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71.
mRNA作为结核分支杆菌活菌检测标志的可行性研究 总被引:6,自引:2,他引:6
目的 探讨mRNA作为结核分支杆菌活菌检测标志的可行性。方法 采用定量聚合酶链反应(PCR)方法测定结核分支杆菌H37Rv在利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、氧氟沙星处理后24、48、72h 85B mRNA表达水平的变化,并与活菌计数方法对比。结果 在异烟肼、利福平和链霉素处理24h时,结核分支杆菌H37Rv活菌数下降明显;在异烟肼、链霉素、乙胺丁醇及氧氟沙星各药各浓度处理72h时,活菌数相似,但利福平处理后活菌数较它们低。利福平处理24h后85B mRNA下降到无药对照的0.02%,其他药物处理分别下降到无药对照的1%~10%;各药处理72h后85B mRNA均下降到1%以下。结论 mRNA表达水平可以在短时间内反映出用药与无药的区别,并与菌落形成单位(cfu)几乎呈平行关系。mRNA是检测和判定结核分支杆菌“死”“活”的分子标志物。 相似文献
72.
结核病是呼吸道传播的慢性传染病,在全球及我国广泛流行,成为重大的公共卫生问题和社会问题。我国是世界上22个结核病高负担国家之一,结核病患者数居世界第2位,80%的患者在农村,大部分患者为青壮年,每年死亡率13万人。2000年第4次全国结核病流行病学抽样调查结果表明,活动性和涂阳肺结核的患病率分别为367/10万和122/10万,估计全国活动性肺结核患者450万例,结核病的病死率居各种死因的第9位,居传染病死因的第一位。 相似文献
73.
目的对比研究链霉素纳米制剂与普通制剂一硫酸链霉素注射液在小鼠体内肠胃外给药时的抗结核活性。方法雌性BALB/c小鼠尾静脉感染结核分枝杆菌H37Rv1×10^7CFU。感染后第二天开始按照空白对照组、阳性对照组、比较对照组和纳米链霉素SM-NPBSA组、纳米链霉素SM.NPCRM组的剂量和频率分别腹腔注射给药,给药至感染后28天。在感染的14、28、56天分别处死每组4只小鼠进行脾、肺活菌计数。结果SM-NPCRM组在整个实验期间的存活率是100%,SM-NPBSA组第28天和第56天的存活率分别为83%和75%。治疗14天时,比较对照组小鼠脾、肺的菌量较阳性对照组大,而SM--BSA与SM—CRM组小鼠脾、肺的活菌数较阳性对照组降低;治疗4周时,各组的活菌数与2周时相比没有明显变化,但SM.NPBSA与SM-NPCRM组的脾、肺活菌数均比比较对照组低,且具有统计学差异。感染8周时,SM-NPBSA、SM-NPCRM组肺的活菌数量仍比阳性对照组小,且具有统计学意义。结论纳米链霉素制剂SM-NPBSA、SM-NPCRM与普通链霉素注射液相比,在给药剂量与给药频率降低时,在小鼠急性结核病感染模型中表现的抗菌活性仍与阳性对照相当,值得进一步研究。 相似文献
74.
目的 评价雷帕霉素药物涂层支架 (CYPHER ,Cordis)对冠心病治疗效果的初步观察。方法 我院在 2 0 0 2年 10月至 2 0 0 3年 10月的 16例冠心病患者置入CYPHER支架 ,病变长度 18~ 35mm ,术前病变狭窄程度 (90±9 0 ) % ;心血管直径 (2 75~ 3 5mm)。观察药物涂层支架的手术成功率、术中并发症、住院期间及 1年内随访期间的心绞痛、再次血管重建、支架内血栓形成等发生。结果 手术即刻成功率 10 0 % ,术后造影病变残余狭窄 0 % ,支架完全覆盖病变 ,支架近远端无夹层 ,血流TIMI 3级。临床随访 1年13例患者心绞痛消失 ,12例术后 6个月复查冠脉造影 ,无支架内血栓形成 ,无血管再狭窄。结论 雷帕霉素药物涂层支架用于冠心病治疗是安全的 ,临床效果明显优于冠脉普通支架置入 相似文献
75.
国产抗结核固定剂量复合剂的药效学和药代动力学研究 总被引:20,自引:1,他引:20
目的 研究国产固定剂量复合剂的药效学和药代动力学,评价其抗结核作用及产品质量。方法 采用二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),以半数动物存活时间为指标比较药物对实验性结核病的疗效。高效液相色谱法测定健康志愿者口服同剂量国产及进口三药复方片剂(卫非特)的血药浓度,求出各组分的主要药代动力学参数及相对生物利用度,并用双单侧t检验分析药物等效性。结果 复方制剂各成分对结核分枝杆菌的MIC均低于单独应用时各自的MIC;对小鼠试验性结核病均显著优于三者相应剂量单独应用的效果,与国外相应产品卫非特比较未见显著性;国产与进口片剂的主要药代动力学参数t1/2、Cmax、AUC、tmax未见显著性差异,相对生物利用度生物等效性检验合格。结论 三药复方的抗结核作用具有协同作用;国产与进口片剂为等效制剂。 相似文献
76.
77.
