冷冻异体神经移植应用转化生长因子β1质粒的研究

目的探讨对经反复冻融处理的冷藏异体神经移植,局部使用转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)质粒的效果. 方法健康成年不同窝Wistar大鼠40只随机分为两组,每组20只,将坐骨神经在梨状肌孔下5 mm处切除2.0 cm,神经缺损用预制反复冻融于-196℃冷冻的异体神经2.0 cm移植修复.实验组在局部肌肉及神经两断端注射TGF-β1质粒,对照组注射等量生理盐水.分别于6周和12周对每组10只大鼠取材,切片、染色并进行轴索计数和统计学分析. 结果 6周时实验组轴索间基本无水肿,再生神经数量接近正常;对照组神经移植段轴索间有轻度水肿,再生神经较少.12周时实验组整个神经移植段基本被再生轴突充满,有髓纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育良好,再生轴突数为98.6±4.8/μm2;对照组神经纤维排列整齐,轴突和髓鞘发育较实验组差,轴突数为75.8± 5.1/μm2,差异有统计学意义(P<0.01). 结论反复冻融冷藏保存的异体神经其抗原性降低,具有修复神经缺损的可能性.局部使用TGF-β1质粒可发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应.     

糖原贮积症伴脂质贮积症

目的 探讨糖原贮积症伴脂质贮积症的临床与病理特点。方法 报告１例患者,结合文献复习,描述其临床与病理特征。结果 本病多见于婴儿或青少年女性,进行性或抒发性广泛性肌张力减低,四肢近端肌无力或萎缩,可伴有肌肉酸痛。病理特点为肌纤维出现弥温性空泡,Ⅰ型纤维受累可比Ⅱ型肌纤维明显,电镜下发现糖原和脂滴贮积于肌纤维内。结论 当患者因条件受限、无法进行生化检查时,光、电镜结合的活检肌组织形态观察有助于诊断。     

IgA肾病肾组织纤连蛋白的表达

目的：探讨肾组织纤连蛋白的表达在ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）进展中的病理学及临床意义。方法：运用Ｓ－Ｐ法对６０例ＩｇＡＮ的肾活检标本进行纤连蛋白（ＦＮ）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的免疫组化染色，并与肾小球及肾小管间质损伤程度相对照，进行统计学处理。结果：肾小球系膜区ＦＮ与系膜细胞增生、肾小球损伤程度及肾小管间质损伤程度均呈正相关。基膜ＦＮ的出现与基膜内皮下沉着物、肾小球损伤程度及肾小管间质损伤程度均密切相关。结论：肾小球系膜区ＦＮ可作为肾活检组织病理中肾小球系膜的标志，尤其是基膜ＦＮ的聚集增多，是判断ＩｇＡＮ进展和预后不良的可靠指标     

运用三维摄影测量腓骨头关节面形态及其意义

目的：测量腓骨头关节面形态，为临床上用带血管蒂的游离腓骨头移植替代桡骨远端重建腕关节提供理论依据。方法：用三维摄影测量法测量４０例成人腓骨头标本，重建关节面数学模型，然后测量关节面倾角、弧长和曲率。结果：腓骨头关节面后倾角为（９．９６±１．４７）°，内倾角为（２３．０７±２．１４）°，关节面冠状面弧长为１５．９±１．９０ｍｍ，矢状面弧长为１２．８±１．３０ｍｍ，冠状面屈率为０．１５４±０．０２８，矢状面曲率为０．１３６±０．０２８。结论：腓骨头可以用来替代桡骨远端重建腕关节     

胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学观察

目的 探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征。方法 利用电镜技术观察血管内皮细胞Ecv304和C6胶质瘤细胞共培养(混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养)后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与肿瘤细胞的相互关系、瘤细胞的“血管周足”等的形态学特征；并与4例人脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障进行比较。结果 电镜下发现ECV304细胞经与C6细胞按3种不同方式共培养汇合后均为无孔窗型内皮细胞，细胞间出现紧密连接；Transwell共培养的膜上C6细胞未见伸出伪足突向膜的微孔；经膜两面共培养的瘤细胞则可通过Transwell的微孔突向内皮细胞侧，但瘤细胞未伸出伪足包绕内皮细胞或突入内皮细胞间隙，瘤细胞的“血管周足”不完整，后两者与脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障的形态特征相类似。结论 在体外经Transwell膜两面共培养的ECV304和C6胶质瘤细胞的系统可在一定程度模拟体内的血瘤屏障的形态学特征。     

脂质沉积性肌病15例临床及病理分析

结合肌肉病理改变,探讨脂质沉积性肌病的诊断及治疗。方法对１５全ＬＳＭ患者进行临床及病 镜与电镜观察。结果患者均有进行性四肢无力,血清肌酶不同程度升高,肌肉病理苏丹黑染色及电镜示肌纤维中大量脂质沉积,以Ⅰ型纤维为主,结论ＬＳＭ是一组以肌无力和肌疲劳为主要表现的肌纤维内脂肪代谢障碍病。肌肉病理检查有助于确定诊断。激素治疗有效。     

高压氧对急性一氧化碳中毒大鼠心肌超微结构的影响

目的：研究高压氧(HBO)对急性一氧化碳中毒大鼠心肌超微结构的保护作用。方法：将大鼠随机分为急性一氧化碳中毒(ACMP)第1天、5天、10天、15天组和HBO第1天、5天、10天、15天组以及正常对照组。建立急性一氧化碳中毒大鼠模型。应用电镜观察各组心肌超微结构改变。结果：ACMP第1天组可见弥漫性心肌细胞内线粒体肿胀，嵴减少甚至消失而变空等现象；第5天组可见部分心肌细胞出现局灶性肌溶灶；第10天组可见多数心肌细胞线粒体损伤减轻；第15天组间质水肿仍可见。HBO组病理改变在第1天、5天、10天组均明显轻于同期的ACMP组，第15天组的超微结构已恢复正常。结论：HBO可以显著减轻ACMP大鼠心肌超微结构的损伤程度，对心脏有明显的保护作用。     

