实时荧光RT-PCR及RT-PCR快速检测肠道病毒71型和柯萨奇A16病毒

肠道病毒71型(Enterovirus 71,简称EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,简称CA16)是引起手足口病的两种主要的病原体,常相伴造成手足口病的暴发流行,每次流行中两种病毒中所占的比例有所不同[1].EV71感染引起HFMD常有严重的神经系统并发症发生,CA16感染引起自限性的手足口病,极少发生严重并发症和死亡[2～6].2008年安徽、广东(包括深圳市)、浙江等28个省市出现手足口病暴发流行,因此,亟须一种特异性强,灵敏度高的方法对这两种病毒进行快速区分检测.     

2015-2016年深圳市登革Ⅲ、Ⅳ型分离病毒株E/NS1基因序列特征

目的 了解2015-2016年深圳市分离的登革Ⅲ、Ⅳ型病毒E/NS1基因序列特征及登革Ⅲ、Ⅳ型病毒流行规律,探究其可能的传播来源。方法 收集2015-2016年深圳市登革热患者病例资料及急性期血清,用C6/36细胞培养分离登革病毒,用FQ-PCR对其进行血清分型,分离成功的病毒株用反转录-聚合酶链反应(PCR)方法扩增E基因和NS1基因,进行序列分析,绘制系统进化树,氨基酸比对分析4个不同血清型NS1蛋白。结果 从5份Ⅲ型的登革病毒标本中成功分离4份病毒株,3份Ⅳ型登革病毒标本中成功分离2份登革病毒;BLAST分析保守E基因结果表明,与DENV-3分离株同源性最高(99%)的毒株主要是印度尼西亚2010和2015年分离株、菲律宾2015年分离株。与DENV-4分离株同源性最高(99%)的毒株主要是菲律宾2013年分离株、印度尼西亚2010分离株、意大利2009年分离株。NS1基因序列分析显示所选4株不同血清型的病毒株氨基酸相似性为77.69%,4个不同血清型的登革热NS1抗原存在5-7个氨基酸保守区域。结论 2015-2016年深圳市输入的登革Ⅲ、Ⅳ型病毒可能来自印度尼西亚和菲律宾,应加强出入境人员的监测工作,避免输入引起本地感染的风险。     

急性等容血液稀释联合控制性降压在颅脑肿瘤摘除术中的应用

目的 :评价急性等容血液稀释 (ANH)与控制性降压联合应用于颅脑肿瘤摘除术中的安全性 ,并探讨对减少输注异体血量的影响。方法 :择期颅脑肿瘤摘除术病人 36例 ,随机分成三组 ,即对照组 (组Ⅰ ,n =12 ) ,ANH组 (组Ⅱ ,n =12 ) ,ANH组加控制性降压组 (组Ⅲ ,n =12 )。三组皆采用静吸复合全麻。组Ⅱ ,组Ⅲ麻醉诱导后 ,手术前进行ANH ,组Ⅲ于颅脑肿瘤切除时进行控制性降压 ,观察三组病人术中所输异体血量、血流动力学、术后Hb及HCT的变化。结果 :组Ⅰ术中每例均输异体血 ,平均 (6 6 6 .7± 2 4 6 .2 )ml;组Ⅱ有 7例未输异体血 ,余 5例平均输异体血 4 0 0ml;组Ⅲ则全部避免输异体血 ,三组间输异体血量有显著性差异 (P <0 .0 1)。三组病人术中血流动力学基本平稳。结论 :急性等容血液稀释联合控制性降压可安全应用于颅脑肿瘤摘除术中 ,并可减少或避免输注异体血。     

2008年深圳市感染性病毒性腹泻中诺如病毒的感染分析

目的了解广东省深圳市感染性病毒性腹泻中诺如病毒的感染情况。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timeRT-PCR）对2008年深圳市606例疑似腹泻患者粪便标本进行诺如病毒的检测。结果诺如病毒感染率为24.26%（147/606）,其中男性感染率为22.49%（74/329）,女性为26.36%（73/277）。0～2岁年龄组诺如病毒感染率为11.54%（9/78）,3～4岁为0%（0/5）,5～14岁为31.25%（5/16）,15～19岁为22.86%（8/35）,≥20岁为26.48%（125/472）。结论诺如病毒感染全年均可发生,冬季感染率较高。各年龄组男女性人群都可感染,但在本次监测中3～4岁年龄组无感染。应加强对诺如病毒引起感染的监测。     

结直肠癌造口患者对出院准备需求的质性研究

目的 深入了解结直肠癌造口患者对出院准备的需求,为帮助患者提高出院后生活质量、早日恢复生活、回归社会,构建可行性强的干预方案提供依据。方法 采用目的抽样和滚雪球抽样相结合的方法,于2022年12月—2023年1月运用质性研究的现象学方法对湖南省某三级甲等医院14例结直肠癌行造口术后的患者进行半结构式访谈,运用Colaizzi七步法分析资料,并提炼主题。结果 结直肠癌造口患者对出院准备的需求可归纳为对造口护理技能的需求（造口自我护理技巧、造口相关产品指导、造口护理问题解答）、对造口相关知识教育的需求（术前提前干预指导、术后常见问题指导、居家护理症状识别与管理）、恢复正常生活的需求（个人生活、社会生活）、对出院后卫生保健专业支持的需求4个主题。结论 结直肠癌造口患者对出院准备的需求较高,医护人员应加强对患者身心恢复程度、自理能力以及个体需求的评估,制定科学可行的出院准备度干预方案,帮助患者顺利由医院过渡到家庭,早日回归社会。     

