不同年龄增生性瘢痕转化生长因子β_1表达的检测及其意义

目的通过观察不同年龄增生性瘢痕与正常皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,初步探讨TGF-β1的表达与增生性瘢痕形成的年龄因素的关系。方法以增生性瘢痕为研究对象,正常皮肤组织为对照,采用SABC免疫组化方法观察1～19岁、20～50岁增生性瘢痕与各年龄组正常皮肤的细胞因子TGF-β1的表达。结果增生性瘢痕组织的TGF-β1含量显著大于正常皮肤。1～19岁增生性瘢痕组TGF-β1表达较20～50岁增生性瘢痕组的增高差异有具显著性意义(P<0.01)。胎儿组皮肤TGF-β1表达低于正常皮肤(P<0.01)。结论TGF-β1表达增高是增生性瘢痕形成的原因之一。     

超声监测大鼠肝移植模型建立的实验研究

目的探讨大鼠原位肝移植模型建立的方法及超声影像技术对肝移植的监测。方法采用改良的双套管法对大鼠实施同种原位肝移植手术；采用超声观察实验鼠肝脏的回声、结构及血流变化，了解移植肝脏存活和并发症的发生状况。结果实行大鼠肝脏移植400只，全肝移植组和60％减体积肝移植组1周存活率分别为90．7％和83．9％。超声示30％移植肝实质回声增强，肝内管道结构显示欠清晰，10d左右回声逐渐接近正常；两组术后90min均较正常对照组门静脉血流速度增加，10～14d后血流测值恢复正常；术后门静脉血栓发生率为2．6％，腹腔积液发生率为39％。结论改良双套管法能建立稳定的大鼠原位肝移植模型；超声技术能准确无创地检测移植肝结构、血流灌注及并发症，为利用该模型来研究移植肝缺血再灌注损伤机制提供了可靠的影像学监测方法。     

通过外周血动态监测肿瘤耐药的临床意义

化疗在肿瘤综合治疗中具有不可替代的重要作用。早期肿瘤手术切除后可通过化疗清除微小残留病灶,预防肿瘤复发;临床上对3～4期中晚期病例给予术前化疗即新辅助化疗,经过3～4个疗程后肿瘤体积缩小,血供减少,与正常组织间隙明显,有利于完整切除原发肿瘤,肿瘤转移病灶的处理也更为容易有效;长期化疗可抑制肿瘤生长,患者可获得无瘤生存,或更高的5年生存率。     

多药耐药基因转染骨髓单个核细胞移植联合化疗治疗乳腺癌的实验研究

目的研究外源性人多药耐药基因(human multidrug resistance gene 1,hMDR1)转染骨髓单个核细胞(mono-nuclear cells,MNCs)移植联合超剂量表阿霉素化疗在4T1乳腺癌治疗中的骨髓保护和治疗作用。方法用携带目的基因hMDR1和绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)报告基因的复制缺陷型重组腺病毒(rAd-hMDR1-GFP)转染原代培养的MNCs以获取hMDR1基因修饰的MNCs(MNCs-rAd-hMDR1-GFP),将修饰后的MNCs移植到4T1乳腺癌模型体内,在表阿霉素超剂量化疗中观察骨髓造血功能的保护和肿瘤的治疗效果。结果 hMDR1基因成功转入小鼠骨髓单个核细胞,体外转染率达26.26%;转染细胞移植后能定植于受体骨髓中并功能性表达。在超剂量化疗中,hMDR1基因能有效保护受体骨髓的造血功能,荷瘤动物能耐受3倍剂量表阿霉素化疗,外周血白细胞数能维持在(5.7±0.6)×109/L;同时超剂量化疗能迅速杀灭肿瘤细胞,使荷瘤动物存活时间明显延长(P<0.05),治愈率明显提高(P<0.05)。结论 hMDR1基因转染骨髓造血细胞移植能明显提高受体骨髓对化疗药物的耐受性,联合超剂量化疗能快速、有效的杀灭肿瘤细胞,提高恶性肿瘤的治愈率。     

肥大细胞、神经纤维在先天性肠无神经节细胞症中的相关性研究

目的探讨肥大细胞、神经纤维在先天性肠无神经节细胞症(HD)患者不同肠段中有无数量及形态变化以及在HD中的可能作用。方法选择2010年1月至2011年12月重庆医科大学附属儿童医院收治的40例HD患者肠组织标本为实验组。选择10例尸检患儿(死于非消化道疾病)直肠标本作为对照组,分别采用甲苯胺蓝化学染色法、S-100免疫组织化学染色法及复合染色法处理,显微镜观察肥大细胞及神经纤维的分布及变化情况。结果镜下肥大细胞主要集中在肠段黏膜层及黏膜下层,与神经纤维毗邻,HD患者痉挛段肥大细胞较对照组及扩张段明显增多(P<0.05),脱颗粒明显,黏膜下层S-100阳性神经纤维表达增强(P<0.05),肥大细胞密度与神经纤维的密度及面积具有相关性(r=0.573,P<0.01;r=0.514,P<0.01)。结论肥大细胞与神经纤维关系密切,两者的变化及相互作用在HD的发病机制中具有重要意义。     

