FITC-直标单抗及应用

随着单克隆抗体技术的发展,目前出现了许多抗人T细胞表面抗原的单克隆抗体,对这些表面抗原的检测,国内学者大多利用间接免疫荧光技术。我室用异硫氰酸荧光素(FITC)成功地标记了多种抗人体T细胞亚群的单克隆抗体,这对研究T细胞亚群在感染性疾病、自身免疫性疾病、免疫缺陷性疾病中的变化,以及检测免疫抑制治疗等提供了有力工具。 OKT系列单克隆抗体为从美国ATCC公司引进的细胞株,由本室制备。抗-CD3(OKT3)、抗-CD4(OKT4)、抗-CD8(OKT8)、抗-CD2(OKT11)、抗-CD1(OKT6)、抗-CD38(OKT10)、抗-CD11b(OKM1),还有抗HLA—Ⅰ类抗原及HLA—Ⅱ类抗原的单抗。各种单抗腹水用硫酸铵粗提丙球和经SPA-     

人类新细胞因子(CKLF-1)在大肠杆菌中的表达与鉴定

目的：进一步研究人类新细胞因子－－趋化素样因子1（CKLF－1）蛋白的结构与生物学活性。方法：构建了融合蛋白的原核表达质粒，并在大肠杆菌中进行诱导表达，获得了原核表达的融合蛋白，经凝血酶切割获非融合重组蛋白，并进行体外活性鉴定。结果：CKLF－1原核表达蛋白获得了高表达，纯化后获得约90％纯度以上蛋白，发现其可以与肝素结合，生物学活性检测表明其对人中性粒细胞，外周血单个核细胞和大鼠的巨噬细胞具有明显的趋化作用。结论：CKLF－1原核表达蛋白具有与真核表达蛋白类似的生物学活性。     

氚标记的Bcl-2反义核酸(F951)在小鼠体内的药代动力学实验研究

目的　研究一种新的氚标记的Bcl 2反义寡核苷酸 3H F95 1单次静脉注射后在小鼠体内的药代动力学过程。方法　用氚标记F95 1,用液闪仪检测放射性浓度 ,用 3P87软件判断房室模型 ,计算各种参数。用液闪仪检测3H F95 1在小鼠体内各器官中的分布浓度 ,检测给药后 72h内药物从小鼠尿和粪中排泄的量。结果　3H F95 1单次静脉注射后在小鼠体内的动力学过程符合二室模型 ,3种剂量时主要的参数血浆分布半衰期 (T1/ 2α)在 10～ 15min之间 ,消除半衰期 (T1/ 2 β)在 2～ 4 5h之间。3H F95 1在肾、肝、脾、骨髓中分布浓度高于其它器官 ,在心、肺、脑、肠、皮肤、脂肪、生殖腺中也有低水平的分布。3H F95 1主要经肾从尿中排泄 ,给药后 2 4h内的累积排泄量占给药量的 5 0 47%。3H F95 1从粪中排泄的量甚微。结论　3H F95 1在小鼠体内药代动力学过程的研究为其进一步的开发具有指导价值     

家庭环境与学习障碍儿童行为的相关分析

目的探讨学习障碍(Learning Disorders,LD)儿童的家庭环境特点及其与儿童行为特征的相关性.方法选用家庭环境量表中文版(FES-CV)、Conners父母症状问卷(PSQ)分别对31例LD儿童和31例对照组儿童进行评定.结果LD儿童家庭的亲密度、情感表达、知识性的评分低于对照组(P＜0.05),而家庭的矛盾性评分则高于对照组(P＜0.05);LD儿童在PSQ量表中品行问题、学习问题、冲动-多动、多动指数的评分及总分高于对照组(P＜0.01).结论LD儿童处在一个相对不良的家庭环境中,家庭环境的某些因素与LD儿童的行为特点存在不同程度相关性.     

中波紫外线诱导HaCaT细胞凋亡中TF-1细胞凋亡相关基因19的表达

目的：研究在中波紫外线(UVB）诱导正常永生化角质形成细胞(HaCaT）凋亡过程中，T细胞凋亡相关基因19(TFAR 19）的表达时相及位置，方法：使用流式细胞仪、膜联蛋白V(Annexin—V）、激光扫描共聚焦显微镜等方法进行研究。结果：在凋亡过程中，TFAR 19逐渐向核周聚积，最后向核膜内移位，在核膜及其周围以及核内表达。结论：在UVB诱导HaCaT细胞凋亡的早期和晚期过程中TFAR 19均有表达。     

TFAR19蛋白在系统性红斑狼疮患者血清中水平的检测

系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus,SLE)发病机制复杂 ,至今其病因不清 ,近年来对于凋亡及基因的研究较热。在SLE患者的外周血和皮损中 ,存在着凋亡细胞增多的情况[1 4] ,而且有一些凋亡相关基因表达增多并和病情有相关的趋势[2 ] 。北京大学医学部医学分子免疫重点实验室克隆得到人类新基因TFAR1 9[5 8] ,那么在凋亡增多的SLE患者中TFAR1 9的表达情况及活动期SLE患者、稳定期SLE患者和正常人的血清中TFAR1 9蛋白 (即抗原 )的具体情况如何 ,及其相应的临床意义目前国内外还无人研究。　　　　1　资料和方法1 1　临床…     

抗rhG—csf单克隆抗体相对亲和力分析

目的；检测鼠抗人Ｇ－ｃｓｆ单克隆抗体的相对亲和力。方法：采用间接酶联免疫吸附试验。结果；各株单抗结合抗原的相对亲和力不同、根据５０％最大结合浓度分为２组，其中４株杂交瘤上清ＭｃＡｂｓ与纯化腹水ＭｃＡｂｓ测得结果基本吻合。结论：实验结果为合理运用这些单抗提供了重要依据。     

正常人外周血TCR的检测

正常人外周血ＴＣＲ的检测陈英玉，马树俊，龙振洲，陶家平（北京医科大学免疫学教研室北京１０００８３）大多数Ｔ细胞的ＴＣＲ是由αβ链组成的异二聚体，少数Ｔ细胞的ＴＣＲ是由γδ链组成。由于在免疫缺陷等免疫性疾病中发现有较高水平的ＴＣＲγδ￣＋细胞￣［１－３...     

大黄素对U937细胞凋亡及细胞周期相关基因的影响

本研究旨在观察中药大黄素（Emodin）诱导人髓系白血病细胞株U937细胞的凋亡及凋亡时细胞周期相关基因的变化。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测60μmol/L大黄素作用前后U937细胞C-MYC、h-TERT、PIM-2、Survivin、野生型P53、P21、TG Fβ1、MCL-1等基因表达的变化。结果表明：随着大黄素作用时间的延长U937细胞C-MYC、h-TERT、PIM-2、Survivin基因表达逐渐减少,而野生型P53、P21、TGFβ1基因表达逐渐升高,MCL-1基因表达无明显改变。结论：大黄素诱导的U937细胞凋亡是多因素启动和网络调节的结果。