bcr-abl融合基因反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病原代白血病细胞抑制作用的体外实验研究

目的：研究两种类型（b2a2和b3a2）bcr-abl反义寡核苷酸(Aspo)对慢性粒细胞白血病(CML)原代白血病细胞作用效果。方法：合成硫代磷酸反义寡核苷酸(Aspo)，CML细胞经bcr-abl Aspo作用后，台盼蓝拒染法计算活细胞数；甲基纤维素半固体培养法培养造血祖细胞集落；流式细胞仪检测细胞P210蛋白表达率；半定量RT-PCR检测细胞bcr-abl mRNA表达情况。结果： 16例CML患者经两种类型bcr-abl Aspo作用后，活细胞数及造血祖细胞集落数均有不同程度减少，其中慢性期与急变期比较无显著差别(P>0.05)，且两种类型之间存在交叉抑制作用。正常人外周血或骨髓分离的单个核细胞经bcr-abl Aspo处理后，CFU-GM形成无明显变化。16例CML原代白血病细胞经bcr-abl Aspo作用后9例P210转阴，7例残存克隆细胞bcr-abl mRNA完全受抑制，未完全受抑制者其表达率均不同程度低于空白组，正义Spo作用组未见明显改变。结论：bcr-abl反义寡核苷酸具有一定抗慢性粒细胞白血病效果，对正常细胞CFU-GM无影响，提示它有可能成为CML自体骨髓移植或外周血干细胞移植体外净化的一种有效方法。     

TF-1细胞凋亡相关基因19在系统性红斑狼疮发病中的作用

目的:探讨TF-1细胞凋亡相关基因19(TFAR19)在系统性红斑狼疮(SLE)发病诱因中的作用及其与SLE病情的关系。方法:应用倒置相差显微镜、Ladder方法、Western blotting方法、荧光免疫显微镜、ELISA方法检测中波紫外线(UVB)诱导HaCaT细胞凋亡时TFAR19的表达及其与SLE患者病情的关系。结果:在剂量为30mJ/cm²的UVB照射24h后,HaCaT细胞开始凋亡,TFAR19在此过程中有表达,发现活动期SLE患者血清中TFAR19的抗体值高于稳定期和正常对照组的值(P≤0.05)。结论:在UVB诱导角质形成细胞HaCaT凋亡的过程中,有TFAR19的参与并发挥了作用,提示TFAR19可能和SLE的发病和病情有关。     

RISE与PBL教学模式在医学免疫学教学中的探索

“以文献为导向的自我学习”（Reference—Induced Self-Education，RISE）教学模式是一种适用于医学低年级学生学习前期基础课程教学的PBL教学模式。文章对RISE教学模式在医学免疫学课程教学中的应用及其效果进行分析，探索多种PBL教学模式在我国基础医学教学改革中的作用。     

志苓胶囊对小细胞肺癌细胞株NCI-H446细胞凋亡及h-TERT、CD44表达的影响

目的研究志苓胶囊(抗癌复方Ⅱ号)对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446诱导凋亡作用机制以及对细胞黏附分子表达的影响。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成份配制成相应的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,倒置显微镜观察、Hochest33258荧光染色法检测凋亡细胞,RT-PCR、Western blot、流式细胞仪分别检测bcl-2、bax、hTERT基因mRNA和相应蛋白表达水平变化以及黏附分子CD44的表达变化。结果NCI-H446经不同的药物组处理后,倒置显微镜、Hochest33258荧光染色可观察到细胞凋亡形态学改变,bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平均有不同程度下降,bax基因表达水平则有不同程度增强,复方组改变最明显,各药物组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。中药组和西药组hTERT基因和蛋白表达水平未见明显改变,复方组表达水平下调,与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。各药物组CD44表达水平降低,其中复方组降低水平最明显(P<0.01)。结论志苓胶囊可能通过下调NCI-H446细胞bcl-2、hTERT基因和CD44分子表达,增强bax基因表达,从而诱导NCI-H446细胞凋亡,抑制细胞黏附、转移。     

