肝母细胞瘤患儿及其母亲孕期特点回顾性分析

目的 探讨肝母细胞瘤发生的危险因素,包括婴儿出生以及孕产妇分娩相关的特征.方法 采用病例-对照研究设计,收集肝母细胞瘤患儿及其母亲的病历资料,用Logistic回归模型对婴儿特征指标、母亲怀孕与分娩有关指标进行多因素统计检验. 结果发生肝母细胞瘤风险中低出生体质量儿的比值比为26.0(95%可信区间为14.0～65.7).母亲≤20岁和≥30岁的比值比分别为1.5(95%可信区间为0.6～4.6)和2.6(95%可信区间为1.0～6.7).超重和肥胖母亲的比值比为3.2(95%可信区间为1.0～6.7).孕妇吸烟的比值比为2.9(95%可信区间为1.1～4.2),对>2岁及H{生体质量正常儿童影响较大. 结论肝母细胞瘤的发生与患儿出生体质量及孕妇超重、吸烟等因素有关,应重视围产期卫生保健.     

肺耐药相关蛋白与肿瘤的多药耐药性

肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是造成化疗失败的主要原因.耐药性产生原因是多方面的,其中以肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)最为常见.     

Ad-EGFP-MDR1转染对小鼠骨髓细胞的影响

目的：通过研究Ad-EGFP-MDR1转染的骨髓细胞的细胞周期,凋亡相关蛋白表达和增殖分化有无改变,探讨基因修饰的骨髓细胞用于治疗的可行性。方法：用重组腺病毒Ad-EGFP-MDR1感染小鼠骨髓细胞,采用体外集落培养观察转染骨髓细胞与未转染细胞的增殖能力。采用免疫印迹检测两组细胞有无凋亡相关蛋白Bax、Caspase-9、p53的表达差异。使用流式细胞仪检测两组细胞的细胞周期有无差异。通过锥虫蓝拒染率判断细胞存活情况。结果：与对照组骨髓细胞比较,转染Ad-EGFP-MDR1的骨髓细胞体外集落形成差异无统计学意义。在转染的骨髓细胞和对照细胞中均未检测到凋亡相关基因Bax,Caspase-9,p53的表达,转染骨髓细胞与未转染对照骨髓细胞比较细胞周期差异无统计学意义（P>0.05）。锥虫蓝染色两组细胞的拒染率差异无统计学意义（P>0.05）。结论：骨髓细胞转染重组腺病毒Ad-EGFP-MDR1后其细胞凋亡相关基因,细胞增殖分化能力及细胞活性无明显变化,有利于进一步开展基因修饰骨髓细胞体内回输和体内安全性检测。     

实验性巨结肠大鼠模型的建立及其生物学特性

目的:建立一种适合骨髓间充质干细胞移植的实验性巨结肠大鼠模型并观察其生物学特性.方法:8～9周龄SD大鼠90只,随机分为两组.氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40min,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替BAC.分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能变化,RT-PCR检测AchE、nestin、Chrm3的表达.结果:BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重.病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失.结论:采用0.1?C处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,此模型与先天性巨结肠动物模型相似,为进一步结肠内骨髓间充质干细胞移植移植分化为神经细胞的研究奠定了基础.     

胰岛素样生长因子结合蛋白5对人骨肉瘤细胞增殖与侵袭的影响

  目的  探讨胰岛素样生长因子结合蛋白5(insulin-like growth factor binding protein 5, IGFBP5)对人骨肉瘤细胞株143B增殖及侵袭力的影响。  方法  用IGFBP5过表达重组腺病毒(Ad-IGFBP5)、IGFBP5 RNA干扰重组腺病毒(Ad-siIGFBP5)和空载红色荧光蛋白重组腺病毒(Ad-RFP)感染人骨肉瘤细胞株143B。通过细胞增殖、划痕愈合、细胞迁移室(Transwell)侵袭等多种实验方法, 研究IGFBP5对人骨肉瘤细胞株生长、迁移与侵袭的影响。  结果  Ad-IGFBP5组感染后143B细胞生长速度低于Ad-RFP组(P < 0.05);Ad-IGFBP5组细胞在划痕后16h即完全愈合, 划痕愈合速度显著低于Ad-RFP组(P < 0.05);24 h后Ad-IGFBP5组侵袭至Matrigel胶上的平均细胞数量较Ad-RFP组减少(P < 0.05)。而Ad-siIGFBP5感染后, 143B细胞表现为生长率升高, 划痕愈合速度加快及侵袭力增强。  结论  IGFBP5能抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭。提示IGFBP5在抑制骨肉瘤发生及转移中可能起到重要作用。      

