兰州地区几种不同MTHFR基因及其多态性与早产及叶酸代谢水平关系的研究

目的:探讨兰州地区几种不同MTHFR基因及其多态性与早产及叶酸代谢水平的关系。方法:选取298例新生儿及其母亲作为研究对象,根据是否早产分为早产组以及正常组,采用PCR分析3种不同基因多态性与叶酸代谢的关系。结果:MTHFR(A1298C)基因,早产组AC型、AA型以及C、A等位基因频率与正常组比较有差异;MTHFR(G1793A)基因,早产组GG型、AA型以及G、A等位基因频率与正常组比较有差异;MTHFR(C2572A)基因,AA+CA型及C、A等位基因频率与正常组比较有差异(均P0.05)。产妇外周血叶酸和维生素B12水平,AC、CC基因型组较AA基因型组平均水平低(P0.05)。MTHFR(G1793A)基因中,GA型、AA型叶酸、维生素B12均低于GG型(P0.05);AA型叶酸、维生素B12均低于GA型(P0.05),而同型半胱氨酸(Hcy)高于GA、GG型(P0.05)。MTHFR(C2572A)基因AA+CA型者叶酸、维生素B12均低于CC型(P0.05),而Hcy高于CC型(P0.05)。MTHFR(A1298C)基因AC+CC型(OR=1.544,95%CI 1.105~3.694,P=0.041);MTHFR(G1793A)基因GA+AA型(OR=1.938,95%CI 1.326~5.113,P=0.028),MTHFR(G1793A)基因A等位基因频率(OR=1.769,95%CI 1.128~4.031,P=0.039);MTHFR(C2572A)基因AA+CA型(OR=1.650,95%CI 1.017~4.150,P=0.042)为早产的影响因素。结论:MTHFR(A1298C)、MTHFR(G1793A)及MTHFR(C2572A)基因多态性与甘肃地区早产发生率、低叶酸水平有关。     

应用无创性产前诊断技术诊断染色体数目异常及临床分析

目的通过分析12例应用无创性产前诊断技术诊断染色体数目异常病例,探讨该技术进行产前诊断的应用前景。方法12例患者于孕16W左右抽孕妇静脉血,分别分离血清和血浆。血清在本实验室进行三联血清学产前筛查。4m1血浆送深圳华大基因有限公司,应用二代测序技术进行测序分析;于孕18w左右均抽取羊水20ml进行羊水细胞培养和染色体核型分析。结果上述标本孕中期三联血清学筛查提示18-三体高风险2例、21-三体高风险10例,其中年龄高风险6例;应用无创性产前诊断技术诊断21-三体10例,18-三体2例;染色体核型分析21-三体10例,18-三体2例。结论无创性产前诊断技术具有无创、准确、快速的诊断优势,该技术具有良好的临床应用前景。     

宁夏地区苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变分析北大核心CSCD

目的：分析宁夏地区苯丙酮尿症（PKU）患者苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变分布特征,了解其热点突变位点及区域。方法采用直接测序的方法,首先对30例宁夏地区 PKU 患者 PAH 基因6个热点突变外显子3,5,6,7,11,12进行测序,对未检出突变的患者再进行外显子1,2,4,8,9,10,13测序。采用多重连接探针扩增（MLPA）方法对于通过测序方法未能明确突变基因型的患者进行外显子大片段缺失突变检测。结果通过对30例患者进行全部外显子序列突变分析,在60个等位基因中明确了58个突变等位,检出率为96.7％。其中在外显子3、5、6、7、11、12检出了49个突变,检出率为81.6％。这58个突变等位分属于23个突变位点,包括错义突变9种、剪接突变9种、无义突变2种、微小缺失突变2种、大片段缺失突变1种。其中 R243Q 突变频率最高（18.3％）,其次是 IVS4-1G ﹥ A（11.7％）和 R111X（11.7％）。在外显子11的测序中发现了一个新的缺失突变 N393del。采用 MLPA 技术在3例患者中检测到了大片段缺失突变 c.-1932＋3402del,其中1例为纯合缺失,2例为杂合缺失突变。结论宁夏地区 PKU 患者 PAH 基因突变具有明显的热点突变和突变热点区域。宁夏地区 PKU 患者存在 PAH 基因大片段缺失突变,MLPA 技术是检测 PAH 基因大片段缺失的有效手段。     

甘肃地区13920例新生儿高苯丙氨酸血症筛查和诊断分析

目的 通过对新生儿筛查和检测,了解甘肃地区高苯丙氨酸的发病情况和类型.方法 采集13 920例新生儿足跟末梢血,用荧光定量法检测干滤纸血片中的Phe浓度,并用尿蝶呤谱分析、四氢生物蝶呤负荷试验和PAH基因测序确诊和鉴别诊断可疑患者.结果 在13 920例新生儿中检出高苯丙氨酸血症6例,均诊断为苯丙酮尿症(PKU),未确诊四氢生物蝶呤(BH4)缺乏症,仅1例诊断为BH4反应性PKU.6例PKU患儿PAH基因部分外显子测序,检出6种基因突变.其中R243Q突变所占比例最高,其次是V399V、EX6-96A.结论 甘肃地区高苯氨酸血症发病率1/2 320,明显高于其他地区,早期诊断和鉴别诊断可以指导患儿的治疗.     

