阿尔茨海默病的影像学研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病,临床上以记忆减退、人格和行为障碍、认知功能和精神障碍等表现为特征,并伴有神经炎性斑块和神经原纤维缠结的典型病理学改变。目前临床常用的计算机断层扫描和磁共振成像等结构影像学技术,仅能发现出现了脑组织结构改变的AD患者,但无法实现疾病的早期和超早期诊断。功能影像学和分子影像学分别能从功能水平和分子水平评估AD的发展进程和变化,功能影像学技术包括CT灌注成像、功能磁共振成像和动脉自旋标记等,通过检测局部脑组织血流灌注的变化来评价大脑活动和功能的改变,对诊断临床前AD有着指示性作用。分子影像学技术包括正电子发射断层扫描、单光子发射计算机断层扫描、磁共振波谱成像等,在确定AD标志性生物靶点的基础上,开发出相应的放射性示踪剂,识别和结合AD特征性病理分子,从细胞层面的病理变化实现AD早期发现。相比于结构和功能影像学,分子影像学技术对AD早期发现、分级评估、治疗效果预测有着更大的作用,为阐明发病机制、研发药物新靶点提供了全新的技术路径。该文概述了AD各类影像学技术的最新研究进展,分析了相关技术的临床和科研价值,并评价不同技术的优缺点,并浅谈了未来的展望与挑战。 [国际神经病学神经外科学杂志, 2022, 49(5): 60-66]     

IL-12真核表达质粒对小鼠气道变应性炎症的免疫调节作用

目的:研究IL-12真核表达质粒(psIL-12)在气道内表达对成年小鼠气道变态反应炎症的影响.方法:以卵白蛋白(OVA)复制成年小鼠气道变态反应炎症模型,气道内应用单剂量psIL-12,pcDNA3.1(+),PBS/脂质体复合物,同时设正常对照组.分别检测肺单链IL-12表达,计数支气管肺泡灌注液(BALF)中嗜酸粒细胞的百分比和IL-4,IFN-γ含量,观察肺组织形态学变化.结果:气道转染psIL-12可在小鼠肺组织中表达IL-12mRNA;psIL-12干预组BALF中嗜酸粒细胞百分比为(2.6±2.3)%,较PBS对照组(11.6±2.3)%明显降低,两组组间差异具有显著性(P<0.05).psIL-12干预组BALF中IL-4含量为(103±53)ng/L,IFN-γ含量为(171±20)ng/L,而PBS对照组IL-4含量为(319±12)ng/L,IFN-γ含量为(77±36)ng/L,两组组间差异具有统计学意义(P<0.05).psIL-12可明显阻止模型鼠肺组织病理改变,降低血清中OVA特异性IgE抗体含量.结论:psIL-12转染气道表达IL-12,增加Th1型细胞因子IFN-γ的产生,...     

肿瘤特异性hTERT启动子与Survivin启动子在肺癌A549细胞中的转录活性研究

目的:比较不同长度的hTERT启动子以及Survivin启动子在肺癌A549细胞中的启动活性,为肺癌靶向性基因治疗提供依据.方法:用PCR法扩增1084 bp hTERT启动子、980 bp Survivin启动子和红色荧光蛋白基凶;在真核表达质粒pGL3-hTERT基础上分别构建3种启动子调控的、以红色荧光蛋白CDS为目的基因的真核表达质粒pGL-H-RED、pGL-LH-RED和pGL-S-RED.将重组质粒用脂质体分别转染A549和MRC-5细胞,72h后用Imagepro-Plus6.0分析3种启动子在相同时间内启动红色荧光蛋白的表达水平.结果:重组质粒在A549细胞中观察到了红色荧光,在MRC-5细胞中无红色荧光.pGL-S-RED质粒在A549细胞巾表达最强,pGL-LH-RED次之,pGL-H-RED最弱,3种质粒在A549细胞中的荧光强度(IOD)分别为201.17、171.70和136.34.结论:所克隆的hTERT启动子和Survivin启动子均表现出肿瘤特异性,其中Survivin启动子在肺癌A549细胞中具有最好的启动效应,可望开发成为肺癌靶向性基因治疗工具.     

HLA—G基因14bp插入／缺失多态性与我国汉族类风湿关节炎相关性研究HLA—G基因14bp插入／缺失多态性与我国汉族类风湿关节炎相关性研究

目的探讨HLA—G基因14bp插入／缺失多态性与类风湿关节炎（RA）易感性的相关性,并分析其不同基因型间RA患者临床特点的差异。方法多聚酶链式反应（PCR）检测154例RA患者及367名健康体检者的HLA—G基因14bp插入／缺失多态性,比较不同基因型RA患者间关节肿胀数、关节压痛数、关节晨僵时间、病情活动指数DAS28积分及实验室指标如C反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）、抗CCP抗体滴度的差异。结果HLA-G 14bp插入／缺失多态性基因型频率分布在正常人和RA患者均显示Hardy-Weinberg平衡（正常人组：χ^2=0．095,P=0．953;RA组：χ^2=0．533,P=0．766）;HLA—G1 4bp插入／缺失多态性基因和基因型频率与RA易感性均元显著性的相关性联系;与＋14bp／＋14bp和＋14bp／-14bp基因型RA患者比较,-14bp／-14bp纯合子基因型RA患者的压痛关节数（P=0．049）、肿胀关节数（P=0．004）明显增多,病情活动指数DAS28明显更重（P=0．028）,RF滴度更高（P=0．001）。结论HLA-G基因14bp插入／缺失多态性与RA疾病易感性无关,但可影响RA患者的临床表现,HLA-G—14／-14bp纯合子型可能作为预后不良因素参与到RA疾病机制之中。     

