腺病毒递送BMI-1shRNA

近年来发展了一些质粒载体介导shRNA的转录,然后在细胞酶的作用下加工成功能性的siRNAs。虽然这些载体较化学合成的siRNA有更多的优点,但仍存在相当多的缺点,如转染效率低和不能在体内使用。本研究建立一种没有上述缺点的腺病毒递送BmihRNAs系统,设计靶向人Bmi—1的载体。以pAdTrackCMV质粒为模板扩增CMV—GFP表达盒,从pGE1BMIhRNA质粒上酶切下U6-BMI-1shRNA表达盒,克隆它们入穿梭质粒pShuttle中,然后与pAdEasy-1质粒基因重组产生腺病毒质粒pAd—BMIhRNA—CVM—GFP,转染293A包装细胞,收获病毒。病毒感染K562细胞后,在mRNA和蛋白水平上分别用RealTime—PCR和Western blot检测BMI的表达水平。结果表明：成功构建了pGE1BMIhRNA腺病毒质粒并有效包装出病毒。感染BmmRNA腺病毒的K562细胞在mRNA和蛋白水平上均显著下调了Bmi-1的表达,而对照病毒没有明显的效果。结论：腺病毒是一种有效递送siRNA入哺乳动物细胞的载体。腺病毒递送siRNA载体可能成为siRNA药物的基因治疗载体。     

Lag-3基因rs870849多态性和CD4基因rs2515733多态性与ITP易感性之间的联系

目的 分析cD4基因rs2515733多态性和Lsg-3基因rs870849多态性与特发性血小板减少性紫癜(ITP)易感性之间的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)分析157例ITP患者和136例正常人的基因分型.结果 CD4基因rs2515733多态性位点基因频率和Lag-3基因rs870849多态性位点基因频率在患者组与对照组之间无显著差异.结论 ITP患者和正常人ca4基因rs2515733多态性和Lag-3 基因rs870849多态性基因频率的分布类似,这两个基因的多态性与ITP易感性无关.     

成人特发性血小板减少性紫癜患者生活质量研究

目的:评价成人特发性血小板减少性紫癜(ITP)对患者生活质量(QoL)的影响.方法:使用Medical Outcome Study SF-36 form(SF-36)中文版对中国医学科学院血液病医院236例成人ITP患者进行QoL调查.按照血小板计数,将患者分为3组[PLT<30×109/L;PLT(30～100)×109/L;PLT>100×109/L].SF-36的8个维度作为测量结果:躯体健康(PF);社会功能(SF);躯体角色功能(RP);躯体疼痛(BP);心理健康(MH);情绪角色功能(RE);精力(VT);总体健康(GH).结果:在8个维度ITP患者和正常人相比SF-36 QoL均降低.在PF、RP、BP、GH、SF和RE等6个维度中QoL得分差异有统计学意义.急性ITP患者在GH、VT和RE 3个维度与慢性患者相比QoL得分的差异有统计学意义.同时,在根据血小板计数分组的比较中,在PF、GH和SF 3个维度显示了明显的差别.年龄是除了SF以外其他所有维度的负性预测因子.当前血小板计数是BP,SF和GH的负性预测因子.而且治疗费用也影响了QoL得分.对出血的恐惧作为主观指标对QoL有明显的负面影响.结论:成人ITP患者的QoL明显降低,年龄、血小板计数和出血的恐惧对QoL有明显的负面影响.本研究为ITP的临床研究提供了基于询证的证据.     

出血分级在特发性血小板减少性紫癜患者中的临床意义

目的 探讨出血分级在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义.方法 采用自拟ITP出血分级标准对225例ITP患者进行出血分级,采用双变量分析出血分级与PLT计数及疗效的关系.结果 ITP最常见的出血部位为皮肤,致命性内出血少见.出血分级与PLT计数呈负相关,与疗效呈正相关,但相关关系不密切.结论 ITP患者的出血危险与PLT计数不呈绝对反比,临床出血程度较PLT计数更重要;对ITP患者进行出血分级有助于监测出血,选择治疗策略,预测疗效.     

胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的免疫调节

背景：众多研究表明间充质干细胞能发挥免疫调节功能,抑制T细胞增殖。 目的：观察胚胎骨髓来源间充质干细胞对人Th17细胞的调节作用。 方法：将人胚胎骨髓间充质干细胞与正常人外周血单个核细胞或CD4⁺ T细胞以1∶10比例共培养4 d,以单个核细胞或CD4⁺T细胞单独培养为对照。应用实时定量PCR检测细胞白细胞介素17 mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测细胞上清中白细胞介素17蛋白水平,流式细胞术检测Th17细胞数量。 结果与结论：胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞共培养组白细胞介素17 mRNA表达水平明显高于单个核细胞组(P < 0.01)。与此一致的是,胚胎骨髓来源间充质干细胞与单个核细胞或CD4⁺T细胞共培养组细胞上清中白细胞介素17蛋白水平明显高于单个核细胞组、CD4⁺ T细胞组(P < 0.05,P < 0.01)。胚胎骨髓来源间充质干细胞与CD4⁺ T细胞共培养组Th17细胞数量明显高于CD4⁺ T细胞组(P < 0.01),但胚胎骨髓来源间充质干细胞本身并不表达白细胞介素17。表明胚胎骨髓来源间充质干细胞可促进人Th17细胞增殖。     

儿童3型血管性血友病单中心临床数据分析

目的 了解我国儿童3型血管性血友病诊治现状。方法 回顾性收集2009年至2021年于北京儿童医院血友病综合管理中心注册登记的3型vWD患儿基本信息,并在2022年4月通过电话询问、微信信息表格填报等方式了解这些患儿目前临床表现、治疗现状及生活质量数据。结果 我中心注册登记的3型vWD共29例,随访到可供分析病例20例。中位首次出血年龄为2.3(0.4～11.0)岁,诊断年龄为4.0(0.4～11.6)岁。中位年出血次数（Annual Bleeding Rate,ABR）为10(0～18):75%(15/20例)患儿以鼻出血为主要表现;关节出血为25.0%(5/20例),存在关节出血患者的FⅧ：C水平（2.2%,范围0.6%～3.4%）较无关节出血患者（8.0%,范围0.6%～9.9%）低（P=0.026）。接受预防治疗的患儿占20%(4/20例),接受按需治疗的占60%(12/20例),预防治疗组和按需治疗组中位ABR分别为3(0～12)和10(3～18),ISTH-BAT中位评分分别为2(0～7)和4(4～9)。16例完成“疾病家庭负担量表”中位分数为19 (6～31),其中经济负担...     

应用雷帕霉素上调调节性T细胞比例治疗儿童原发慢性难治性免疫性血细胞减少症——单中心连续病例

目的:进展为慢性原发性免疫性血细胞减少症的患儿,治疗方式较成人更加局限,雷帕霉素通过抑制mTOR信号通路上调外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞(Treg细胞)比例有望控制该类自身免疫性疾病进程。方法:本研究为单中心连续病例观察性研究,入组11例患儿,流式细胞数检测外周血Treg细胞比例。结果:雷帕霉素3个月总有效率(完全缓解+部分缓解)为72.7%(8/11):其中2例免疫性血小板减少症、1例自身免疫性溶血性贫血及2例Evans综合征患儿达到完全缓解,服药期间无不良事件发生;免疫性血小板减少症患儿总体有效率为62.5%(5/8)。整体患儿经雷帕霉素治疗3个月后,Treg细胞比例有明显上升(P=0.043)。患儿根据疗效进行分组,完全缓解组服药前Treg细胞比例明显低于部分缓解+无效组(P=0.028)。结论:以调节Treg细胞有望控制儿童慢性难治性免疫相关血细胞减少症。     

