山莨菪碱（654—2）治疗β地中海贫血的临床研究

为了验证山莨菪碱（654－2）治疗β地中海贫血的治疗疗效、男性13例、女性7例，年龄5－30岁，其中14岁以下14例．均为广西籍．临床上有肝脾肿大及明显贫血。红细胞平均2．687×10（12）／L，血红蛋白平均55．9g／L，网织红细胞平均0．11，抗碱血红蛋白平均0．42。654－2片剂开始剂量为0．2－1．0mg／kg·d，逐渐增加至1．5－3．0mg／kg·d，分3次内服，连续用药3个月为1疗程，治疗后红细胞增加15例，（0．02－1．37）×10（12）／L，平均增加0．47×10（12）／L。血红蛋白增加15例．2－19g／L，平均增加13．2g／L，网织红细胞增加16例0．01－0．1，平均0．04．抗碱血红蛋白增加14例．平均增加0．053。     

干细胞因子的应用研究

干细胞因子的发现和基因克隆在20世纪中期就发现两种遗传性贫血小鼠模型为W/Wv与Sl/Sl~d,各为W位点及Sl位点的畸变。W位点位于5号染色体,而Sl位于10号染色体。Bernstein和Russell发现Steel(Sl)位点突变的小鼠和white spotting(W)位点突变的小鼠表型相同,都存在贫血、肥大细胞缺乏、毛色变白和失去生育能力等症状。这两株遗传变异的小鼠纯合子会因为严重贫血而死于胚胎期。通过骨髓移植和细胞发育实验,即移植正     

1例新的血红蛋白复合类型——血红蛋白Ⅰ复合血红蛋白E的化学结构分析

在广西天等县一名10岁壮族男孩血液中同时发现快速和慢速两种异常Hb,其相对含量分别为9.27％和27.3％。血液学检查结果正常,家系调查发现其父携带有慢速成分,其母携带有快速成分。肽链解离电泳结果表明快速成分为α-链变异体,慢速成分为β-链变异体。化学结构分析结果证明快速成分为HbI(α16(A14)Lys→Glu),慢速成分为HbE(β26(B8)Glu→Lys)。这种HbI/HbE为迄今未见文献报道的一种新的血红蛋白复合类型。     

25,856人异常血红蛋白的调查和41个阳性家系的化学结构分析

我们于1981年至1985年在广西人群中普查异常血红蛋白25,856人,所发现的41个阳性家系作了化学结构分析,发现11种异常Hb,其中Hb New York复合HbE为世界文献上未见报道的新类型,Hb G Wai ma     

造血因子动员后自体外周血干细胞移植对急性放射病猴的治疗作用

目的　观察重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)或rhG CSF +重组人干细胞因子 (rhSCF)动员后外周血干细胞 (PBSC)自身移植对 7 0Gyγ射线照射猴的治疗效果。方法　 15只正常成年猕猴分成照射对照、rhG CSF和rhG CSF +rhSCF 3组。rhG CSF 10 μg/(kg·d) (μKD)连续 5天皮下注射 ,rhSCF 2 0 μKD连续 8天皮下注射 ,后 5天与rhG CSF联用。照射对照组注射等体积的生理盐水。照射当天收集PBSC ,7 0Gyγ射线照射后 3～4h做自体PBSC移植 ,观察其造血恢复情况。结果　在移植后恢复期rhG CSF +rhSCF组白细胞数明显高于对照组和rhG CSF组。rhG CSF+rhSCF和rhG CSF组外周血小板数的恢复优于照射对照组 ,骨髓CFU数明显高于对照组。病理组织学检查表明 ,rhG CSF组骨髓腔内造血细胞数量超过照射对照组 ,但比rhG CSF +rhSCF组少。结论　rhG CSF或rhG CSF +rhSCF组动员后自体PBSC移植可明显促进急性放射病猴的造血功能恢复 ,两因子联用组的效果优于单因子组。     

顺铂诱导大鼠C6胶质瘤细胞凋亡

为深入进行胶质瘤细胞凋亡的分了生物学研究及提高胶质瘤辅助化疗疗效打下基础。通过光镜,电镜,荧光显微镜分析,DNA断裂分析及流式细胞仪分析,进行顺铂诱导C6胶质瘤细胞调亡研究。本研究证实在3μg／mLCDDP作用72h,C6细胞出观细胞凋亡;光镜和电镜可见细胞形态学上出现细胞皱缩,染色质浓集贴达;流式细胞仅结果提示有凋亡峰出现,凋亡细胞占细胞总数17.3％±1.2％;荧光显微镜观察出现染色质浓集,染色质断裂：DNA电泳未表现出DNA呈梯状带型断裂。上述结果提示用顺铂成功地诱导大鼠C6胶质瘤细胞发生凋亡。     

