STI571诱导K562细胞凋亡机制研究

目的　研究格列卫 (Glivec ,STI5 71)诱导P2 10BCR/ABL(+)K5 6 2细胞凋亡机制。方法　采用Annexin Ⅴ /PI双染实验、DNA的PI染色、碘化二己基恶碳菁 (DiOC6 [3])染色、2 ,7 二氯荧光素二乙酸酯 (DCFH DA)染色及DNALadder等方法测定凋亡细胞。利用Westernblot实验分析K5 6 2细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平 ,测定Bcl XL、caspase 3蛋白的表达并分别测定线粒体及胞浆部分的细胞色素C(cytoC)蛋白。结果　STI5 71可诱导K5 6 2细胞凋亡 ,出现DNA亚二倍体凋亡峰及DNALadder,线粒体跨膜电位及活性氧物质降低 ,P2 10BCR/ABL酪氨酸磷酸化水平降低 ,Bcl XL、蛋白减少 ,caspase 3蛋白前体活化降解出相对分子质量为 2 0× 10 3 亚单位 ,胞浆部分出现cytoC ,同时线粒体cytoC减少。结论　STI5 71可迅速使P2 10BCR/ABL酪氨酸磷酸化水平下降 ,线粒体cytoC胞浆转位介导的信号通路是STI5 71诱导K5 6 2细胞凋亡的途径之一 ,STI5 71是有效的基因靶向治疗剂     

四色流式细胞术分析B细胞型急性淋巴细胞白血病免疫表型

为了研究国人B细胞型急性淋巴细胞白血病(B-ALL)免疫表型特点，使用了四色流式细胞术CD45／SSC 设门分析181例B-ALL的免疫表型。研究结果发现，所有检测病例CDl9阳性率100％，HLA-DR阳性率98．9％，CD38，CD10和CD34阳性率分别为88．5％，76．8％和76．8％，CD117与T系抗原CD2和CD7在B-ALL中很少表达。儿童组(≤14岁)CD10比例较高，青少年(15-18岁)和成人组(≥19岁)髓系相关抗原CD13和(或)CD33表达较高。各年龄组CD10 ／CD34 型比例最高，随年龄增长CD10 /CD34 型比例升高。CD10-CD34 型伴殖系抗原表达率明显高于其它亚型。与CD45 病例相比，CD45-或CD45 /-病例常伴有较高的CD10表达。43例标本RT-PCR检测bcr／abl结果显示：bcr／abl 组和bcr／abl-组伴殖系抗原表达率无显性差弄，m-bcr／abl 主要见于CD10／CD34 型。结论：典型的B-ALL细胞表达CD19和HLA-DR，不表达CD117。不同发育阶段CD34，CD10和CD45表达不一。青少年组免疫表型与成人组相似。CD45 多见于CD10-B-ALL。儿童组殖系抗原表达率较低。m-bcr／abl 多见于CD10／C1)34 型B-ALL。     

甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病慢性期100例追踪观察

目的评价甲磺酸伊马替尼治疗Ph阳性（Ph^＋）慢性粒细胞白血病（CML）慢性期的有效性与安全性。方法100例Ph^＋CML第1次慢性期（多为干扰素仅治疗失败的晚慢性期）患者持续口服甲磺酸伊马替尼400mg／d（93例）或600mg／d（7例）。结果中位追踪49．0（4，5—58．0）个月，累积获得的完全血液学缓解率为100％，主要细胞遗传学缓解（MCyR）率为86．0％，完全细胞遗传学缓解（CCyR）率为76．0％，CCyR患者中主要分子学缓解率为68．8％，完全分子学缓解率为26．6％，预计54个月无疾病进展率和总生存率分别为90．0％和92．6％。治疗中，18．0％和28．0％的患者分别出现了Ⅲ级白细胞和血小板减少。多因素分析显示，年龄≥60岁（P=0．033，RR：4．196）和治疗前外周血中嗜碱粒细胞比例≥0．05（P=0．012，RR=4．173）为独立预示Ⅲ级白细胞减少发生的危险因素。非血液学毒性发生普遍，大多程度轻微。10．0％和13．0％的患者分别检出了Ph^＋和Ph^＋细胞克隆演变，除个别Ph^＋细胞克隆演变者外多数处于疾病稳定状态。多因素分析显示，治疗前骨髓中存在高比例（100％）的Ph^＋细胞（P=0．027，RR=0．523或P=0．004，RR=0．424）和治疗中出现Ⅲ级白细胞减少（P=0．001，RR=0．306或P=0．004，RR=0．337）为独立影响MCyR或CCyR获得时间和比例的不利因素。结论甲磺酸伊马替尼明显提高Ph^＋CML慢性期患者的细胞遗传学和分子学疗效，改善生活质量，延长无疾病进展生存期。     

