冻干甲型肝炎减毒活疫苗H2株的安全性和免疫原性研究

为观察H2株冻干甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗接种人体后的安全性和免疫原性，选择广西壮族自治区蒙山县一小学学生(年龄7～12岁)164人和浙江省台州市椒江区一幼儿园儿童(年龄3-6岁)114人为接种对象，免疫前筛选抗甲肝病毒IgG抗体(抗-HAV-IgG)阴性，血清丙氨酸氨基转移酶(SGPT)正常，无肝炎病史、症状和体征者，分别接种2个批号的H2株冻干甲肝活疫苗。观察接种疫苗后30min，8、24、48、72h的局部及全身反应，以后隔天记录体温及其它有关临床反应。接种疫苗后1、2个月采静脉血测定SGPT及抗-HAV-IgG，同时长期随访检测免疫后13、24个月血清抗-HAV-IgG水平。检测用酶免疫测定（EIA)竞争抑制法，用世界卫生组织(WHO)提供的标准品(含100mlU／ml)进行标定。结果显示：在整个观察期间，所有观察者未见中、强反应及其它临床反应发生，SGPT检测结果无异常升高。H2株冻干甲肝活疫苗具有良好的安全性。接种疫苗后2个月抗体阳性率为99．1％-100．0％，13～24个月阳性率仍高达97．8％-98．9％；免疫后2个月抗体几何平均滴度(GMT)达1607mlU/ml，在免疫后24个月抗体GMT仍维持在448．3mlU／ml。表明H2株冻干甲肝活疫苗安全性良好，接种后有较高的抗体阳转率和GMT。     

甲肝减毒活疫苗在人体与猴体接种的安全性和免疫原性观察

于1993～1997年间采用本院批量生产的22批甲肝减毒活疫苗对234名ALT值正常、抗HAV阴性的7～8岁儿童进行了人体接种．对其中9批进行了45只猕猴的接种。经观察，全部疫苗对人体均未产生局部和全身不良反应．抗体阳转率为88％～100％，平均96％；猴血清ALT测定，肝脏穿刺病理学检查均未见异常，抗体阳转率亦达96％．这一结果表明疫苗质量稳定、安全且免疫效果良好。     

应用单克隆抗体进行甲肝减毒活疫苗毒种的外源因子检测及鉴别试验

目的利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行甲型肝炎减毒活疫苗毒种外源因子检查及鉴别试验。方法通过观察含单克隆抗体不同稀释度的腹水对KMB17细胞的影响，选择适宜的单克隆抗体浓度．将单克隆抗体与甲肝病毒进行中和试验，观察单克隆抗体的中和作用；利用单克隆抗体中和毒种，进行外源因子检查。并应用于鉴别试验。结果(1)当单克隆抗体稀释度≥1：80时，细胞生长良好；(2)此单克隆抗体中中和10^5CCID50/ml甲肝病毒．比人、猴免疫血清的中和能力高约100倍；(3)将此高效价的单克隆抗体中和毒种后进行血吸附及非血吸附外源因子检查．结果均为阴性；此单克隆抗体还可用于毒种鉴别试验。结论此高效价的单克隆抗体可代替人、猴免疫血清应用于毒种的外源因子检查及鉴别试验。避免了由于毒种的大量稀释而使外源因子难以检出，影响疫苗质量。     

H2株冻干甲肝减毒活疫苗接种后血中T淋巴细胞亚群的变化

〔目的〕对接种H2 株冻干甲肝减毒活疫苗后机体血中T淋巴细胞亚群的变化进行动态观察。〔方法〕按一针接种程序 ,给每人接种 1瓶冻干甲肝减毒活疫苗 (H2 株 ) ,接种前及接种后 1、2、3、4、6、8周、3个月采取静脉血 ,用流式细胞仪检测全血T淋巴细胞亚群CD3 + 、CD4+ 、CD8+ 细胞的含量 ,并比较CD4+ /CD8+ 比值的变化。〔结果〕CD3 + 细胞在接种后 1-3周、CD4+ 细胞在接种后 1-2周呈现明显升高 ,分别与接种前作自身对照比较的t检验 ,差别有显著性意义(P <0 .0 5 )。〔结论〕H2 株冻干甲肝减毒活疫苗有良好的T细胞刺激能力。     

含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸佐剂对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

