犬山宣言——关于人基因组定位、基因筛查和治疗

近年来分子生物学进展很快,正迅速广泛地应用于临床遗传学。人类基因组制图也正在进行,已有1400多个基因定位于染色体上,据推测到了二十一世纪末,构成人类基因组(注1)的10万个基因都可定位完毕。再者,4300多种单基因病已经清楚,其中约10%是由于基因产物——蛋白质异常所致。例如囊性纤维化、血红蛋白异常、部分溶血性贫血、苯丙酮尿症、血友病、Hantintong 舞蹈病、Duchenne 型进行性肌萎缩、家族性淀粉样变多神经病等。据此,已可部分进行产前诊断。目前人们已经注意到许多疾病与多个基因异常和环境危险因子相关。例如,心血管病、癌、糖尿病、Alzheimer 等精神疾病、消化性溃疡、慢性类风湿性关节炎等。不久的将来,这些疾病的遗传原因将会搞清楚。     

东北地区正常人Huntington基因内CAG拷贝数的变异范围及其应用研究

东北地区正常人Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ基因内ＣＡＧ拷贝数的变异范围及其应用研究宋军金春莲孙开来Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ舞蹈症（ＨＤ）是一种以舞蹈样运动为特征的常染色体显性遗传的神经系统疾病，该病基因，即Ｈｕｎｔｉｎｇｔｉｎ基因，含有一个（ＣＡＧ）ｎ三核苷酸重...     

人类内源性长末端重复序列的研究

以长末端重复序列为探针研究人类基因组表明,内源性长末端重复序列随机地分布于人染色体基因组内,在整个基因组中可能有10~3拷贝。分析肿瘤细胞DNA的长末端重复序列,提示内源性长末端重复序列和细胞恶变之间可能没有直接相关性。     

人肝癌细胞中hst-1、int-2和c-sea等癌基因结构的初步分析

应用基因特异性探针,通过Southern印迹杂交技术,分析五种有代表性的人肝癌细胞系基因组DNA中癌基因hst-1、int-2和c-sea等的结构。在所分析的肝癌细胞系基因组DNA中,未发现上述癌基因发生结构重排和扩增现象。这一结果对进一步研究人肝癌细胞中染色体畸变的分子基础有一定的参考价值。     

甲型血友病快速基因诊断方案研究

应用southern印迹杂交技术和PCR技术，进行人FW基因内含子18／BclI、内含子22／Xbal和St14，TaqI RFLPa连锁分析，FW基困内含子13(CA)。多态分析St14(D)（DXS52)VNTR多态连锁分析，选择最佳联合提出甲型血友病快速基因诊断的较佳方案。     

医学遗传学教学中合理运用PBL教学模式的探索

PBL(problem-based learning,以问题为基础的学习)以学生为教学环节的中心位置,注重发挥学生的主观能动性,引导学生主动发现问题、解决问题,并在解决问题的过程中培养医学专业素质,加强学生将理论与实践有机结合的综合能力,同时也促进指导教师业务水平的提高,有效做到了教学相长,并得到了国内外众多学者的一致认同。PBL教学模式针对实际情况,有选择、有适用范围地引入医学遗传学教学体系中,本文主要对其教学效果进行了总结。     

人横纹肌肉瘤细胞中Utrophin表达机制的研究

目的探讨人类横纹肌肉瘤细胞中Utrophin蛋白表达上调的可能因素。方法查阅文献,检索人类Utrophin基因启动子区域可能的调控元件,应用染色质免疫沉淀(CHIP)和凝胶阻滞实验(EMSA)加以验证。并利用RNA干扰和荧光定量聚合酶链反应(PCR)的方法分析人类EN1转录因子调节Utrophin表达的作用机制。结果经查阅文献获知,Utrophin基因启动子区域有2个转录因子EN1的可能结合位点,经CHIP和EMSA实验证实位点2是真正结合位点。通过RNA干扰实验,发现在人横纹肌肉瘤细胞中EN1基因沉默后,可使Utrophin mRNA水平上调。结论如果能进一步验证其蛋白表达水平亦升高,将可能为假肥大性肌营养不良基因治疗提供新的靶点。     

MLPA和多重PCR法检测假肥大性肌营养不良患者DMD基因

目的 应用多重连接依赖式探针扩增 (MLPA)和多重PCR法对临床诊断为假肥大性肌营养不良患者进行基因诊断,并比较两种方法检测DMD基因缺失和重复改变的效果。方法 选择2005年至2007年在中国医科大学盛京医院儿科就诊的51例DMD患者和8例BMD患者。采用MLPA法对经多重PCR法检测过的患者的DMD基因的缺失/重复突变进行突变筛查,同时对先证者的母亲进行基因的缺失/重复突变检测。结果 用多重PCR方法在59例假肥大性肌营养不良症患者中检测到31例患者有外显子缺失。MLPA检测出33例外显子缺失,6例外显子重复和1例点突变,同时检测出26例患儿的母亲为携带者。MLPA比多重PCR多检测出10例DMD基因突变,两种方法共同检测出的30例突变中MLPA 检测出16例基因突变范围比多重PCR大。结论 与多重PCR法相比,MLPA更加简便、快捷、可靠,同时可以对携带者进行诊断,是一种高效的遗传病基因诊断手段。 【关键词】假肥大性肌营养不良症;多重连接依赖式探针扩增;多重PCR;缺失/重复突变     

脊髓小脑性共济失调一家系的基因诊断和产前诊断

目的 确定一脊髓小脑性共济失调(spinocerehellar ataxia,SCA)家系具体分型,并开展症状前患者检测和产前诊断.方法 收集该脊髓小脑性共济失调家系中的2例患者的血液标本,结合该家系的临床表现和我国该类疾病的发病率,采用聚合酶链反应对SCA1、SCA2和SCA3/MJD 3个基因的三核苷酸重复片段进行扩增,并通过琼脂糖凝胶电泳和PCR产物测序的方法确定所有正常和异常扩增等位基因内三核苷酸重复次数.明确致病基因后,对患者子女进行症状前检测,并对1例怀孕症状前患者进行了产前诊断.结果 SCA1和SCA2基因内三核苷酸重复次数在正常范围内,SCA3/MJD的2个等位基因中1个等位基因三核苷酸重复次数在正常范围内,另1个等位基因三核苷酸重复次数在异常范围内.患者子女有1人携带异常等位基因,胎儿携带异常等位基因.结论 该家系经基因诊断确诊为SCA3/MJD型,有1人为症状前患者,该症状前患者所孕胎儿也为症状前患者.