜0.01).RT-PCR显示,诱导后2周,GATA4mRNA开始表达,持续至8周;cTnTmRNA在诱导后2周无表达、4周时弱表达,8周时更为显著.结论:成年人鼠MSC在适当浓度5-aza处理后可以向心肌样细胞分化,在3μmol/L～20μmol/L范围内,5-aza浓度的变化对MSC的分化率影响较小;在48h内,适当延长5-aza的孵育时间可能增加MSC向心肌样细胞的转化率.     

普伐他汀对高胆固醇血症病人单核细胞CD11b表达和粘附的影响

目的:探讨普伐他汀对高胆固醇血症病人外周血单核细胞(PBMs)CD11b表达和PBMs与脐血管内皮细胞(HUVECs)粘附的影响.方法:9例单纯性高胆固醇血症病人服用普伐他汀10mg/d,共6周.治疗前后分离PBMs,测定PBMs CD11b表达差异和治疗前后PBMs与HUVECs粘附率的改变,并比较PBMs在体外经CD11bmAb封闭后的粘附率的变化.结果:治疗前后检测高胆固醇病人PBMs CD11b特异性平均荧光强度(sMFI),发现其治疗前sMFI较对照组增高(1570.35±375.18对920.40±207.60),相应的PBMs与HUVECs粘附率也高于对照组,为(27.86±5.52)%对(5.44±1.47)%;治疗后其sMFI降低至1064.81±372.52,PBMs与HUVECs的粘附率降低至(8.99±1.06)%.CD11bmAb体外封闭可特异地减少PBMs与HUVECs的粘附,但不能完全抑制.结论:普伐他汀抗动脉粥样硬化(AS)的作用可能除降脂以外,还存在其他途径,包括抑制PBMs CD11b表达和内皮功能改善作用等,小剂量普伐他汀仅有轻度调脂作用,但存在较显著的抗AS效应.     

灯盏细辛注射液对自发性高血压大鼠心室及血管重构的影响

目的：观察灯盏细辛注射液对自发性高血压大鼠（SHR）心室及血管重构逆转作用。方法：将10月龄SHR 24只按性别、体重、初始收缩压配对分为灯盏细辛、福辛普利、依那普利和生理盐水（对照）4组，各给药组给药剂量为10mg·kg^-1·d^-1腹腔内注射，连续8周。测定血压、心室重量指数及心肌细胞蛋白激酶C（PKC）活性，偏振光镜、透射电镜观察心脏、血管结构改变。图像分析计算心肌间质胶原面积及含量。结果：灯盏细辛、福辛普利、依那普利组左心室肥厚有不同程度的消退，心率、右心室心脏重量指数无明显变化（P＞0．05），福辛普利、依那普利组降压及减低左心室心脏重量指数比灯盏细辛组明显，但心肌细胞肥大、变性等镜下结构改善灯盏细辛组比福辛普利、依那普利组更明显。3种药物均能明显改善心肌间质及血管重构，灯盏细辛组心肌间质胶原面积、含量及胶原容积分数较对照组明显减少，3个用药组间差异无显著性（P＞0．05）。各用药组均能显著降低SHR心肌细胞膜PKC活性（P＜0．01），且灯盏细辛组较福辛普利、依那普利组更明显（P＜0．05）。结论：灯盏细辛可逆转SHR心肌、间质及血管重构，改善心肌僵硬度，具有心脏保护作用。     

坎地沙坦酯对急性心肌梗死大鼠血管内皮功能的干预影响

目的：研究坎地沙坦酯（candesartan cilexetil,CAN）对急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠血管内皮功能的干预。方法：将大鼠随机分为AMI组、ＣＡＮ组和假手术组,干预2周后处死,检测血压（blood pressure,BP）、血一氧化氮（nitric oxide,NO）、血管紧张素Ⅱ（angiotension Ⅱ,AngⅡ）含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性、离体胸主动脉条片舒缩功能。结果：与假手术组比较,AMI组血清NO含量、NOS活性降低,胸主动脉内皮依赖性舒张（endothelium-dependent diastole,EDD）功能减退,血浆AngⅡ含量升高,差异有统计学意义（P=0.000 4）。经ＣＡＮ干预后血清NO含量、NOS活性升高达假手术组水平,胸主动脉EDD显著改善（P=0.0009）,同时血浆AngⅡ含量升高,各组ＢＰ并无明显变化。结论：ＣＡＮ在不影响ＢＰ的前提下显著改善大鼠AMI后的血管内皮功能。     