钙视网膜蛋白在先天性无神经节细胞症中的表达特点及临床意义

目的探讨将钙视网膜蛋白(CR)用于诊断先天性无神经节细胞症(HD)的可行性。方法采用免疫组织化学法检测CR在50例HD(HD扩张段组、HD痉挛段组)和10例对照组结肠壁的表达,并与常规HE染色进行对比分析。用Image-Pro-Plus图文分析系统定量分析染色结果。结果 HD痉挛段组与对照组及HD扩张段组黏膜下层、肌层间CR表达的平均光密度值(MOD)差异均有统计学意义(P<0.01);HE染色扩张段肠壁神经丛中可见神经节细胞,痉挛段神经节细胞缺失,CR免疫组织化学染色与HE染色诊断结果一致;新生儿与年长儿HD痉挛段黏膜下层CR表达差异无统计学意义(P=0.816)。结论 CR免疫组织化学染色用于新生儿HD的诊断与传统方法比较具有明显优越性。     

HA117编码蛋白、P-gp和bcl-2在儿童急性白血病中的表达及意义

目的 探讨HA117编码蛋白、B细胞白血病/淋巴瘤-2（bcl-2）和P-糖蛋白（P-gp）在急性白血病（AL）患儿骨髓单个核细胞中的表达及临床意义.方法 通过免疫组织化学（SP）方法检测37例AL患儿中HA117编码蛋白、bcl-2、P-gp的表达情况,以15例非恶性血液病患儿为对照.结果 （1）AL组患儿HAll7编码蛋白、bcl-2及P-gp的阳性表达率分别为64.86％、62.16％和37.84％;AL组HA117编码蛋白表达阳性率明显高于对照组（P =0.033）;三种蛋白在急性髓细胞白血病组和急性淋巴细胞白血病组表达阳性率差异无显著性.（2）HA117编码蛋白在初诊组表达阳性率明显高于对照组（P =0.021）,而完全缓解组与对照组比较差异无显著性（P =0.098）.（3）AL患儿HAll7编码蛋白与bcl-2的表达水平呈正相关性（P=0.0001,r=0.593）.结论 新基因HA117可能参与了儿童AL的耐药机制,对儿童AL的预后有一定的预示作用,并在肿瘤的发生、发展和耐药中可能与抗凋亡基因bcl-2存在协同作用.     

多药耐药基因在睾丸恶性肿瘤血睾屏障中的作用研究

目的探讨睾丸恶性肿瘤血睾屏障产生机制,为采用分子生物学方法克服血睾屏障从而提高化疗疗效提供依据.方法采用P-糖蛋白(P-gp)单克隆抗体、免疫组化法检测睾丸恶性肿瘤组织P-gp表达部位及强度.进行统计分析,对比睾丸组织各类细胞间的P-gp表达情况.结果睾丸恶性肿瘤细胞P-gp表达率及程度远低于睾丸肿瘤毛细血管内皮细胞P-gp表达(P<0.01).结论睾丸恶性肿瘤病人存在抗癌药物血睾屏障,其机制为肿瘤间质毛细血管内皮细胞过量表达P-gp所引起,而非肿瘤细胞自身表达P-gp所引起.     

5种经典耐药基因在儿童常见恶性肿瘤的表达及临床意义

目的通过检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)5种耐药基因表达蛋白在儿童常见恶性肿瘤组织中的表达,探讨儿童恶性肿瘤耐药的机制,为临床选择敏感的个体化化疗方案提供实验室证据。方法选择40例儿童常见恶性肿瘤的病理切片标本,采用免疫组化的方法检测5种耐药蛋白(P-gp、MRP1、LRP、GST-π、Topo-Ⅱ)的表达,分析常见儿童恶性肿瘤耐药蛋白的表达及差异,分析儿童常见恶性肿瘤多药耐药的机制。结果(1)P-gp在卵黄囊瘤所有结构中都呈高阳性率、高强度的表达,说明P-gp过度表达是造成卵黄囊瘤耐药的主要机制。MRP1所介导的药物耐药性可能为卵黄囊瘤耐药的补充机制。LRP、GST-π在卵黄囊瘤多药耐药机制中可能起着协同作用。(2)横纹肌肉瘤中P-gp、GST-π的表达较其他耐药蛋白高。(3)神经母细胞瘤中P-gp、MRP1、Topo-Ⅱ的表达较高。(4)肾母细胞瘤中LRP、Topo-Ⅱ的表达较其他几种耐药蛋白低。(5)恶性淋巴瘤中5种耐药蛋白的表达均低。结论不同的肿瘤类型具有不同的耐药基因表达特点,其肿瘤...     

496例婴幼儿阑尾炎临床分析

目的总结3岁以下婴幼儿阑尾炎的临床表现及实验室检查等结果,以提高婴幼儿阑尾炎早期诊断率,降低病死率,减少并发症。方法完整统计该院1984年1月至2009年10月收治的8 622例小儿阑尾炎的临床资料,并将其中496例婴幼儿阑尾炎的症状、体征、实验室检查以及手术结果进行回顾性分析。结果婴幼儿阑尾炎全组无死亡病例,穿孔率为43%,并发腹膜炎患儿占45.8%,手术460例,病理结果以化脓及坏疽性阑尾炎为主。结论婴幼儿阑尾炎的症状、体征不典型,病情进展快,穿孔率高,易出现各种并发症,早期准确诊断和及时有效治疗是提高治愈率和减少术后并发症的关键。