大黄素对K562细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用

本研究观察中药大黄素（emodin）对人慢性髓系白血病K562细胞株的增殖及凋亡影响,探讨P210融合蛋白和caspase-3激活在其中的作用。采用MTT法、集落形成试验观察大黄素对K562增殖的影响;AnnexinV FITC／PI法、DNA倍体分析及DNA凝胶电泳法检测细胞凋亡;Westem blot检测大黄素作用后不同时间段P210、磷酸化P210、caspase。3前体蛋白及PARP表达水平的变化。结果表明,大黄素能抑制K562细胞增殖,作用48小时的半数抑制浓度（IC50）为38．25μmol/L;Annexin V FITC／PI法、亚二倍体峰（凋亡峰）及DNA片段化检测证实,大黄素能诱导K562细胞凋亡,并呈量效关系。大黄素作用飚62细胞后P210、磷酸化P210、caspase-3前体蛋白表达水平均有不同程度下调,PARP的活性片段85kD表达增加,这些变化呈时效关系。结论：大黄素能够有效抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡。P210磷酸化抑制,P210表达下调和caspase-3激活可能参与了该过程。     

几种不同方式诱导Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19的表达

为探讨一个新的细胞凋亡相关基因--TFAR19所参与的凋亡途径,我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19表达的变化.采用去除血清,VP-16作用及Fas单抗活化受体等方法诱导Jurkat细胞凋亡后,以RT-PCR方法检测mRNA水平TFAR19的表达,用流式细胞术及Western印迹检测蛋白水平TFAR19的表达.实验结果显示,Jurkat细胞在去除血清12小时,VP-16作用2小时,以及Fas单抗诱导细胞凋亡2小时后,在mRNA及蛋白水平TFAR19的表达都呈增高趋势.结论提示,TFAR19参与了去除血清、DNA损伤及死亡受体激活所诱导的细胞凋亡过程,它在细胞凋亡过程的早期开始发挥作用,TFAR19是细胞凋亡途径中的"终末共同通路"的参与者.     

哮喘儿童家庭环境因素分析

[目的]探讨家庭环境因素对哮喘儿童的影响.[方法]选用家庭环境量表中文版(FES-CV)对51名哮喘儿童和51名正常儿童进行评定.[结果]哮喘儿童家庭的亲密度、情感表达、成功性、娱乐性及组织性等因素评分明显低于对照组,而家庭的矛盾性评分则高于对照组.[结论]哮喘儿童处在相对不良的家庭环境中,提示在治疗儿童支气管哮喘时,应重视患儿家庭环境的改善.     

以特殊表现为首发症状的小儿急性白血病14例误诊分析

以特殊表现为首发症状的小儿急性白血病１４例误诊分析金淑焕金政金莲花陈英玉车善午急性白血病在小儿恶性肿瘤中发病率最高，且其死亡率也在恶性肿瘤中占首位。小儿急性白血病典型病例诊断不难。但以特殊表现为首发症状者易误诊。我们从１９８６年１月—１９９５年１２月...     

Bcl-2反义硫代寡核苷酸规模化化学合成

目的 建立规模化合成Bcl-2反义硫代寡核苷酸合成工艺。方法 合成采用亚磷酰胺法，泵驱动，流过式反应；紫外分光光度计测其D260nm值；通过DNAPacPA-100分析柱对合成粗产品进行分析。结果 合成周期5h左右，平均合成效率98．4％，总产率76．2％，186μmol合成柱获得粗产品0．75g，色谱柱分析显示各组分都获得分离，最强峰保留时间32．247min，相对峰面积57．68％。结论 本所研究开发规模化合成工艺可获得高产率的反义寡核苷酸，为反义药物开发奠定基础。     

几种子同方式诱导Jurkat细胞凋亡过程中TFAR19的表达

为探讨一个新的细胞凋亡相关基因－ＴＦＡＲ１９所参与的凋亡途径,我们研究了几种不同方式诱导白血病细胞株Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡过程中ＴＦＡＲ１９表达的变化。采用去除血清,ＶＰ－１６作用及Ｆａｓ单抗活化受体等方法诱导Ｊｕｒｋａｔ细胞凋亡后,以ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ｍＲＮＡ水平ＴＦＡＲ１９的表达,用流式细胞术及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测蛋白水平ＴＦＡＲ１９的表达。实验结果显示,Ｊｕｒｋａｔ细胞在去除血清１２小时,