大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化研究

随着人群老龄化、器官移植手术的广泛开展、免疫抑制剂的使用 ,以及社会因素的影响 ,革兰氏阳性杆菌感染发病率有所升高。该类感染包括无芽孢革兰氏阳性菌 李斯特菌、放线菌、棒状杆菌、红斑丹毒丝菌及产芽孢革兰氏阳性菌 芽孢杆菌属、梭状芽孢杆菌属细菌感染。临床医师与临床微生物实验室工作者对此类感染相对较陌生 ,尚未予足够重视 ,目前也难见对革兰阳性杆菌感染的系统资料 ,实验室检测、临床诊断与治疗水平需尽快提高 ,如何认识革兰阳性杆菌感染、如何准确地进行病原学诊断、如何正确地选择治疗药物、如何恰当地进行预防 ,是当代临床…     

MRI在代谢综合征中的早期胰腺癌筛查中的应用

目的:探究磁共振成像(Magnetic Resonance Imaging, MRI)在代谢综合征(metabolicsyndrome, MS)中的早期胰腺癌(pancreaticcancer, PC)筛查中的临床诊断价值。方法:选取我院2020年1月至2022年12月期间在我院进行体检的90例代谢综合征患者和同期90例健康志愿者作为研究对象。90例代谢综合征患者为观察组,90例健康志愿者为对照组。利用MRI检查两组腹部脂肪分数(fatfraction, FF)值,胰腺脂肪分数(Pancreatic fat fraction, PFF)、第4、5腰椎间隙平上8cm处腔断面的下脂肪面积(Small Area, SA)、腹腔脂肪面积(visceral fat area, V A)、腹部总脂肪面积(Total abdominal fat area, T A),并计算腹部下脂肪面积比例(Proportion of the lower abdominal fat area, SFP)以及腹部内脏脂肪面积比例(Proporo of the abdominal visceral fat area, VFP)的值。结果:观察组FF值和PFF值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),观察组SA、VA、TA、SFP、VFP值均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组有23例(25.56%)患有胰腺癌,对照组有8例(8.89%)患有胰腺癌,两组之间相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:代谢综合征患者中在MRI检查脂肪定量值和胰腺脂肪定量值中FF值以及PFF值以及胰腺脂肪面积的高于正常人群,且有代谢综合征患者更容易发生胰腺癌。     

大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化研究

目的 :调查四川大学华西医院分离的ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM型及SHV型ESBLs亚型 ,并探讨其分子进化规律。方法 :对用PCR法扩增的产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的TEM型及SHV型ESBLs基因进行核苷酸序列测定 ,通过网上相似性检索确定其编码的酶的亚型 ,并利用生物信息学的方法探讨ESBLs分子进化的规律。结果检出的ESBLs亚型为SHV 2和TEM 1 9。本研究检出的1 0个blaSHV 2 沉默突变位点分布彼此相同 ,2个blaTEM 19沉默突变位点分布也彼此相同。与国外其它地方检出的blaSHV 2 比较 ,沉默突变位点分布不同。…     

血管紧张素Ⅱ受体在增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用

背景:最新研究发现，血管紧张素Ⅱ与皮肤纤维化病变的发生和发展有关，然而有关血管紧张素Ⅱ受体在人增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及作用鲜见报道。 目的:观察血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体在人增生性瘢痕成纤维细胞中的表达，并探讨它们在成纤维细胞胶原合成中的作用。 设计、时间及地点:对比观察，于2006-08/ 2007-11在解放军广州军区广州总医院医学实验中心完成。 对象:取住院患者增生性瘢痕18例，男10例，女8例，年龄19~47岁，将增生性瘢痕标本分为两组，每组各9例。正常皮肤7例，取自增生性瘢痕切除患者的正常皮肤。所有取材部位未经任何治疗，标本经无菌取材后分成2份，其中一份用40 g/L多聚甲醛固定后用于免疫组织化学检测，另一份用于成纤维细胞培养。 方法:采用免疫组织化学的方法和放射性配体受体结合测定法观察人增生性瘢痕组织中成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体的表达，并用体外细胞培养技术观察2种受体在人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用。 主要观察指标:2种受体在增生性瘢痕组织成纤维细胞中的表达及在人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用。 结果:①在增生性瘢痕的成纤维细胞可见1型受体和2型受体表达，阳性染色信号较强。放射性配体受体结合测定法显示在培养的增生性瘢痕的成纤维细胞有1型受体和2型受体，受体密度分别为(10.69±2.15)，(4.9±1.05) fmol/106个细胞。②在培养的人增生性瘢痕成纤维细胞，血管紧张素Ⅱ明显促进成纤维细胞胶原的合成，1型受体阻断剂Valsartan明显抑制血管紧张素Ⅱ的这种促进作用，2型受体拮抗剂PD123319明显增强血管紧张素Ⅱ的这种作用。 结论:在增生性瘢痕的成纤维细胞表达血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体，血管紧张素Ⅱ通过激活2种受体对成纤维细胞胶原的合成产生相反的作用，血管紧张素Ⅱ产生和受体表达比例的变化可能影响瘢痕的形成和成熟。     