调节性T细胞在血友病A抑制物产生中的研究进展

<正>调节性T细胞(regulatory cell,Treg)是人体免疫系统重要的调节细胞,在维持机体免疫状态稳定、控制自身免疫及机体免疫耐受等方面十分重要~([1])。也是近年来在血友病抑制物产生的相关机制中研究较多的免疫因素之一,并有一定的研究成果。血友病是伴X染色体连锁的隐性遗传性出血性疾病,发病率在存活男婴中位1/5 000~([2])。主要表现为终生自发性、反复性出血,以关节、肌肉多见,严重可有颅内、重要脏器出血,存在致残、致死风险。目前公认的     

儿童朗格罕斯细胞组织细胞增生症合并慢性免疫性血小板减少症1例

李楠（住院医师）：患儿男,8岁,主因发现皮肤出血点5年,头皮包块3年,发热4个月于2013年7月4日入院。患儿于5年前无明显诱因全身皮肤出现针尖大小出血点及瘀斑,当地医院查血常规示血小板（PLT）2×109／L,白细胞（WBC ）及血红蛋白（Hb）正常,骨髓细胞学检查示全片巨核细胞＞300个,诊断“免疫性PLT减少症”,予以静脉注射用人免疫球蛋白（IVIG）及糖皮质激素（简称激素）治疗,PLT计数可升至正常,口服激素1周后PLT下降,再予IVIG后 PLT 再次上升,此后间断输注 IVIG,每次PLT计数仅维持正常1周左右会再次降至10×109／L以下,予以长春新碱静脉注射后 PLT 数仅维持在（5～10）×109／L,此后反复间断输注IVIG、口服激素及中药治疗,PLT 可维持在（50～60）×109／L。3年前患儿无明显诱因右侧顶骨出现包块,头颅CT示颅骨多发骨质缺损区,内可见软组织肿块,突入颅内,此后头颅反复出现多部位包块,院外未予特殊治疗。4个月前患儿出现发热,体温最高41℃,每日1次热峰,无寒战,伴膝关节疼痛,晨起为著,活动后减轻,无皮疹,于当地医院查血常规示PLT12×109／L,余两系正常,类风湿因子、补体、ENA、ds-DNA及病毒、寄生虫抗体、降钙素原（PCT）等均未见异常,全片骨髓巨核细胞＞300个,骨髓活检未见异常。腹部MRI提示肝尾状叶下旁结节灶,考虑肿大淋巴结。初步诊断“败血症”,予以亚胺培南、万古霉素、氟康唑等静脉注射抗感染,病情无明显改善,给予大剂量甲泼尼龙静脉注射后体温可降至正常,激素减量后再次出现发热,体温最高达39℃。遂于我院门诊就诊,血常规示Hb 74g／L,PLT 9×109／L,网织红细胞09％,C反应蛋白（CRP）132 mg／L;全片骨髓巨核细胞＞300个,PLT少见,偶见大PLT,涂片中可找到分类不明细胞,其胞体不规则,胞浆蓝色,着色不均匀,核染色质细。头颅CT示颅骨广泛骨质破坏,予以IVIG静点并输注机采浓缩PLT1单位,复查PLT无上升,体温仍未控制,以“发热、血细胞减少、骨质破坏原因待查”收入我院。患儿发病以来精神反应好,一般状况可,食欲睡眠好,大小便正常,体重无明显变化。     

应用西罗莫司安全有效治疗并发血细胞减少的儿童自身免疫性淋巴细胞增生综合征——单中心、回顾性队列研究

目的:自身免疫性淋巴细胞增生综合征(ALPS)是一种常在幼年发病、并发免疫性血细胞减少而需要药物控制的遗传性免疫缺陷病.而糖皮质激素作为传统治疗药物将影响处于生长发育的患儿.西罗莫司通过精准抑制mTOR通路、诱导T细胞凋亡而成为治疗的新选择,但尚缺乏其安全性和有效性数据.本文旨在通过总结我中心伴发免疫性血细胞减少的AL...