RV-HSV-tK-GCV系统基因治疗中的"旁观者效应"研究

目的研究反转录病毒载体(RV)-单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-tK)-环丙氧苷(GCV)系统中的旁观者效应.方法利用RV介导将HSV-tK基因导入C6大鼠胶质瘤细胞,在GCV存在条件下,将转导细胞C6/TK+按不同比例与同种属的野生C6细胞,不同种属的TJ905人多形性胶母细胞瘤以及C6/NeoR+TK-(转导的C6细胞,但对GCV耐药)进行混合培养,同时对旁观者效应产生机理进行探讨.结果 C6/TK+可被GCV所杀灭;C6,TJ905及C6/NeoR+TK-按不同比例与C6/TK+混合后应用GCV,均出现旁观者效应;结论转导细胞对GCV的敏感性较野生C6细胞明显增强旁观者效应的出现并非在同一细胞系的细胞中出现,介导旁观者效应的并非为可溶性因子.本文还就在反转录病毒介导的基因转移过程中tk基因突变可能导致C6/NeoR+TK-细胞的出现进行了讨论.     

在陕西及青海发现的2例 HbG Conshatta及其1级结构分析

<正> 在我国异常血红蛋白的流行病学研究中表明,HbG组异常血红蛋白的比例较高,分布较广。陕西及青海省血红蛋白病协作组于1981年普查时分别发现两个无血缘关系的家系,均有电泳位置相当于HbG的慢速异常血红蛋白。     

微RNA-21在肝细胞癌中的表达及其靶基因研究

目的 探讨微RNA(miRNA)-21在肝细胞癌中的表达特征及其功能,筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因.方法 用PAGE/Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征,并在3种肝癌细胞株中加以验证.用生物信息学分析预测miRNA-21可能的靶基因,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法克隆靶基因的调控区序列,利用荧光素酶双报告基因系统筛选,并通过Western blot、流式细胞仪在蛋白质水平进行分析验证.用体外细胞侵袭实验分析miRNA-21与肝癌细胞侵袭能力的关系.结果 miRNA-21在10例肝细胞癌患者中均表达上调,与癌旁组织比较,表达量增加10倍以上.在3种肝癌细胞株中也得到相似的结果.筛选并确认了RECK为miRNA-21的调控靶基因之一.抑制miRNA-21的表达可明显降低肝癌细胞的侵袭.结论 miRNA-21在肝细胞癌中表达失控,通过抑制RECK表达促进肿瘤细胞侵袭.     

全反式维甲酸抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究

目的 研究全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,ATRA)对肝癌细胞增殖的影响并探讨可能的作用机制.方法 利用ATRA处理肝癌细胞系HepG2与SMMC-7721,选择MTT法分析细胞增殖.利用实时PCR方法研究ATRA对miR-18a表达的影响,并选择特异抑制剂Anti-miR-18a处理肝癌细胞,利用MTT法分析细胞增殖.设计拯救实验,利用ATRA处理转染miR-18a模拟物的肝癌细胞系,利用MTT法分析细胞增殖情况.结果 ATRA可以有效抑制肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721的增殖,A490吸光度值分析显示,HepG2经ATRA处理后,细胞增殖分别被抑制74％(P＜0.05,36 h)、72％(P＜0.01,48 h)、67％(P＜0.05,72 h);SMMC-7721经ATRA处理后,细胞增殖分别被抑制68％ (P＜0.05,48 h)、64％ (P＜0.01,72 h).miR-18a在肝癌细胞HepG2与SMMC-7721中的表达水平分别上调4.7倍(P＜0.05)、3.8倍(P＜0.05); ATRA处理后,HepG2与SMMC-7721内源性miR-18a的表达水平分别下调67％(P＜0.05)与56％(P＜0.05).过表达miR-18a的肝癌细胞HepG2与SMMC-7721对ATRA的抑制作用出现耐受,其中HepG2细胞增殖上调1.2倍(P＜0.05),SMMC-7721细胞增殖上调1.25倍(P＜0.05,24 h)与1.2倍(P＜0.05,48 h).结论 ATRA可通过下调肝癌细胞内源性miR-18a的表达,抑制细胞增殖.