血管紧张素Ⅱ对增生性瘢痕成纤维细胞PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对增生性瘢痕成纤维细胞磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/Akt,PI3K/Akt)信号通路的影响.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,用免疫荧光组织化学染色检测细胞Ang Ⅱ受体AT,和AT_2的表达.以PI3k活性测定法和Western Blotting法检测细胞PI3K的活性和Akt的磷酸化.结果 免疫荧光组织化学染色结果显示培养的增生性瘢痕成纤维细胞同表达AT_1和AT_2受体.Ang Ⅱ(10~(-9)～10~(-7)mol/L)刺激可增加细胞Akt的磷酸化和P13K的活性.AT_2受体拮抗剂PD1233191可显著增强AngⅡ诱导的细胞Akt磷酸化和PDK活性增加(P<0.05);AT_1受体拮抗剂Valsartan可显著抑制AngⅡ诱导的细胞Akt磷酸化和PDK活性增加(P<0.05).结论 Ang Ⅱ通过其受体AT_1和AT_2可调控增生性瘢痕成纤维细胞Akt磷酸化和PI3K的活性.     

益活清胰汤对重症急性胰腺炎大鼠海马CAI区嗜碱性成纤维细胞生长因子的影响

[目的]探讨益活清胰汤对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)并发胰性脑病(PE)海马CAI区嗜碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响.[方法]45只SD大鼠建立SAP模型,随机分为益活清胰汤(C)组、造模(B)组、假手术(A)组,测定6、12、24 h各时点血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、磷脂酶A2(PLA)值.对大脑皮层和海马组织形态、bFGF的表达进行观察.[结果]B、C两组术后6 h TNF-α、IL-6、PLA2开始升高,24 h达高峰.C组6、12、24 h各时点的TNF-α、IL-6、PLA2值小于A组(P＜0.01).海马bFGF表达显著增多.[结论]益活清胰汤能降低SAP血浆TNF-α、IL-6及PLA2水平,改善脑血流量,对抗缺血低氧,增强SAP时海马组织bFGF的合成、分泌,阻止神经细胞凋亡和(或)促进新的神经元出芽及突触形成.     

重组葡激酶加中药对重症急性胰腺炎大鼠心肌核转录因子кВ的激活作用

[目的]研究重症急性胰腺炎(SAP)心肌功能损害时心肌核转录因子кВ(NF-кВ)的活化及葡激酶的干预作用.[方法]63只SD大鼠随机分为假手术组(n=9)、对照组(n=27)、葡激酶合用益活清胰汤治疗组(n=27),SAP模型采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射方法建立.ELISA法测定6、12、24 h各时点血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,RT-PCR检测心肌NF-кВ mRNA的表达,免疫组化法检测心肌NF-кВ蛋白的表达,苏木精-伊红染色光镜下观察胰腺及心肌组织的病理变化.[结果]术后6 h大鼠心肌NF-кΒmRNA及其蛋白表达异常增高,TNF-α、IL-6呈进行性升高,治疗组用药后心肌NF-кВmRNA及蛋白表达下调,血TNF-α、IL-6明显下降,与对照组相比P＜0.05,治疗组胰腺及心肌组织的病理变化减轻.[结论]SAP大鼠心肌损伤可能与循环中TNF-α、IL-6水平升高导致的心肌NF-кВ活化有关,益活清胰汤合用葡激酶对SAP并发的心肌损伤具有防治作用.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药基因序列分析

目的　了解四川大学华西医院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM及SHV型ESBLs亚型 ,并分析其耐药性。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)扩增分离四川大学华西医院住院患者的产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌株的TEM型及SHV型ESBLs基因并测序 ,用琼脂稀释法测定头孢他啶和头孢噻肟等 8种抗菌药物的最小抑菌浓度 (MIC)值。结果　所有产ESBLs株均耐头孢噻肟 ,11株耐氨曲南 ,2株分别耐头孢他啶和头孢吡肟 ,对环丙沙星、阿米卡星及头孢西丁耐药的分别为 11株、5株和 3株。 12株ESBLs菌中 10株产SHV 2 ,2株产TEM 19。结论　本研究中的产ESBLs株以耐头孢噻肟和氨曲南为主 ,其中绝大多数为多重耐药株 ,产SHV 2和TEM 19是其对头孢噻肟及氨曲南等氧亚胺基 β 内酰胺酶类抗生素耐药的原因之一