FSHR剪切变异c.299+2T>G致卵巢抵抗综合征的家系分析

目的 探讨卵巢抵抗综合征(ROS)不孕患者的遗传学病因,为临床遗传咨询及助孕方案提供诊疗依据。方法 收集先证者家系临床资料及遗传学检测指标,绘制家系图谱,进行染色体G显带核型分析,应用高通量基因测序技术(NGS)进行全外显子组测序;对先证者父母与兄长的变异位点进行Sanger测序验证,并进行生物信息学分析及诊断。结果 该女性先证者临床诊断为原发性闭经、ROS;先证者母亲的祖母与父亲的祖父为亲兄妹。全外显子组测序及Sanger测序检测到先证者存在卵泡刺激素受体(FSHR)基因经典剪切变异NM＿000145.4 c.299+2T>G(纯合型),且该变异为未报道的致病性变异;其兄长该位点突变与先证者一致,其父母均存在FSHR剪切变异c.299+2T>G(杂合型)。结论 FSHR新发现的剪切变异c.299+2T>G的检出,丰富了FSHR基因突变谱,为ROS的临床治疗和家系成员的遗传咨询提供了参考。     

雄激素受体基因CAG、GGN重复片段多态性与身体质量指数/腰臀比的关联性

目的探讨雄激素受体基因CAG、GGN重复片段多态性与身体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)之间的关联性。方法研究对象来自宁夏医科大学2011级健康学生共654例,男性280例,女性374例,平均年龄(20.35±1.24)岁。用ABI 3730XL测序仪测定AR基因的(CAG)n及(GGN)n重复数目,直接测量法测得身高、体重、腰围与臀围。结果 BMI与WHR的分布存在性别差异。较长GGN等位基因与女性BMI呈正相关(P0.05),AR基因的(CAG)n与女性BMI无相关性(P0.05);男性AR基因的(CAG)n及(GGN)n与BMI及WHR无相关性(P0.05)。结论 BMI与WHR在不同性别间的分布存在差异性;较长GGN等位基因与女性BMI存在关联性。     

染色体平衡易位致姐妹同患流产

病例1:患者,女,34岁,结婚8年,流产4次,多在孕2-3月之间。否认与毒物接触史及不良生活史。妇科检查未见异常,细胞遗传学检查:患者核型46,XX,t(8;20)(p11;q11),(8pter→8p11∷20q11→20qter)(8qter→8p11∷20q11→20pter)图染色体平衡易位t(8;20)病例2:病例1的妹妹,26岁,婚后流产1次,孕47d左右。行外周血淋巴细胞培养及染色体核型分析,与其姐姐核型完全相同,考虑姐妹两人均为同样的染色体平衡易位,追溯其母生育期病史,其母现年龄61岁,在生育年龄有过4-5次流产史,孕周不详,其母拒做染色体检查,考虑到母女均有流产史等情况,认为姐妹同患平衡易位,可能为母亲遗传而来。讨论:染色体异常是导致流产,死胎,畸胎的重要原因之一,此2例属非同源染色体易位。因本人为平衡易位携带着,由于没有遗传物质的丢失,一般不会引起遗传效应,表现正常。但是生殖细胞在减数分裂的过程中,可产生18种类型的配子,与正常配子结合仅有一种正常合子,一种为平衡易位携带者,其余均会因染色体片段缺失、断裂而发生流产和死胎。双亲之一为平衡易位者,造成反复流产,死胎和不明原因的新生儿死亡的风险...     

串联质谱技术在甘肃地区遗传代谢病筛查中的应用

目的通过串联质谱技术的应用及后续诊断,了解甘肃地区新生儿遗传代谢病的发病情况。方法对2015-2016年甘肃省下属各地州市送检的77 957例新生儿样本和临床送检的4 365例高危患儿样本进行串联质谱筛查,并对阳性样本召回进行后续诊断。结果新生儿筛查样本检出可疑阳性2 495例(3.2%),确诊4种遗传代谢病,共29例,其中苯丙酮尿症(PKU)24例、原发性肉碱缺乏症(PCD)1例、甲基丙二酸血症(MMA)3例、异戊酸血症(IVA)1例。临床高危样本检测可疑阳性427例,确诊8种遗传代谢病,共74例,其中PKU 57例、鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症(OTCD)1例、枫糖尿症(MSUD)1例、MMA 8例、IVA 1例、β-酮硫解酶缺乏症(BKD)2例、PCD 2例、中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(MCAD)2例。结论串联质谱技术是遗传代谢病筛查的高效检验方法,甘肃地区是我国遗传代谢病高发地区。     

孕中期羊水游离RNA中泌尿系统发育关键基因的筛选与生物学功能分析

目的 筛选并分析孕中期羊水游离RNA(AfcfRNA)中的泌尿系统发育关键基因.方法 从GEO数据库获取胎儿AfcfRNA的芯片检测数据.对56例AfcfRNA的芯片检测结果进行基因共表达网络(WGCNA)分析,建立共表达网络模块.从Human Protein Atlas数据库中筛选在泌尿组织中表达量高于平均表达量10...     

ATRX新致病性变异致X连锁智力低下家系分析

目的：分析一个α地中海贫血X连锁智力障碍(ATR-X)综合征家系的致病基因突变。方法：对该ATR-X综合征家系先证者进行全外显子组测序,通过生物信息学分析筛选候选的致病基因突变位点,利用聚合酶链反应(PCR)和Sanger测序验证该家族成员的致病突变位点。结果：全外显子组测序发现先证者的X染色体ATRX基因存在半合子变异(c.161₁62del, p.Ser54Ter),家系成员Sanger测序结果表明该变异在家系中符合遗传共分离规律。结论：ATRX基因c.161₁62del变异为引起该家系ATR-X综合征的遗传学因素。