深圳市一起输入性登革热疫情的分子流行病学研究

摘 要：目的 对2007年深圳市报告的一起输入性疑似登革热病例查明病因。分离鉴定病原体,从分子水平分析分离株的生物学特征。方法 对疑似患者血清标本采用ELISA、胶体金免疫层析法和实时荧光定量PCR方法分别检测登革病毒IgM、IgG抗体和病毒核酸,并用C6/36细胞分离登革病毒。采用RT-PCR方法扩增病毒PrM/M-E基因后进行序列测定,并与不同国家和地区的登革毒株进行同源性比较和进化树分析。结果 从患者血清标本中检测到登革病毒IgM、IgG抗体和登革3型病毒核酸,并首次成功分离到登革3病毒,将其命名为DEN3-SZ0739。深圳市登革3型病毒分离株SZ0739与登革3型国际标准株H87株、国内外流行株80-2、GWL-25株在PrM/M-E基因上核苷酸同源性分别为94.1%、93.9%、96.9%,而与登革1、2、4型国际标准株HAWAII、NGC、H241同源性分别为66.1%、59.1%、58.2%。进化树显示SZ0739株与2007年新加坡分离株SGEHI(D3)0235Y07亲缘关系最近,在进化树的同一分支上,和1416株(India 1984)、1326株(Sri Lanka 1981)、1696株(Samoa 1986)等同属基因Ⅲ亚型。结论 从病原学、血清学和分子生物学特征上均证实该输入病例是由登革3型病毒引起,该毒株最有可能来源于新加坡。     

深圳市2005年鼠间汉坦病毒感染的鼠情监测及病毒株SZ2083的分离鉴定

目的 了解深圳市啮齿动物自然感染汉坦病毒（HV）状况和病毒型别，为制订防制措施提供科学依据。方法 收集宿主动物资料，采用酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光试验分别检测鼠血清特异性总抗体和IgG抗体，直接免疫荧光检测鼠肺汉坦病毒抗原。将阳性鼠肺标本接种长爪沙鼠分离HV，阳性鼠肺标本提取病毒RNA，应用型特异性引物进行逆转录-巢式PCR扩增及核苷酸序列测定从而进行分型鉴定。结果 共捕获鼠形动物472只，其中以褐家鼠为优势鼠种，带病毒率为9．96％。鼠血标本总抗体阳性76例，IgG阳性56例。成功分离到1株HV，命名为SZ2083。经逆转录一巢式PCR扩增并进行序列测定显示为汉城（SEO）型。序列比较分析发现SZ2083核苷酸序列与L99同源性为97％，而与HTN76—118株的同源性仅为76％。结论 深圳市存在着以家鼠型为主的肾综合征出血热自然疫源地。     

基孔肯雅病毒深圳分离株的全序列分析

目的了解基孔肯雅病毒SZ_20101028株的全基因组分子遗传特征。方法通过C6／36细胞从患者血清中分离得到CHIKV,针对病毒的基因组设计了6条特异性引物,对病毒的全基因组进行扩增,测序并通过生物信息学软件分析该病毒株的全基因组分子遗传特征。结果病毒SZ_20101028株的全基因组核苷酸序列长度为12377nt,含两个开放阅读框。编码3722个氨基酸,两个编码区之间含有68nt非编码连接区;发现该毒株与2010年引起东莞基孔肯雅热疫情暴发的病原体核苷酸的同源性达到了99％,进化树分析结果表明,SZ_20101028株与2010年引起东莞疫情暴发的病原体的亲缘性最高,并且和2004年引起印度洋地区疫情暴发流行的病原体同属于印度洋亚型。结论深圳市首例输人性基孔肯雅病毒属于印度洋亚型,与2010年引起东莞疫情暴发的病原体的亲缘性最高。     

丙泊酚镇静对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征患者血液动力学及氧合的影响

目的观察丙泊酚镇静对急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者行机械通气时血液动力学和肺氧合功能的影响。方法18例实施机械通气的ALI/ARDS患者随机分为丙泊酚组(P组,镇静诱导和维持用丙泊酚)和咪唑安定组(M组,镇静诱导和维持用咪唑安定)。根据Ramsay分级标准调整两组用药量。记录两组患者镇静诱导前即刻(T0)、镇静诱导后1h(T1)、5h(T2)、9h(T3)和12h(T4)血液动力学变化,同时采集上述各时点中心静脉血、股动脉血测定血气,计算肺内动静脉分流率(Qs/Qt)和氧合指数(OI)。结果(1)与T0时比较,T1～T4时两组患者MAP、HR下降(P<0.05);(2)与M组比较,T2～T4时P组Qs/Qt下降、OI升高(P<0.05)。结论丙泊酚镇静有利于改善机械通气时ALI/ARDS患者氧合,可为其病因治疗和肺损伤的修复赢得时间。     

基于网络药理学的大建中汤治疗胃癌的作用机制分析

目的 运用网络药理学的方法探讨大建中汤治疗胃癌的作用机制,为后期实验研究提供理论依据.方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)对大建中汤的活性成分和靶点进行筛选;利用GeneCards、OMIM、PharmGKB和Therapeutic Target Database数据库获取胃癌靶点.利用R语言将药物与疾病靶点...