血清CagA IgG在根除幽门螺杆菌过程中的诊断价值

多年来,众多学者的研究表明幽门螺杆菌(Helicobacter pylo ri,Hp)是慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌等多种胃疾病的重要致病因素,根除Hp感染已具有重要的临床意义[1].但根除效果的观察较困难,常需经胃镜取胃粘膜组织.多次检查,病人难以接受.国外资料报道,Hp被清除后,血清特异IgG明显下降,但所需时间长, 且难以降至正常水平[2].近年的研究表明,临床分离的Hp可分为产细胞空泡毒素( Vacuolating cytotoxin,Vac)的Toxin+和不产Vac的Toxin-两种类型,所有的Toxin+ 株能表达一种蛋白质,称为细胞毒相关基因抗原(cytotoxin associated gene antigen,Cag A).CagA在Hp中含量极微,却能引起强烈的免疫反应.     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的制备

ＣＦＰ10和ＥＳＡＴ6都是结核分枝杆菌(Ｍ .ｔｂ)特有的、有良好抗原性的分泌性蛋白 ,将其编码基因 1ｈｐ和ｅｓａｔ6用ＧｅｎｅＳＯＥｉｎｇ法通过Ｌｉｎｋｅｒ (Ｇｌｙ4 Ｓｅｒ) 3构建成融合基因 ,并克隆入ｐＱＥ30质粒 ,表达、纯化、鉴定ｒＣＦＰ10 ＥＳＡＴ6 ,为其应用于Ｍ .ｔｂ感染的诊断和预防奠定基础。1 1ｈｐ ｅｓａｔ6基因的构建 :以已构建的ｐＱＥ30 ＣＦＰ10质粒为模板 ,用引物(Ｐ1) 5′ ＣＣＧＧＡＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＡＧＡＴＧＡＡＧＡＣ 3′和 (Ｐ2 ) 5′ ＧＣＴＧＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣＣＧＣＴＴＣＣＧＣＣＡＣＣＧＣ…     

结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗的免疫效果观察

目的:研究并比较结核分枝杆菌(H37Rv)Ag85B、MPT64DNA.以及两者的融合基因(AM)的免疫原性。方法:雌性C57BL/6小鼠25只,随机分为5组,即A组(PBS)、B组(peDNA3.1)、C组(pcDNA/Ag85B)、D组(pcDNA/MPT64)和E组(pcDNA/AM)。分别于胫前肌注射7.5 g/L利多卡因和质粒混合物(1:4,100μL,含质粒70μg/次),间隔2 wk免疫 1次,共3次。末次免疫后4 wk取血分离血清测定总IgG,同时分离脾淋巴细胞,用PPD刺激后分别做脾淋巴细胞增殖实验(MTT比色法)和测定脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ的水平。结果:Ag85B、MPT64和AM质粒DNA,均能诱导小鼠产生较高水平的PPD特异性IgG。免疫小鼠脾淋巴细胞体外经PPD刺激后,能产生特异性淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ。peDNA/AM组IFN-γ的分泌水平明显高于pcDNA/Ag85B和pcDNA/MPT64免疫组(P<0.05)。结论:结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因疫苗,能在小鼠体内诱导特异性细胞和体液免疫。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制.方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组.12周未时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hey)含量;常规方法检测各组大鼠肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率;放射免疫法检测肾组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;免疫组化法检测肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth fae-tor,CTGF)表达;透射电镜观察肾脏超微结构.结果:12周末时,DM模型组大鼠血浆Hey的含量明显增加,肾皮质CTGF表达显著升高,肾组织AngⅡ含量显著增多,肾重/体重、血糖、尿白蛋白排泄率、尿素氮、血肌酐显著增高,肾脏超微结构改变明显.氯沙坦治疗组上述指标显著低于DM模型组(P＜0.01),肾脏超微结构改变明显较轻.结论:氯沙坦对DM大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制值得进一步研究.     

Ag85B DNA疫苗对鼠结核分枝杆菌感染的保护作用

由于卡介苗(BCG)的免疫效果不稳定，结核分枝杆菌(MTb)耐多药菌株的流行以及MTb与艾滋病毒联合感染病例的不断增加，结核病与艾滋病、疟疾一起被世界卫生组织(WHO)列为严重威胁人类健康的主要传染病之一，寻找一种比BCG更有效的抗MTb感染的疫苗已经成为当务之急。DNA疫苗是20世纪90年代发展起来的一种崭新的免疫接种技术，能在宿主体内表达病原体抗原，通过内源性抗原肽提呈方式有效地诱导全面的免疫应答，尤其是特异性CTL的形成。MTb Ag85B是被证实具有较强免疫保护作用的蛋白成分。本研究在已经构建Ag85B真核表达质粒并证实能在小鼠体内诱导特异性体液和细胞免疫应答的基础上，进一步研究其在小鼠体内抗MTb感染的能力。     

人颗粒溶素与小鼠单链IL-12真核共表达质粒的构建及其在RAW264.7细胞中的表达

目的构建人天然颗粒溶素（Granulysin，GLS）和小鼠单链IL-12基因的真核共表达载体pZM02并在RAW264．7细胞中进行表达。方法将人GLS和小鼠单链IL-12基因同时克隆进多启动子真核共表达载体pBudCE4．1中，得到真核共表达质粒pZM02，以pZM02转染小鼠巨噬细胞株RAW264．7，通过RT-PCR、免疫细胞化学和ELISA的方法检测目的基因的表达。结果在转染后的RAW264．7细胞中同时检测到了人GLS和小鼠IL-12的表达。结论人GLS能够与小鼠IL-12在小鼠巨噬细胞株RAW264．7中实现共表达，pZM02的成功构建为进一步研究GLS与IL-12的协同细胞免疫作用机制和免疫治疗作用奠定了基础。