IgA肾病的病理与临床研究

完成单位:福建医科大学基础医学院, 南京军区福州总医院 主要完成人员:陈振斌, 庄永泽, 梁平, 郑智勇, 谢福安 研究起止时间:1992年1月～1998年8月 获奖种类及等级:福建省科技进步三等奖 该课题运用临床资料、组织病理、免疫病理、超微病理等手段,对较大量IgA肾病进行综合性研究,以半定量方法进行统计学处理。结果发现:肾小球系膜区大量沉积物、内皮下或上皮下沉积物、系膜溶解、旁区病变、基膜异常、系膜插入等七种超微结构改变是IgA肾病进展恶化和预后不良的较早期指标。系膜区α-SMA、PCNA和FN的表达,反映了系膜细胞机能状态和增生程度。间质α-SMA的表达是预后不良的可靠指标。PTAA方案疗效好。该成果可指导临床早期发现和早期治疗,具有良好的经济、社会效益。     

转化生长因子β1对新鲜同种异体神经移植后神经再生的影响

背景周围神经缺损多采用自体神经移植,但存在一些问题,许多学者尝试异体神经移植,但存在许多问题,免疫排斥反应就是其中之一.目的观察局部应用转化生长因子β1对新鲜同种异体神经移植后神经再生的影响.设计随机对照的实验.单位华中科技大学同济医学院附属协和医院手外科.材料实验于2001-08/2002-10在华中科技大学同济医学院附属协和医院完成.选择健康成年不同窝的Wistar大鼠60只,随机分为实验组、空白组、对照组3组,每组20只.方法制备转化生长因子β1质粒待用.制备动物模型,将两组大鼠的坐骨神经在梨状肌孔下0.5 cm处,用消毒的剃须刀片整齐切断并切除2.0 cm,切除的神经段互换移植修复神经缺损,实验组局部肌肉及神经两断端注射转化生长因子β1质粒,空白组、对照组注射等量的生理盐水,实验组、空白组不使用任何药物,对照组给予环孢霉素A(15 mg/kg)喂养.分别于6周和12周各取10只取材、切片、染色染色①Gleesluxotfast blue法染色.②髓鞘坚牢蓝染色法.轴索计数术后12周的移植体中段染色标本,随机取视野,在光镜400倍下计算1.0mm2内轴索数.组间比较采用t检验.主要观察指标各组移植区形态学观察和轴突计数.结果实验动物数量分析60只动物在实验过程中无死亡,全部进入结果分析.①空白组可见移植物的不同地方出现广泛的单核细胞浸润,髓鞘脱水,可见大量的空泡变性,以6周时最为明显,整个移植物均被单核细胞浸润,排异反应严重,在移植段中,有极少量的轴突再生.12周时,移植体变细,大量瘢痕组织增生,水肿明显,可见极少量的许旺氏细胞和再生轴突,绝大多数再生的轴突未通过整个移至段.实验组、对照组有少量的单核细胞浸润,水肿较明显,但可见新生的血管在移植神经中形成,再生的轴突通过移植体.6周时,可见较多的许旺氏细胞增生.12周时,再生轴突已通过移植体,有一定量的髓鞘形成,许旺氏细胞增生明显,轴索间水肿减轻.各组移植段中外周的神经再生的轴突数量和髓鞘再生的数量较中心的多,且实验组中外周的轴索间水肿较中心的明显减轻.②术后12周,每组各取5只大鼠,在神经移植体中段随机取视野,400倍显微镜下观察计算1.0 mm2内轴突数,实验组、对照组轴突数显著高于空白组,组间差异有极显著性[(78.3±4.6),(76.1±4.2),(15.0±3.5),t=3.056,t=2.948,P＜0.01].实验组和对照组接近,差异无显著性[(78.3±4.6),(76.1±4.2),t=1.982 P＞0.05].结论局部使用转化生长因子β1质粒,可在局部发挥免疫抑制作用,降低宿主的免疫排斥反应.并使移植体轴突数增多,促进神经生长.     

正交试验优选甘草酸的复合酶法提取工艺

目的:优选复合酶法提取甘草酸的工艺条件。方法:在单因素试验基础上,以甘草酸提取率为指标,采用正交试验以酶解pH、酶解时间、酶的用量和酶解温度为考察因素优选酶解工艺;采用单因素试验考察浸提工艺中料液比、浸提次数、浸提时间、浸提液pH、浸提温度、乙醇体积分数、氨水体积分数对甘草酸提取率的影响;再采用正交试验以酶解温度、酶的用量、浸提时间、浸提液pH、浸提温度、乙醇体积分数、氨水体积分数为考察因素优选复合酶法提取工艺。结果:优选的提取工艺为40g甘草粉末加入250 ml复合酶,40℃下进行酶解,在按料液比为1∶20(m/m)加入70%乙醇,溶剂中氨水的体积分数为0.6%,调pH为8,浸提1.5 h,在45℃下浸提3次(溶剂体积比为5∶5∶4)。在该工艺条件下,甘草酸提取率可达85.02%。结论:所选工艺操作简单、节约能源,且提取率高,可用于甘草酸的提取。