为提高乙型肝炎疫苗的免疫原性和机体对疫苗的免疫反应性,开发新型疫苗佐剂已成为国内外学者研究的热点。大量的研究表明,CpC基序的寡聚脱氧核苷酸佐剂(CpC ODN)是很有前途的细胞免疫和体液免疫增强剂,与铝佐剂有协同作用,并可克服铝佐剂对细胞免疫的抑制;CpC ODN作为佐剂稳定性较好,对人体安全,尤其是与Al(OH)_3联合作为HBsAg疫苗佐剂时,双剂接种就可以获得很理想的免疫效果,并且价廉,有利于提高发展中国家的乙型肝炎疫苗接种率。本文着重对含有一个或数个非甲基化CpC ODN的研究进展作了综述。     

RT-PCR方法在诊断儿童ARI上优于传统病毒培养方法

病毒引起的急性呼吸道感染(ARI)作为儿科常见病多发病,其病原分离检定多采用组织培养法。纽约Rochester大学医学院Geoffrey A等经过实验研究和比较发现,用逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)可以使病毒检出率增加1倍。他们对2000年8月-2001年9月之间收集的来自Rochester地区6个县的668份标本进行了常规细胞培养法和RT-PCR法的     

冻干甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)诱导的人体特异性细胞免疫应答

目的 了解接种冻干甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗[Hepatitis A(Live) Vaccine,Freeze-dried;HepA]后,机体能否产生特异性细胞免疫应答.方法 研究对象经HepA(H2株)1剂次免疫,流式法检测淋巴细胞亚群CD2 、CD4 、CD8 的百分率及表达干扰素(IFN)-γ及白细胞介素(IL)-4的阳性细胞百分率;T淋巴细胞的特异性增殖试验(MTT法)检测T淋巴细胞增殖反应;酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测淋巴细胞的IFN-γ分泌能力.结果 接种后2周,CD4 上升,以4周上升为显著,与接种前相比,差异有显著的统计学意义(t=2.571,P<0.05);接种后4周～3个月,淋巴细胞对特异性刺激物甲肝病毒的反应都有明显增强,与接种前相比,差异均有非常显著的统计学意义(t=3.215～3.959,P均<0.01);接种后2周,表达IL-4和IFN-γ的阳性细胞百分率上升,以IL-4为明显,与接种前相比,差异有显著的统计学意义(t=2.197,P<0.05);接种后3年,用ELISPOT法检测IFN-γ,阳性率为57.1%(8/14).结论 接种HepA(H2株)后,机体能有效地产生特异性细胞免疫应答.     

RT-RCR产物固相杂交-酶联显色方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取光密度值(OD值)，判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果证明本方法与细胞培养法(CCID50)的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论RT-PCR-EIJSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。     

有关肾移植患者术后尿路感染的调查

近二十多年来,肾脏移植在临床上有了很大进展,但由于在治疗过程中,长期大剂量地使用免疫抑制剂、激素及多种抗生素等,导致人体免疫功能的低下,从而使患者的抗感染能力减弱,成为术后死亡的重要原因之一。本文调查了友谊医院1985～     

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)不同加强程序的免疫效果

为了观察甲型肝炎(甲肝)减毒活疫苗(H2株,106.5TCID50/ml)不同加强程序的免疫效果,并探讨甲肝减毒活疫苗的优化免疫方案,于1993年在浙江省台州市椒江区选择264名经事先检测(ELISA法)抗-HAV-IgG抗体阴性的儿童,按4种不同加强程序,即在接种1针后的6个月、12个月、3年、6年接种第2针.每次接种后1个月采集血清标本,观察免疫后抗体阳转率及几何平均滴度(GMT).结果接种甲肝减毒活疫苗第 1针后1个月抗-HAV-IgG抗体阳转率为92.2%～100.0%,GMT为1∶3.17～1∶5.15(ELISA法);按4种不同加强程序接种第2针后,抗-HAV-IgG抗体阳转率都达100.0%,GMT都增长＞4倍;其中0、6个月与0、12个月加强程序GMT最高,达1∶34.43～1∶35.12(ELISA法)或3 069mIU/ml～3 133mIU/ml(Abbott EIA法).甲肝减毒活疫苗加强接种后抗体GMT有大幅度提高,其中0、6个月或0、12个月程序值得推荐.