TNF-α增强多药耐药基因1 对骨髓保护的研究*

目的:探讨通过采用肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-alpha ,TNF-α）预处理靶细胞,增强腺病毒转染小鼠单个核细胞的效率,从而增强多药耐药基因保护骨髓的能力,实现化疗中对骨髓的保护。方法:采用AdEasy-1 腺病毒载体系统重组表达MDR1 的重组腺病毒Ad-MDR 1,通过Ad5-MDR 1 感染不同浓度TNF-α 预处理后的小鼠单个核细胞,荧光倒置显微镜结合流式细胞仪监测转染率,RT-PCR 及Western blot检测TNF-α 干预后MDR1基因在靶细胞中的表达。结果:最适浓度TNF-α 预处理后,流式细胞仪检测TNF-α 预处理组腺病毒转染率（26.26%）明显高于未处理组（11.96%）;RT-PCR 和Western blot检测TNF-α 预处理组MDR1 mRNA 和P-糖蛋白（P-gp）的表达均明显高于未处理组。结论:适合浓度的TNF-α 可以明显增强腺病毒对小鼠单个核细胞的转染率,增强多药耐药基因在靶细胞中的表达,实现化疗中对骨髓的有效保护。      

经肛门直肠结肠切除斜型吻合术治疗肠无神经节细胞症中期疗效分析

目的观察经肛门直肠结肠切除斜型吻合术治疗肠无神经节细胞症的中期疗效。方法对105例肠无神经节细胞症患儿施行经肛门直肠结肠切除斜型吻合术,术后定期对排便功能进行随访。结果 105例无1例死亡,无术中输血、术中并发症,0～3个月平均手术时间74.6 min,术中平均出血量12.5 ml;3个月至1岁平均手术时间71.6 min,术中平均出血量16 ml;1～3岁平均手术时间77.9 min,术中平均出血量20 ml;>3岁平均手术时间112.5 min,术中平均出血量40 ml。术后无感染、吻合口瘘、吻合口裂开。60例随访6～40个月,5例患儿出现轻度污便,小便均正常,均未出现腹胀、便秘、神经性膀胱、肛门狭窄;其中男性52例,均有阴茎勃起。4例术后2个月左右出现小肠结肠炎。28例行肛门直肠测压检查,4例存在RAIR反射,1例存在接近于正常的RAIR反射。结论经肛门直肠结肠切除斜型吻合术术后可获得良好的排便功能,具有创伤小、手术时间短、保留直肠感受器、恢复快、并发症少等优点,中期疗效满意。     

梅克尔憩室并发症101例临床分析

目的 总结梅克尔憩室并发症临床特点,提高对该病并发症的诊治水平.方法 回顾性分析我院近3年收治的101例梅克尔憩室并发症手术患儿诊疗经过,对其症状、检查、手术情况等进行统计学分析.结果 并发症中出血50例、肠梗阻37例、憩室炎7例、穿孔7例,比例约为7:5:1:1.本组梅克尔憩室99mTc检查敏感度92％,全部病例痊愈出院.结论 患儿中出血最常见,并发梗阻、炎症及穿孔术前不易确诊.99m Tc检查可以诊断梅克尔憩室,其准确率与和异位组织相关,受憩室炎症影响;与性别、年龄、病程、憩室距回盲部距离无相关性.     

超声微泡造影剂促腺病毒介导MDR1基因转染兔骨髓单个核细胞的作用机制及安全性研究

目的 探讨超声微泡造影剂促进以腺病毒为载体介导的多药耐药基因1(MDR1)体外转染兔骨髓单个核细胞的作用机制和安全性.方法 根据是否加入超声微泡造影剂和进行超声辐照将分选的兔骨髓单个核细胞分为常规培养组(A)、腺病毒转染组(B)、腺病毒转染+超声辐照组(C)、腺病毒微泡造影剂转染组(D)和腺病毒微泡造影剂转染+超声辐照组(E).不同实验因素处理后,采用流式细胞仪检测各组细胞外源性MDR1基因的转染率,同时观测转染后不同时间各组细胞体外扩增情况;台盼蓝拒染法计数各组细胞的存活率;分别用扫描电镜和透射电镜观察超声辐照后细胞超微结构的改变.结果 流式细胞仪检测各组细胞MDR1基因的转染率分别为0.39%土0.11%、5.03%±0.35%、4.93%±0.38%、5.25%±0.80%,19.93%±1.51%,E组明显高于其余4组(P＜0.05);试验各组细胞在转染后不同时期体外增殖情况差异无统计学意义(P＞0.05),各组细胞存活率差异亦无统计学意义(P＞0.05);一定强度的超声辐照后,骨髓单个核细胞胞膜出现一过性的小孔,细胞器发生可逆性肿胀改变.结论 超声微泡造影剂可使兔骨髓单个核细胞通透性暂时性提高,促进腺病毒载体介导的MDR1基因转染;同时不会对细胞的增殖能力、存活率及超微结构造成严重的不可逆损害,证明其是一种安全可行的基因转移新方法.     

基础医学实验室建设与实验教学改革

本文简述了基础医学实验室建设与实验教学改革的经验与思路。重新确立实验教学在医学教育中的地位 ,紧紧围绕医学人才培养的总体目标和学生创新能力的培养 ,实施实验室建设。打破传统的实验室建设与管理格局 ,组建全校共用、学院直管的机能实验室、形态实验室 ,配置先进的实验设备 ,建立稳定高素质的实验技术队伍 ,并对实验教学实行规范化管理和教学内容、教学方法、教学模式的改革