缺血预处理对大鼠移植胰细胞凋亡的影响

目的 观察缺血预处理对大鼠移植胰细胞凋亡的影响。方法 6只正常大鼠为对照组，18只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I／R组，n=6）、供胰缺血预处理组（DIPC组，n=6）和受体双后肢缺血预处理组（RIPC组，n=6），均行单纯胰腺移植（18只正常SD大鼠为供体）；检测各组大鼠再灌注前、后血糖；再灌注后2h移植胰组织中超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）含量；用TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况。结果 与I／R组比较，DIPC组和RIPC组大鼠再灌注后的血糖、MPO活性和移植胰组织细胞调亡指数明显降低，移植胰组织中SOD活性明显增高（均为P〈0．01）。结论 供胰和受体大鼠双后肢缺血预处理能减轻大鼠移植胰细胞的凋亡现象。     

参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用

目的：探讨参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用。方法：糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组（I-R组）和参附注射液组（SF组）各30只，2组移植前2日,再灌注3和7日各随机处死6只大鼠，取血测血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色，用于观测各种代谢指标；其余6只大鼠观察1个月存活率。结果：再灌注后SF组1个月存活率高于I-R组（5/6∶3/6），各时间点血糖、血淀粉酶、进食量、排尿量和饮水量均低于I-R组（P〈0.01或0.05）；I-R组移植胰的损伤程度大于SF组。结论：参附注射液预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率，降低血淀粉酶活性，减轻胰腺的再灌注损伤程度，对大鼠胰腺移植具有保护作用。     

参附注射液对大鼠移植胰缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨参附注射液对大鼠移植胰缺血/再灌注损伤的保护作用,并分析其中的机制。方法正常SD大鼠6只为对照组,糖尿病SD大鼠24只随机分为4组,每组6只。缺血/再灌注组(I/R组)、参附预处理组(SF组)、红参预处理组(HS组)和附子预处理组(FZ组)。除对照组外各组均行胰腺移植,24只SD大鼠为供体。SF、HS和FZ组在移植前1日及术前30 min经静脉分别予受体注射参附注射液(10 mg/ kg)、红参注射液(9 mg/kg)、附子注射液(1 mg/kg),对照组和I/R组在移植前1日及术前30 min经静脉予受体注射同等容积生理盐水。检测各组再灌注前、后血糖；再灌注后2 h血清中TNF-α和NO的含量、移植胰组织中SOD,MPO和MDA含量；用TUNEL法观察移植胰组织细胞凋亡情况,Western Blot法检测移植胰组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果再灌注后SF组、HS组和FZ组较I/R组血糖低、血清中TNF-α含量低、NO含量高；再灌注后SF组、HS组和FZ组较I/R组移植胰组织中SOD活性高、MDA含量低、MPO活性低、凋亡指数低、Bcl-2表达高、Bax表达低、Bcl-2/Bax比值高。结论参...     

表皮生长因子防治急性胰腺炎大鼠肠道细菌移位

探讨表皮生长因子对急性胰腺炎大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用。取 SD大鼠 32只 ,采用 3.5 %牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射建立急性胰腺炎模型后 ,随机分为对照组 (n=16 )及治疗组 (n=16 ) ,对照组给予全肠外营养支持 ,治疗组给予相同配方的全肠外营养支持 ,并予表皮生长因子皮下注射。于治疗后第 1及第 5天处死 ,检测大鼠肠道通透性、吸收功能、空肠粘膜蛋白、DNA含量及肠道细菌移位率。结果 :在术后第 5天 ,治疗组动物肠道通透性显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;空肠粘膜蛋白及 DNA含量显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;肝及脾细菌培养阳性率显著…     