抗PML抗体免疫荧光法快速诊断急性早幼粒细胞白血病

对35例白血病病人骨髓标本进行抗PML抗体免疫荧光测定。19例急性早幼粒细胞白血病(APL)标本中,11例未治、3例服ATRA4天以内,以及3例复发病人均为典型APL荧光表现,2例ATRA诱导完全缓解APL病人荧光表现为非APL型。16例未治的非APL病人均为典型非APL表现。研究结果表明,抗PML抗体免疫荧光法简便、快速、特异,适于诊断未治和复发的APL病人。     

评判性思维教学实践及效果评价

目的探讨评判性思维课程的教学内容、方法及其效果评价。方法在护理专业高年级学生中开设思维与沟通课程。针对专科、专升本和本科不同的教学计划,以相同的评判性思维相关教学内容、不同的教学方式进行评判性思维的教学活动。在教学活动的前、后,分别组织不同层次的226名护生集中填写评判性思维倾向的测量表(CTDI-CV)进行对照分析。结果座谈会中护生普遍反映教学效果良好,与评判性思维能力倾向的测量表(CTDI-CV)统计结果一致。教学后专科、专升本和本科学生总体评判性思维倾向均提高,差异均有统计学意义(P<0.05);另外,专科、专升本和本科学生在寻找真相、系统化能力和自信心等评判性思维能力倾向的特质方面均提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论选择合适的教学内容,运用多种形式的教学活动对提高学生评判性思维倾向是可行并有效的。     

CD123在急性早幼粒细胞白血病微小残留病检测中的应用

为了探讨CD123联合应用其它免疫标志检测急性早幼粒细胞白血病(APL)中微小残留病(MRD)的作用及意义,采用四色流式细胞术(FCM)分析了186例初诊APL患者的免疫表型特点及20例正常骨髓中与APL细胞表型相同的细胞所占比例,并应用以CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的4色抗体组合对172份标本进行MRD检测并与实时定量PCR结果相比较。172份标本包括19例连续随访APL患者的116份骨髓或外周血标本和47例距初诊3个月至2年不等的非连续随访患者的56份骨髓标本,其中形态学完全缓解(CR)后117份,CR前55份标本。对18份标本同时加做抗体组合CD9/CD117/CD34/CD33检测。结果表明:初诊APL患者除高表达CD9、CD33、CD117和低表达CD34、HLA-DR外,CD123的阳性表达率为100%(30/30);正常骨髓中CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞和CD117+CD34-CD9+CD33+细胞在有核细胞中的比例分别为(0.066±0.012)%和(0.089±0·066)%,与APL患者相比相差4个对数级;随访期内,19例患者全部获得形态学CR,中位时间为4周(3-6周),13例FCM结果转阴的中位时间为7.5周(5-11周),11例PCR结果转阴的中位时间为8周(5-12周);形态学CR后随访的117份标本中41份FCM检测MRD呈阳性,8份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例>5%,中位值为9.02%(5.26%-18.14%),33份标本CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例<5%,中位值为0·48%(0.02%-4.70%);CD117+CD34-细胞中CD123+HLA-DR-细胞的中位相对比例分别为86.77%(63.29%-92.62%)和63.59%(15.11%-98.36%);FCM与PCR同时检测MRD结果显示,FCM(+)标本中95.9%(93/97)PCR为阳性,FCM的假阳性率为4.1%(4/97),PCR的假阴性率为8.75%(7/93)。FCMMRD(-)标本中,92%(69/75)PCR阴性,8%(6/75)为PCR阳性。连续随访的116份标本和形态学CR后的117份标本显示,CD117+CD34-CD123+HLA-DR-细胞比例与实时定量PCR检测的mRNA水平基本一致,两者均有一定的相关性(r=0.824,P<0.001和r=0.754,P<0.001)。结论:应用CD34/CD117/CD123/HLA-DR为主的2组4色抗体组合检测APL患者中的MRD简单可行,可与PCR检测相互补充。     