奥美沙坦酯对AMI大鼠血管内皮功能和ERK/CREB mRNA表达的干预

目的 研究奥美沙坦酯对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠的内皮功能和细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)信号通路的干预.方法 将40只大鼠随机分为AMI组、奥美沙坦酯低剂量(olmesartan medoxomil low dose,OML)组、奥美沙坦酯高剂量(olmesartan medoxomil high dose,OMH)组和假手术(Sham)组,干预2周后处死,检测血压,血NO、AngⅡ含量,NOS活性,离体胸主动脉条片舒缩功能,MI面积及梗死区心肌中ERK、CREB mRNA表达水平.结果 与Sham组比较,AMI组血清NO含量、NOS活性降低,胸主动脉内皮依赖件舒张(endothelium-dependent diastole,EDD)功能减退,血浆AngⅡ含量升高,伴心肌组织ERK、CREB mRNA表达增加,差异有显著性.经奥美沙坦酯干预后,血清NO含量、NOS活性升高达Sham组水平,胸主动脉EDD显著改善,同时呈剂量依赖性升高血浆AngⅡ含量,缩小MI面积,降低ERK、CREB mRNA表达,而各组血压并无明显差异.结论 奥美沙坦酯在不影响血压的前提下显著改善AMI后内皮功能紊乱(Endothelialdysfunction,ED),缩小MI面积,并可呈剂量依赖性降低AMI大鼠心肌ERK、CREB mRNA表达.     

自发性高血压大鼠心肌间质重构的实验研究

目的：观察高血压心肌间质重构。方法：采用不同月龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）为实验动物模型,从胶原定性和定量指标观察心肌间质重构。结果：ＳＨＲ１０与ＷＫＹ１０比较胶原面积（交原容积分数（ＣＶＦ）增高１．４倍;ＳＨＲ１８－２２量高,与ＳＨＲ１０比较ＣＡ、ＣＶＦ增高２．４倍（ＫＰ〈０．０１）。ＣＶＦ比左室重量指数（ＬＶＷ／ＢＷ）增加更明显,结论：ＳＨＲ心肌间质、冠脉血管均发生了重构,ＳＨＲ１８－２２心肌     

灯盏花对自发性高血压大鼠心室重构的药物干预研究

目的　观察蛋白激酶C抑制剂—灯盏花对SHR心脏血管重构逆转作用。方法　将 10月龄 12只SHR(SHR10 )随机分为 :灯盏花 (SHRD)、和生理盐水组 (SHRc) ,均以 10mg·kg 1·d 1腹腔内射给药 8周。测定血压、心室重量指数 ,偏振光镜、透射电镜观察心脏、血管结构改变。图象分析计算心肌间质胶原面积、含量。结果　灯盏花组左心室肥厚不同程度消退 ,明显改善心肌细胞肥大、变性 ,胶原容积分数 (CVF)降低 (P <0 0 5 )。结论　灯盏花可逆转心室重构 ,改善心肌僵硬度 ,具有心脏保护作用。     

PPARs和NFκB在高脂血症大鼠内皮细胞中表达的研究

目的 :探讨核转录因子PPARα、PPARγ和NFκB在正常及高脂血症大鼠主动脉内皮细胞中表达的变化以及fibrate干预后炎性因子IL - 6的变化。方法 :取正常及高脂血症大鼠模型主动脉冰冻切片行免疫组化分析PPARα、PPARγ、NFκB和IL - 6的表达 ,PPARs的人工合成配体Gemfibrate和Bezafibrate干预后的变化及其关系。结果 :正常大鼠主动脉上有PPARα、PPARγ、NFκB和IL - 6的弱表达。高脂血症时 ,主动脉内皮细胞层PPARα、PPARγ、NFκB、IL - 6的表达增强 ,其OD值较正常大鼠显著增加 (P <0 .0 5 ) ,NFκB的活化明显。Fibrates药物干预后 ,血脂下降 (除HDL) ,PPARα、PPARγ进一步活化 ,IL - 6的表达减弱 ,对NFκB的表达无明显影响。结论 :核转录因子PPARs和NFκB在高脂血症人鼠内皮细胞中均显著增加。Fi brates类药物可通过活化相应受体PPARs部分抑制炎性因子的分泌。     

茶多酚对高脂环境中THP-1细胞核因子-κB、转化生长因子-β1 mRNA表达的影响

目的 :观察茶多酚 (TP)对单核细胞源性泡沫细胞核因子 -κB(NF -κB)、转化生长因子 - β1(TGF -β1)mRNA表达的影响。方法 :分别用极低密度脂蛋白 (VLDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL)诱导人髓系白血病单核细胞株THP - 1细胞向泡沫细胞转化 ,加入TP干预后检测细胞NF -κB的核移位率、TGF - β1mRNA阳性指数、细胞内胆固醇含量等。结果 :茶多酚浓度为 0 4 - 4 0 μg/L时细胞NF -κB的核移位率、TGF - β1mR NA阳性指数、细胞内胆固醇含量等均低于未用TP干预的细胞 (P <0 0 5 )。结论 :一定浓度的TP对高脂环境中单核-巨噬细胞NF -κB活化、TGF - β1mRNA表达有抑制作用 ,并阻止泡沫细胞形成。     

心肌梗死患者血管内皮功能的超声检测

目的：研究心肌梗死患的血管内皮功能。方法：心肌梗死（MI）患10例，以血管多普勒超声测定外周肱动脉血管内皮依赖性舒张功能（EDD）和内皮非依赖舒张功能（NEDD）。结果：MI患血管内皮功能包括EDD和NEDD均较正常对照组明显障碍。结论：心肌梗死患的血管内皮功能明显障碍。