抗肿瘤坏死因子α单克隆抗体不能防治急性胰腺炎全肠外营养大鼠肠道细菌移位

探讨抗肿瘤坏死因子 α单克隆抗体对急性胰腺炎全肠外营养大鼠肠道细菌移位的影响。取 SD大鼠 32只 ,采用 3.5 %牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射建立急性胰腺炎模型 ,随机分为对照组 (n=16 )及治疗组 (n=16 ) ,对照组给予全肠外营养支持 ,治疗组除给予相同配方的全肠外营养支持外 ,并予肿瘤坏死因子 α单克隆抗体静脉内注射。于治疗后第 1及第5天处死 ,检测大鼠肠道通透性、吸收功能、空肠粘膜蛋白、DNA含量以及肠道细菌移位率。结果 :治疗后两组动物间肠道通透性、吸收功能、空肠粘膜蛋白、DNA含量以及肠道细菌移位率均无显著差别。结论 :抗…     

大鼠小肠缺血再灌注后氧自由基改变及肝脏Bax、Bcl-2、p53的表达

目的探讨小肠缺血再灌注后对肝组织的损伤。方法建立小肠缺血再灌注模型，分对照组，再灌注后O、30min、1h、2h、1d、3d、7d共8组，于各时点检测血中一氧化氮(N0)和超氧化物歧化酶(SOD)的浓度，用免疫组织化学SP法观察肝组织中Bax、Bcl-2、p53的表达情况。结果大鼠小肠缺血再灌注后N0浓度在再灌注Omin升高，但至再灌注2h时则明显降低，其后又持续升高，至再灌注7d时达高峰。SOD浓度在再灌注Omin明显下降，再灌注2h时升高，随后持续下降，至再灌注7d时达最低水平。再灌注Omin，肝组织中Bax、Bcl-2、p53阳性细胞率增高，再灌注30min时，Bax、Bcl-2、p53阳性细胞率升高更为明显，但Bcl-2表达明显高于Bax(P＜O．01)。再灌注2h时，3种基因均有所降低，其后又开始升高，再灌注7d时阳性细胞率达高峰，Bax表达明显高于Bcl-2(P＜O．01)。结论大鼠小肠缺血再灌注后引起血中N0和SOD的浓度变化及Bax、Bcl-2、p53阳性细胞在肝组织中的表达改变，并可能引起细胞调亡和损伤。     

银杏提取物对2型糖尿病大鼠胰腺移植的保护作用

背景:银杏提取物具有抗氧化、清除自由基和抗血小板激活因子的药理作用,并且可以减轻多种器官的缺血再灌注损伤。目的:观察银杏叶提取物能否减轻2型糖尿病大鼠接受的移植胰的缺血再灌注损伤。设计:完全随机分组设计,对照实验。单位:解放军第四军医大学西京医院胃肠外科和麻醉科。材料:选用SD雄性大鼠128只,3～6月龄,体质量250～320g。银杏叶提取物(德国威玛舒培大药厂,5mL/支,含有银杏提取物17.5mg,其中银杏黄酮苷4.2mg,生产批号:1511102)。方法:实验于2001-09/2004-04在胃肠外科实验室完成。①取80只大鼠自阴茎静脉注射链脲佐菌素65mg/kg,其中60只空腹血糖持续2周超过17.4mmol/L者视为2型糖尿病大鼠。其余48只正常大鼠为供体。②将60只糖尿病大鼠随机分为2组:缺血再灌注组和银杏叶提取物组,每组30只。2组均行胰腺移植。缺血再灌注组于获取供胰前以4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)灌洗20min;银杏叶提取物组于移植前1d及术前30min经静脉分别予受体注射银杏叶提取物1.5mL/kg,缺血再灌注组经静脉注射同等容积生理盐水。供胰均置入4℃肝素冰平衡盐液(1.5×105U/L)中保存,各组控制冷缺血时间为180min,热缺血时间为15min。③两组移植前2d,移植后3和7d随机各处死6只大鼠,取血查空腹血糖,并按由南京建成生物工程研究所提供的相应试剂盒说明检测血淀粉酶活性;同时取胰腺组织行苏木精-伊红染色;6只大鼠用于观测各种代谢指标。其余6只大鼠用来观察大鼠移植术后1个月内存活率。④计量资料差异比较采用配对t检验。主要观察指标:①两组受体大鼠移植胰腺前后空腹血糖水平、代谢指标、血淀粉酶活性变化。②两组受体大鼠移植术后3和7d移植胰腺的病理形态。结果:受体大鼠60只均完成血糖、饮水量、进食量、排尿量、血淀粉酶测定。①银杏叶提取物组移植术后1个月内存活率明显高于缺血再灌注组(83%,33%,P<0.01)。②缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d空腹血糖、饮水量、进食量、排尿量均明显较移植前2d下降(P<0.05～0.01),银杏叶提取物组大鼠移植术后3和7d明显低于缺血再灌注组(P<0.05～0.01)。③缺血再灌注组和银杏叶提取物组大鼠移植后3d血淀粉酶活性较移植前明显升高(P<0.01,0.05);缺血再灌注组移植后7d血淀粉酶活性仍明显高于移植前2d(P<0.01),银杏叶提取物组已基本恢复正常;移植后3和7d银杏叶提取物组血淀粉酶活性均明显低于缺血再灌注组(P<0.01)。④病理观察结果显示,胰腺移植术后,缺血再灌注组胰腺的损伤程度大于银杏叶提取物组。结论:银杏叶提取物预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率,降低血淀粉酶活性,改善代谢,减轻了胰腺的再灌注损伤程度,对大鼠的胰腺移植具有保护作用。     