催产素不同剂量及给药方式对自然分娩产妇子宫复旧效果影响的比较

目的比较催产素不同剂量及给药方式对自然分娩产妇子宫复旧的影响。方法按条件分组法将自然分娩的产妇100例分为A组和B组,每组50例。A组产妇产后肌内注射催产素10 U,B组产妇产后静脉注射经等渗盐水稀释至10 ml的催产素10 U同时肌内注射催产素10 U,两组均在胎儿前肩娩出立即注射。分别记录用药后不良反应发生情况,产后3 d宫底高度,宫底降入骨盆所需时间及恶露中血性物质消失时间。结果 A组使用催产素后不良反应0例,B组3例,经比较两组差异无统计学意义。两组产后3 d宫底高度及宫底降入骨盆所需时间比较无统计学意义;恶露中血性物质消失时间,A组短于B组,两组比较有统计学意义。结论一定时间内,催产素单独肌内注射10 U比肌内注射及静脉注射同时给药20 U对自然分娩产妇子宫复旧更有利,且更安全。     

CRP、CysC、血清β_2-MG在早期糖尿病肾病诊断中的临床价值

目的探讨C反应蛋白(CRP)、胱抑素C(CysC)、血清β_2微球蛋白(β_2-MG)检验在早期糖尿病肾病(DN)诊断中的应用价值。方法选取该院收治的300例糖尿病患者作为研究组,根据尿清蛋白排泄率的不同分为A组(119例)、B组(112例)和C组(69例),另选取60例健康体检者作为对照组,采集血液标本进行血清CRP、CysC、β_2-MG、Scr、微量元素Zn检验,对比检验结果,分析各项指标与肾功能损害的相关性。结果A组的β_2-MG、CysC、血肌酐(Scr)与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);B组的β_2-MG、CysC、CRP水平均显著高于A组,Zn水平显著低于A组,差异有统计学意义(P0.05);C组的β_2-MG、CysC、CRP、Scr水平均显著高于A、B两组,Zn水平显著低于A、B两组,差异有统计学意义(P0.05)。B组的β_2-MG、CysC、CRP、Scr阳性率均显著高于A组,而C组的β_2-MG、CysC、CRP、Scr阳性率又明显高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。相关分析显示尿微量白蛋白(Malb)与β_2-MG、CysC、CRP、Scr均呈显著正相关关系(r=0.733、0.725、0.511、0.532),而与Zn呈负相关关系(r=-0.507),差异有统计学意义,P0.05。结论血清CRP、CysC、β_2-MG及微量元素Zn水平变化与肾功能损害程度有着密切联系,联合检测各项指标,掌握各项指标的变化规律对于诊断早期DN,指导临床治疗具有重大意义。     

四色荧光标记抗体在白血病免疫分型中的应用及意义

为探讨多参数流式细胞术对白血病免疫分型的方法及意义，本研究自行设计了一系列4种荧光标记的单克隆抗体组合，对88例急性白血病患骨髓或外周血进行流式细胞仅免疫表型分析。应用本组抗体组合可对T—ALL和B—ALL及AML－M1—M7患做出诊断，并可诊断形态学难以辨认的AML－M0，及一般免疫分型法较难辨认的单核细胞白血病。应用4组四色荧光标记的抗体组合，共含13种抗体，既可将90％以上的白血病患分为ALL或AML，并可鉴别急性白血病的主要亚型，及反映血细胞的分化成熟度。结论：四色荧光抗体组合可用较少的抗体，特异地对白血病细胞进行多参数免疫分型分析，提高免疫分型的准确性。     

慢性淋巴细胞系统白血病免疫表型分析

目的：研究国内慢性淋巴细胞系统折血病的免疫表型特点。方法：采用单参数和多参数流式细胞术分析了163例慢性淋巴细胞系统白血病的免疫表型。结果：71.8％（117/163）患者共表达CD5和B细胞标志。采用WHO引用的计分系统，将病例分为B-慢性淋巴细胞白血病（B-CLL），毛细胞白血病（HCL）和其他B淋巴细胞增殖性疾病。典型的B-CLL表达CD5、CD23、CD20、CD19、HLA-DR，但仍有部分患者表达CD22、CD11c、CD25和FMC7。CD103似为HCL最特异的标志。但仅仅依靠免疫表型难以鉴别非典型B-CLL、B细胞-幼淋巴细胞白血病（B-PLL）和外套细胞淋巴瘤（MCL），细胞遗传学或分子生物学检查将有助于鉴别诊断。以同一标本中残存的正常淋巴细胞为内参照，计算前向角光散射（FSC）指数和抗原表达指数，可定量地表示细胞的大小和抗原表达的强度，使不同的标本具有可比性。结论：免疫表型分析是诊断慢性淋巴细胞系统白血病非常有用的依据。