目的 评价应用mRNA定量法进行结核分枝杆菌利福平敏感性分析的可行性和应用价值。方法 定量检测结核分枝杆菌85B mRNA,分别以mRNA拷贝数百分比(使用利福平药物后mRNA拷贝数占用药前的百分比)为1%和10%作为耐药临界指标分析53株结核分枝杆菌临床分离株对利福平的敏感性,并与绝对浓度法作比较,其中29株为利福平耐药株、24株为利福平敏感株。结果 53株结核分枝杆菌临床分离株mRNA定量法检测:在利福平浓度为1μg/ml的条件下分别以1%和10%为耐药临界比例时,与绝对浓度法相比准确性分别为70%、81%,敏感性分别为:100%、100%,特异性分别为33%、58%;在利福平浓度为2μg/ml的条件下分别以1%和10%为耐药临界比例时,与绝对浓度法相比准确性分别为85%、93%,敏感性分别为100%、97%,特异性分别为67%、88%,在利福平浓度为4μg/ml的条件下分别以1%和10%为耐药临界比例时在与绝对浓度法相比准确性分别为93%、93%,敏感性分别为93%、93%,特异性分别为92%、92%。结论 mRNA定量法用于结核分枝杆菌药物敏感性分析具有快速、可定量等优点,建议mRNA定量法测定利福平敏感性采用临界药物浓度为2 μg/ml、耐药临界比例为10%。 相似文献
78.
目的 评价滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)对痰标本中结核分枝杆菌利福平敏感性的直接快速检测效果.方法 选取首都医科大学附属北京胸科医院住院的初治和复治涂阳肺结核患者24h痰标本32份,采用RCA法、直接测序法及传统药敏试验绝对浓度法测定痰标本中结核分枝杆菌对利福平的敏感性,并进行了比较.结果 32份痰标本中结核分枝杆菌,采用RCA法24株可检测到rpoB基因突变,其中23株单位点突变(516位2株,526位12株,531位9株),1株516位和526位联合突变,与直接测序结果均一致.32份痰标本的RCA方法检测与DNA测序结果和药物敏感性试验进行对比,28株结果均一致.4株结果不一致,其中2株RCA及测序无突变,药敏结果显示为耐药;2株RCA及测序显示有突变,药敏结果显示为敏感.结论 RCA法用于痰标本中直接检测结核分枝杆菌对利福平的敏感性,同直接测序法结果一致,同传统药敏试验相比,RCA法能够大幅度节省时间,具有很好的临床应用和推广前景. 相似文献
79.
目的建立抗结核新药细胞毒性筛选的MTT法并应用于氯苯吩嗪衍生物IC50的测定,为新药筛选提供参数和依据。方法取Vero和HepG2细胞,用培养液制成不同浓度的细胞悬液,96孔培养板中培养2-4h后加入MTT作用4h,弃去培养液,加入DMSO溶解其甲躜颗粒,在405nm,450nm,492nm和630nm波长处测定OD值,根据不同波长所测OD值的大小确定其最佳检测波长。根据细胞浓度与OD值关系曲线确定其最适细胞浓度。取最适浓度细胞接种入96孔培养板,与经3倍系列稀释的不同浓度的化合物作用48h后测定其OD值,计算化合物对Vero和HepG2细胞的相对抑制率,用origin7.0软件拟合量效曲线,计算各化合物的Ic50结果MTT的最佳检测波长为492nm,最适细胞接种浓度为2.5×10-4×105个/ml。所测定的131个氯苯吩嗪衍生物对Vero和HepG2细胞的IC50结果相似;其中有10个化合物的Ic50大于其最高试验浓度,提示其细胞毒性较小。结论采用MTT法检测化合物对Vero细胞的增殖反应,可经济、快速地对抗结核新药的细胞毒性进行初步筛选。 相似文献
80.
目的:分析10年中沈阳地区铁路职工内科住院患者冠状动脉性心脏病(冠心病)危险因素结构及强度的变化趋势,为早期防治冠心病提供依据。
方法:①选择1993/2002沈阳铁路局中心医院心内科住院患者,包括冠心病、风湿性心脏病、高血压、心肌病、心律失常及其他患者。1993/1995组1500例,2000/2002组1500例,调查体质量指数、收缩压、舒张压、血糖、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、吸烟等危险因素结构及强度的变化趋势及与冠心病构成比、住院期间病死率的相关关系。
②在沈阳铁路局中心医院,调查2003年内科各科系及体检中心就诊的4900例患者的血脂异常,高血压、吸烟、糖尿病、体质量指数、焦虑状态、血半胱氨酸、脂蛋白(a)、C-反应蛋白、年龄及家族史情况。分析冠心病危险因素的强度、结构与冠心病构成比、住院期间病死率的联系。预测沈阳地区铁路职工心血管事件发病的绝对危险度。
结果:1993/1995组1500例,2000/2002组1500例患者全部进入结果分析。2003年来沈阳铁路局中心医院内科就诊的患者4900例全部进入结果分析。①1993/2002冠心病危险因素强度中体质量指数,舒张压、三酰甘油呈显著上升趋势。冠心病危险因素结构排序为:原发性高血压、体质量指数超过标准(肥胖)、高三酰甘油血症、高胆固醇血症、吸烟、糖尿病。②2003年调查资料分析显示:收缩压、舒张压、高三酰甘油血症、高胆固醇血症、吸烟、焦虑、年龄与冠心病构成比呈正相关(r=0.79~0.80,P〈0.01)。收缩压、舒张压、焦虑、年龄与冠心病住院期间病死率呈正相关(r=0.71~0.73,P〈0.05)。沈阳地区铁路职工心血管事件发病绝对危险度男性为13.2%,女性9.7%。
结论:原发性高血压、体质量指数超标、焦虑、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、吸烟、糖尿病是沈阳地区铁路职工冠心病危险因素。强度呈上升趋势的危险因素是:高血压(舒张压)、高甘油三酯血症、焦虑。 相似文献