补充硒减轻5—氟尿嘧啶对大鼠空肠功能的损害

目的：探讨补充硒减轻腹腔注射５－氟尿嘧啶对大鼠空肠功能损伤的机理．方法：６０只大鼠随机分为补硒组（Ｓｅ）和非补硒组（ＮＳｅ）,经腹腔注射５－ＦＵ后,分别于注射后第１,３,５日处死,检测大鼠空肠粘膜水分、硒含量、丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶和双糖酶活性．结果：两组动物空肠粘膜水分含量无显著差别;Ｓｅ组空肠粘膜硒含量显著高于ＮＳｅ组（Ｐ＜０．０１）;丙二醇含量在注射５－ＦＵ后第１,３日显著低于ＮＳｅ组（Ｐ＜０．０５）;谷胱甘肽过氧化物酶活性在注射后第五日显著高于ＮＳｅ组（Ｐ＜０．０５）;蔗糖酶及麦芽糖酶活性在注射后第３日显著高于ＮＳｅ组（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）．结论：补充硒减轻５－氟尿嘧啶对大鼠空肠功能的近期损害．     

高渗盐水复苏对失血性休克兔脏器血流量的影响

探讨高渗盐水复苏对失血性休克兔脏器血流量的影响及机理。健康家兔按２０ｍｌ／ｋｇ体重放血致失血性休克，６０ｍｉｎ后，分别回输１０％放血量的抗凝自体全血、生理盐水及高渗盐水，记录不同时刻颈动脉压，采用放射性微球技术检测动力心、肾、胃及空肠血流量。高渗盐水复苏后，失血性休克家兔平均动脉压迅速提高，脏器血流量增加，显著高于缺血对照组，高渗盐水复苏失血性休克，可迅速提高动物平均动脉压，改善脏器灌流。     

大鼠小肠转化生长因子β1重组腺病毒载体的构建和表达

目的 构建可调控性大鼠小肠TGF-β1表达的重组腺病毒载体.方法 按RNA提取试剂(TRIzol Reagent)说明书步骤从大鼠小肠组织抽提总RNA,克隆TGF-β1基因;经穿梭载体与可调控性腺病毒载体骨架连接,鉴定后在HEK293细胞包装.获得高滴度病毒后,取上清检测绿色荧光蛋白(GFP)的表达,观察目的 基因的表达情况.结果 扩增出与预期大小一致的cDNA片段,其中TGF-β1大小为1173 bp;其基因序列与GenBank登录的大鼠TGF-β1基因序列完全一致.重组TGF-β1腺病毒获得的滴度约为1012 PFU/ml;病毒包装后绿色荧光蛋白表达的检测结果显示,绿色荧光蛋白随着时间的延长,表达量逐渐增高;与预期结果一致.结论 构建的可调控性大鼠小肠TGF-β1重组腺病毒载体得到了正确表达,为进一步研究TGF-β1干扰树突状细胞分化成熟诱导小肠移植免疫耐受提供了依据.